利用是否生成中和抗体和干扰素-γ的用于主动免疫诊断的信息提供方法与流程

本发明涉及一种利用是否生成中和抗体和干扰素-γ的用于主动免疫诊断的信息提供方法。

背景技术：

1、近年来，用于预防和治疗sars-cov-2感染症的疫苗的研究活跃，预计推广使用各种疫苗。因此，需要一种通过确认已接种疫苗的人中是否很好的形成中和抗体来确认是否需要重新接种疫苗的方法或者可以确认通过自然感染产生中和抗体而形成免疫的人是否需要接种疫苗的方法。

2、已知干扰素γ(interferon gamma，ifn-γ)在初期宿主防御中对于先天免疫细胞带来的微生物识别以及针对细胞内病原体的细胞介导的免疫(细胞免疫(cell mediatedimmunity))的形成非常重要(schroder等，j leukoc biol.2004feb；75(2):163-89)。特别地，对特定抗原敏感的t细胞被相同的抗原再刺激时会分泌ifn-γ，因此ifn-γ分泌水平应用于结核杆菌(mycobacterium tuberculosis)和巴西利什曼虫(leishmaniabraziliensis)等细菌或病毒感染的诊断(pai等，ann intern med.2008；149(3):177-184，turgay n等，am j trop med hyg，2010oct；83(4):822-4)。

3、另外，中和抗体是指病原体或感染性颗粒侵蚀身体时通过中和生物学影响来防御细胞的抗体，为了判断是否通过疫苗形成主动免疫，必须确认是否形成中和抗体。

4、因此，本发明人通过确认接种疫苗后接种者的血液中是否形成中和抗体和干扰素γ以及其趋势来判断接种者是否需要重新接种，从而判断可以实现用于生成中和抗体的有效的接种。

技术实现思路

1、要解决的技术问题

2、本发明是根据如上所述的需求而获得的，本发明人开发了一种通过细胞介导免疫检查快速确认主动免疫后是否生成中和抗体和干扰素γ的用于主动免疫诊断的信息提供方法，从而完成了本发明。

3、技术方案

4、本发明提供一种用于主动免疫诊断的信息提供方法，其包括以下步骤：(a)准备多个生物样品；(b)准备第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包含针对sars-cov-2的疫苗抗原或由所述疫苗表达的蛋白抗原，所述第二试剂包含所述第一试剂中包含的抗原之外的源自sars-cov-2的蛋白；(c)将所述生物样品与所述试剂进行混合以制备多个混合样品；(d)准备多个检测试剂，所述检测试剂包含缀合物，所述缀合物包含信号产生工具和抗干扰素γ抗体；(e)在所述混合样品中添加所述检测试剂，从而准备多个分析样品；以及(f)将所述分析样品加载到多个侧流盒中，并用信号检测器测量信号，所述多个检测试剂中的一个以上进一步包含：复合物，所述复合物由源自sars-cov-2的刺突s1蛋白的受体结合域(receptor-binding domain，rbd)蛋白和通过与所述受体结合域蛋白结合而产生可检测的信号的信号产生工具组成；以及生物素(biotin)化的人血管紧张素转换酶2(humanangiotensin-converting enzyme 2，hace2)。

5、在所述步骤(b)中，可以进一步准备包含nil的第三试剂和包含分裂素(mitogen)的第四试剂。

6、所述步骤(f)的侧流盒可以包括条带，所述条带包括：注入分析样品的样品注入部；固定有抗干扰素γ抗体的第一测试线；固定有链霉亲和素(streptavidin)的第二测试线；以及固定有捕获剂的对照线。

7、所述生物样品可以是血液、血球或淋巴液。

8、所述信号产生工具可以是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，hrp)等用于显色的酶或铕纳米颗粒(铕(iii)螯合物纳米颗粒(europium(iii)chelatenanoparticle，eunp))等荧光物质。

9、有益效果

10、本发明可以提供一种判断是否形成干扰素γ和中和抗体的侧流检测方法。

11、本发明可以通过测量是否形成干扰素γ和中和抗体来提供用于主动免疫诊断的信息。

12、本发明中还测量疫苗接种后接种者血液中的干扰素γ的形成，并直接确认是否通过细胞免疫过程生成稳定的中和抗体(主动免疫)，从而迅速判断接种者是否需要重新接种，并且可以提高接种的效率，并且可以防止由不必要的重新接种引起的社会财政的浪费。

技术特征：

1.一种用于主动免疫诊断的信息提供方法，其包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的用于主动免疫诊断的信息提供方法，其中，所述步骤(b)包括进一步准备包含nil的第三试剂和包含分裂素的第四试剂的步骤。

3.根据权利要求1或2所述的用于主动免疫诊断的信息提供方法，其中，所述步骤(f)的侧流盒包含条带，所述条带包括：

4.根据权利要求1或2所述的用于主动免疫诊断的信息提供方法，其特征在于，所述生物样品是血液、血球或淋巴液。

5.根据权利要求1或2所述的用于主动免疫诊断的信息提供方法，其特征在于，所述信号产生工具是辣根过氧化物酶(hrp)或eunp。

技术总结
本发明涉及一种通过细胞介导免疫检查快速确认主动免疫后是否生成中和抗体和干扰素γ，从而提供用于主动免疫诊断的信息的方法。本发明的目的在于提供一种通过细胞介导免疫检查确认是否生成主动免疫后的中和抗体和干扰素γ，从而更准确且快速地判断是否生成中和抗体和干扰素γ的方法。本发明提供一种用于主动免疫诊断的信息提供方法，其包括以下步骤：(a)准备多个生物样品；(b)准备第一试剂和第二试剂，所述第一试剂包含针对SARS‑CoV‑2的疫苗抗原或由所述疫苗表达的蛋白抗原，所述第二试剂包含所述第一试剂中包含的抗原之外的源自SARS‑CoV‑2的蛋白；(c)将所述生物样品与所述试剂进行混合以制备多个混合样品；(d)准备多个检测试剂，所述检测试剂包含缀合物，所述缀合物包含信号产生工具和抗干扰素γ抗体；(e)在所述混合样品中添加所述检测试剂，从而准备多个分析样品；以及(f)将所述分析样品加载到多个侧流盒中，并用信号检测器测量信号，所述多个检测试剂中的一个以上中进一步包含：复合物，所述复合物由源自SARS‑CoV‑2的刺突S1蛋白的受体结合域(RBD)蛋白和通过与所述受体结合域蛋白结合而产生可检测的信号的信号产生工具组成；以及生物素化的人血管紧张素转换酶2(hACE2)。

技术研发人员：崔东焕,权玟硕,边熙汀
受保护的技术使用者：韩国巴迪泰生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22