一种T细胞病理切片检测试剂的制作方法

文档序号:32402491发布日期:2022-12-02 19:29阅读:22来源:国知局
一种t细胞病理切片检测试剂
技术领域
1.本发明涉及医疗检测领域,具体为一种t细胞病理切片检测试剂。


背景技术:

2.t淋巴细胞(t-lymphocyte)来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝),在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前t细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的t细胞,很多严重的疾病就是因为t细胞发生病变开始,所以很多医院都会设有专门对t细胞进行检测的科室,其中细胞病理切片检测试剂是必不可少的。
3.但是现如今的t细胞病理切片检测试剂需要培养t细胞时间较长,会导致整个检测时间加长。


技术实现要素:

4.本发明的目的在于:为了解决t细胞病理切片检测试剂需要培养t细胞时间较长,会导致整个检测时间加长的问题,提供一种t细胞病理切片检测试剂。
5.为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种t细胞病理切片检测试剂,所述试剂组成成分为cd2810ml,hla抗原5ml、lgg10ml、lfa-15ml,e受体5ml。
6.优选地,所述具体使用方法如下:
7.s1:首先取肝素抗凝的静脉血,pbs稀释后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,之后开始离心机离心,去上层液取两液交界处的单个核细胞层,再次加入5倍pbs并离心;
8.s2:取出上层液,使用沉淀,之后使用滴灌加入试剂(cd2810ml,hla抗原5ml、lgg10ml、lfa-15ml,e受体5ml);
9.s3:并将其放入无菌箱中操作之后,将混合后的细胞液玻片上静置2分钟;
10.s4:之后将玻片顶部外侧涂抹防脱片剂,盖上另一组洁净玻片;
11.s5:在无菌箱中模拟血液温度,使其在静止1小时,取出在显微镜下检测即可。
12.优选地,所述cd285ml,hla抗原5ml、lgg5ml、lfa-15ml,e受体2ml。
13.优选地,所述cd2815ml,hla抗原5ml、lgg15ml、lfa-110ml,e受体8ml。
14.优选地,所述s5中无菌箱中的温度保持在37.1摄氏度。
15.优选地,所述s1中第一次离心时间为18分钟,所述第二次离心时间为5分钟,所述第一次离心速度为2000转/分钟,所述第二次离心速度为1000转/分钟。
16.与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明通过添加等质量比的cd28、hla抗原、lgg、lfa-1、e受体,模拟t细胞在血液中的环境,加快t细胞的分裂速度,通过检测cd3、cd4(th)、cd8(ts)、cd4/cd8(th/ts)来对比正常细胞分裂产生的比例,从而判段t细胞的病理。
具体实施方式
17.下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
18.一种t细胞病理切片检测试剂,试剂组成成分为cd2810ml;其配体是抗原提呈细胞表面的b分子,两者结合产生协同刺激信号,诱导t细胞活化、hla抗原5ml;静息状态下的外周血t细胞只表达hla-i类抗原,某些活化t细胞可同时表达i、ⅱ类抗原、lgg10ml;细胞的单克隆抗体与t细胞表面抗原结合后,再与荧光标记二抗(兔或羊抗鼠igg)反应,在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数cd的百分率、lfa-15ml,e受体5ml,与绵羊红细胞结合,属黏附分子,为淋巴细胞功能相关抗原—2(lfa—2),其配体是抗原提呈细胞和其他靶细胞上的lfa—3,促进t细胞与抗原提呈细胞的结合和相互作用,诱导活化,多种方式结合,能够快速激活t细胞,能够加快t细胞的分离,从而方便检测。
19.取肝素抗凝的静脉血,pbs稀释后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,之后开始离心机离心,去上层液取两液交界处的单个核细胞层,再次加入5倍pbs并离心;
20.s2:取出上层液,使用沉淀,之后使用滴灌加入试剂(cd2810ml,hla抗原5ml、lgg10ml、lfa-15ml,e受体5ml);
21.s3:并将其放入无菌箱中操作之后,将混合后的细胞液玻片上静置2分钟;
22.s4:之后将玻片顶部外侧涂抹防脱片剂,盖上另一组洁净玻片;
23.s5:在无菌箱中模拟血液温度,使其在静止1小时,取出在显微镜下检测即可。
24.根据权利要求1的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:cd285ml,hla抗原5ml、lgg5ml、lfa-15ml,e受体2ml;
25.通过提取静脉血,在其中经过一些离心处理提取单核细胞,之后配合本试剂制成玻片能够加快细胞反应,从而方便检测。
26.cd285ml,hla抗原5ml、lgg5ml、lfa-15ml,e受体2ml;
27.通过加入因为各种量的减少,会导致刺激单核细胞的因素减小,当单核细胞分裂时需要时间较长,会导致检测时间加长。
28.cd2815ml,hla抗原5ml、lgg15ml、lfa-110ml,e受体8ml;
29.通过加入高质量比的cd28、hla抗原、lgg、lfa-1、e受体,单核细胞分裂时间不见减小,会导致本试剂制造成本增大。
30.实施例一
31.通过荧光标记法(ifa)检测,身体数据正常显示数值:
32.cd3为63.1%
±
10.8%;
33.cd4(th)为42.8%
±
9.5%;
34.cd8(ts)为19.6%
±
5.9%;
35.cd4/cd8(th/ts)为(2.2
±
0.7)/1。
36.当使用显微镜检测时,cd3降低:自身有免疫疾病;
37.cd4降低:恶性肿瘤;
38.cd8减低:自身免疫性疾病或变态反应性疾病;
39.cd4/cd8比值增高:见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒性感染、变态反应等;
40.cd4/cd8比值减低:常见于艾滋病;
41.cd3、cd4、cd8较高且有cd1、cd2、cd5、cd7增高则可能为t细胞型急性淋巴细胞白血病。
42.对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何标记视为限制所涉及的权利要求。


技术特征:
1.一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述试剂组成成分为cd2810ml,hla抗原5ml、lgg10ml、lfa-15ml,e受体5ml。2.根据权利要求1所述的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述具体使用方法如下:s1:首先取肝素抗凝的静脉血,pbs稀释后,沿装有等量淋巴细胞分离液的试管壁混匀缓慢加至液面上层,之后开始离心机离心,去上层液取两液交界处的单个核细胞层,再次加入5倍pbs并离心;s2:取出上层液,使用沉淀,之后使用滴灌加入试剂(cd2810ml,hla抗原5ml、lgg10ml、lfa-15ml,e受体5ml);s3:并将其放入无菌箱中操作之后,将混合后的细胞液玻片上静置2分钟;s4:之后将玻片顶部外侧涂抹防脱片剂,盖上另一组洁净玻片;s5:在无菌箱中模拟血液温度,使其在静止1小时,取出在显微镜下检测即可。3.根据权利要求1所述的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述cd285ml,hla抗原5ml、lgg5ml、lfa-15ml,e受体2ml。4.根据权利要求1所述的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述cd2815ml,hla抗原5ml、lgg15ml、lfa-110ml,e受体8ml。5.根据权利要求2所述的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述s5中无菌箱中的温度保持在37.1摄氏度。6.根据权利要求2所述的一种t细胞病理切片检测试剂,其特征在于:所述s1中第一次离心时间为18分钟,所述第二次离心时间为5分钟,所述第一次离心速度为2000转/分钟,所述第二次离心速度为1000转/分钟。

技术总结
本发明公开了一种T细胞病理切片检测试剂,涉及医疗检测领域;所述试剂组成成分为CD2810ml,HLA抗原5ml、lgG10ml、LFA-15ml,E受体5ml。本发明通过添加等质量比的CD28、HLA抗原、lgG、LFA-1、E受体,模拟T细胞在血液中的环境,加快T细胞的分裂速度,通过检测CD3、CD4(TH)、CD8(TS)、CD4/CD8(TH/TS)来对比正常细胞分裂产生的比例,从而判段T细胞的病理。从而判段T细胞的病理。


技术研发人员:王丽丽
受保护的技术使用者:北京瑞贝怡可生物科技有限公司
技术研发日:2022.09.02
技术公布日:2022/12/1
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