一种荧光淬灭方法及Fe3O4/GO定量分析方法

一种荧光淬灭方法及fe3o4/go定量分析方法
技术领域
1.本发明属于分析化学领域，具体涉及一种荧光淬灭方法及fe3o4/go定量分析方法。


背景技术：

2.石墨烯是单原子层的平面碳二维纳米材料，基本结构是sp2杂化碳原子形成的稳定的类六元环结构。氧化石墨烯（go）是石墨烯最为常见的衍生物之一，它除了具有与石墨烯相类似的结构，其表面还带有石墨烯没有的含氧基团，如羟基、羧基和环氧基等，这些含氧活性基团的引入不仅使其拥有良好的水溶性和稳定性，而且可使go更易于修饰而具有功能化作用。正是由于这些独特的物理与化学性质和良好的生物相容性，使其成为最受欢迎的生物医学应用材料之一。（参看 zhu y et.al, graphene and graphene oxide: synthesis, properties, and applications, adv mater 2010, 22: 3906
‑
3924）。
3.除此之外，不同类型的纳米复合物与石墨烯形成的复合材料，近年来引起了人们极大的兴趣。其中磁性纳米粒子（mnps）利用制备较方便，超顺磁性，易分离等优点与go结合，并对其表面进行修饰，形成磁功能化的的go，在众多领域具有广泛的应用（参看刘亚旭，磁性荧光复合纳米材料的制备及其生物医学应用，锦州医科大学硕士学位论文，2016）。目前，磁功能化的go荧光猝灭研究鲜为报道。


技术实现要素：

4.本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供一种荧光淬灭方法及fe3o4/go定量分析方法。
5.本发明所采取的技术方案如下：一种荧光淬灭方法，其采用fe3o4/go复合材料，所述fe3o4/go复合材料采用以下方法制备得到：采用水热合成法合成fe3o4磁性纳米粒子，采用超声的方式将fe3o4附着在go表面，然后进行peg功能化的修饰，合成fe3o4/go复合材料；将fe3o4/go复合材料与带有荧光修饰的物质结合。
6.一种fe3o4/go定量分析方法，（1）采用水热合成法合成fe3o4磁性纳米粒子，采用超声的方式将fe3o4磁性纳米粒子附着在go表面，然后进行peg功能化的修饰，合成fe3o4/go复合材料；（2）取fe3o4/go复合材料配制一系列浓度的fe3o4/go溶液，配制一定浓度的荧光基团修饰的ssdna溶液，充分混合，孵育一定时间，采用荧光分光光度计检测各溶液的荧光信号值，绘制以fe3o4/go浓度为横坐标、荧光信号为纵坐标绘制折线图；（3）在待测的fe3o4/go溶液中加荧光基团修饰的ssdna溶液，充分混合，与步骤（2）孵育相同的时间，使用荧光分光光度计检测测试的混合溶液的荧光信号，并利用步骤（2）折线图获得待测的fe3o4/go溶液中fe3o4/go的浓度。
7.其中ssdna序列为5
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。
8.所述待测的fe3o4/go溶液的浓度为0
‑
50 ug/ml。
9.本发明的有益效果如下：本发明利用fe3o4/go可使带有荧光修饰的物质的荧光淬
灭，灵敏可靠；2）采用原位分析方法，无需进行繁琐费时的预处理，便捷高效。
附图说明
10.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，根据这些附图获得其他的附图仍属于本发明的范畴。
11.图1为以fe3o4/go浓度为横坐标（x）、荧光信号（y）为纵坐标的折线图；图2为以孵育时间为横坐标（x）、荧光信号（y）为纵坐标的折线图。
具体实施方式
12.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步地详细描述。
13.以下实施例采用的fe3o4/go的制备方法如下：采用水热合成法合成fe3o4磁性纳米粒子，采用超声的方式将fe3o4附着在go表面，然后进行peg功能化的修饰，合成fe3o4/go复合材料。
14.具体制备过程如下：取0.5克四水合氯化亚铁和1.3克六水合三氯化铁溶于100毫升水中，充氮气，转速为300，升温到40度后，加入6.25 毫升氨水（25%）升温到60度，反应45分钟，冷却，各使用无水乙醇和水洗三遍磁铁分离得到fe3o4产物，最后溶于100 毫升水中备用。取0.1克 go 溶于100毫升的水中，超声1小时，细胞破碎仪破碎40分钟，然后加入100毫升的fe3o4继续超声30分钟，各使用无水乙醇和水洗三遍磁铁分离得fe3o4/go产物。将100mg四臂聚乙二醇胺加入20毫升fe3o4/go (1毫克每毫升的浓度溶解在水中)，超声10 分钟然后加入1毫升edc(20毫克每毫升溶解在水中)。上述溶液在室温下摇晃过夜。所得产物用磁铁分离，用水洗涤，得到fe3o4/go复合材料。
15.实施例1 ：绘制fe3o4/go浓度
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荧光信号折线图。配制体积为150ul的fe3o4/go的pbs溶液7份，浓度分别为0、10、20、50、100、200、500、1000 μg/ml；每份溶液均加入150ul的浓度为200 nm的荧光修饰的ssdna，置于摇床40 min，充分混合；采用超微量紫外/荧光全功能分光光度计（美国denovix公司，ds
‑
11fx+, 发射波长480 nm，激发波长520 nm）检测各溶液的荧光信号，并绘制以fe3o4/go浓度为横坐标（x）、荧光信号（y）为纵坐标的折线图，从图中可以看出，随着fe3o4/go浓度的增大，对ssdna荧光猝灭能力增强，以及，在fe3o4/go浓度为0
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50μg/ml的范围中，fe3o4/go浓度与荧光信号呈线性关系。
16.实施例2：绘制fe3o4/go
‑
荧光信号随孵育时间变化折线图。配制100 μg/ml的fe3o4/go，加入200 nm的荧光修饰的ssdna，置于摇床10 min，20 min, 30min, 40min充分混合；采用超微量紫外/荧光全功能分光光度计（美国denovix公司，ds
‑
11fx+, 发射波长480 nm，激发波长520 nm）检测不同时间段各溶液的荧光信号，并绘制以时间为横坐标（x）、荧光信号（y）为纵坐标的折线图，从图中可以看出随着孵育时间的增长，对ssdna荧光猝灭作用不断增强。
17.以上所揭露的仅为本发明较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范
围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。


技术特征：
1.一种荧光淬灭方法，其特征在于：其采用fe3o4/go复合材料，所述fe3o4/go复合材料采用以下方法制备得到：采用水热合成法合成fe3o4磁性纳米粒子，采用超声的方式将fe3o4附着在go表面，然后进行peg功能化的修饰，合成fe3o4/go复合材料；将fe3o4/go复合材料与带有荧光修饰的物质结合。2.一种fe3o4/go定量分析方法，其特征在于包括以下步骤：（1）采用水热合成法合成fe3o4磁性纳米粒子，采用超声的方式将fe3o4磁性纳米粒子附着在go表面，然后进行peg功能化的修饰，合成fe3o4/go复合材料；（2）取fe3o4/go复合材料配制一系列浓度的fe3o4/go溶液，配制一定浓度的荧光基团修饰的ssdna溶液，充分混合，孵育一定时间，采用荧光分光光度计检测各溶液的荧光信号值，绘制以fe3o4/go浓度为横坐标、荧光信号为纵坐标绘制折线图；（3）在待测的fe3o4/go溶液中加荧光基团修饰的ssdna溶液，充分混合，与步骤（2）孵育相同的时间，使用荧光分光光度计检测测试的混合溶液的荧光信号，并利用步骤（2）折线图获得待测的fe3o4/go溶液中fe3o4/go的浓度。3.根据权利要求2所述的fe3o4/go定量分析方法，其特征在于：其中ssdna序列为5
’‑ꢀ
ataccagcttattcaatt
‑3’
。4.根据权利要求2所述的fe3o4/go定量分析方法，其特征在于：所述待测的fe3o4/go溶液的浓度为0
‑
50 ug/ml。

技术总结
本发明属于分析化学领域，具体涉及一种荧光淬灭方法及Fe3O4/GO定量分析方法。本发明利用Fe3O4/GO可使带有荧光修饰的物质的荧光淬灭，灵敏可靠；2）采用原位分析方法，无需进行繁琐费时的预处理，便捷高效。便捷高效。便捷高效。


技术研发人员：齐金霞 张虎祥 高申孟 张莹 周斌 郭丽莎 包晓冬 尤安福 林苗苗 林艳虹
受保护的技术使用者：温州医科大学附属第一医院
技术研发日：2021.10.12
技术公布日：2021/11/28