本发明涉及兴奋剂检测,具体而言,涉及一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒及检测方法。
背景技术:
1、沙丁胺醇(sal),是一种短效β2肾上腺素能受体激动剂,用作平喘药,能有效地抑制组胺等致过敏性物质的释放、防止支气管痉挛。适用于支气管哮喘、喘息性支气管炎、支气管痉挛、肺气肿等症。
2、添加微量沙丁胺醇于牲畜饲料内,可以增加牲畜的瘦肉量及换肉率、减少脂肪,但是其毒性较大,属于违规添加的药物。食用含有沙丁胺醇的食物会对人体造成损害,而运动员食用这样的食品后还会使体内含有沙丁胺醇,而沙丁胺醇又是体育赛事中被严禁使用的药品。因此,检测沙丁胺醇在食品安全领域具有重要意义。
3、在现有技术中,对于沙丁胺醇的检测方法主要为液相色谱-质谱联用技术。该检测技术虽然能够对沙丁胺醇准确的进行检测,然而,其所需要的液相色谱和质谱仪器价格高昂,导致检测方法的成本较高。同时,该检测方法的检测步骤和操作过程复杂,往往要求专业水平高的人员进行检测,导致该方法难以大规模推广。
4、另外,液相色谱和质谱仪器的体积较大,难以移动,当体育赛场需要进行实时检测时,难以实现,这就限制了体育比赛中对沙丁胺醇的应检尽检。
5、目前尚未有针对沙丁胺醇的快速检测方法。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题是提供一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒及检测方法。
2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下:
3、本发明提供一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,包括沙丁胺醇核苷酸适配体溶液、金纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液;其中,所述沙丁胺醇核苷酸适配体的核苷酸序列如seqid no.1所示。
4、本发明还可以通过以下进一步技术方案实现:
5、进一步,所述金纳米颗粒溶液的浓度为0.35mg/ml,所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液的浓度大于或等于1μm。
6、进一步,所述金纳米颗粒表面包裹有柠檬酸钠。
7、进一步,所述金纳米颗粒的粒径为4~6nm。
8、进一步,所述氯化钠溶液的浓度为0.45~0.55mol/l。
9、本发明还提供一种采用上述的试剂盒对沙丁胺醇的检测方法,将所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液与待测样品溶液混合,加入所述金纳米颗粒并混合,得到混合溶液;再向所述混合溶液中加入所述氯化钠溶液;
10、当所述混合溶液的颜色变化时,所述待测样品溶液中含有沙丁胺醇,当所述混合溶液的颜色未变化时,所述待测样品溶液中不含有沙丁胺醇。
11、进一步,所述待测样品溶液、所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液、所述金纳米颗粒溶液以及所述氯化钠溶液的体积比为1:1:7:1。
12、进一步,通过肉眼判断所述混合溶液的颜色变化;具体的判断方式为,当所述混合溶液的颜色由亮红色变为深蓝色时,所述待测样品溶液中含有沙丁胺醇。
13、进一步,通过吸光光度检测仪判断所述混合溶液的颜色变化;具体的判断方式为,当所述混合溶液在波长为650nm处的吸光强度升高、并在波长为520nm处的吸光强度下降时,所述待测样品溶液中含有沙丁胺醇。
14、进一步,所述混合溶液在650nm处的吸光强度为a650,在波长为520nm处的吸光强度为a520,a650/a520的值与所述待测样品溶液中沙丁胺醇的含量呈正比。
15、本发明的有益效果为:
16、(1)本发明的沙丁胺醇检测方法,利用核苷酸适配体与沙丁胺醇以及金纳米颗粒的不同静电结合作用,通过添加氯化钠使溶液变色,实现了沙丁胺醇的可视化检测;
17、(2)本发明的沙丁胺醇检测方法,检测步骤仅涉及添加各试剂的操作,无需依赖仪器,步骤简单、操作方便,降低了检测成本;
18、(3)本发明的沙丁胺醇检测方法,溶液变色快,无需等待,大大缩短了检测时间,实现了沙丁胺醇的快速检测;
19、(4)本发明的沙丁胺醇检测方法,既能够进行定性检测,也能够根据溶液吸光强度的变化进行定量检测,具有广泛的适用性;
20、(5)本发明的沙丁胺醇检测方法,更加适合在体育赛场等场合进行临时性的检测,实现了体育比赛中对沙丁胺醇的应检尽检。
1.一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,其特征在于,包括沙丁胺醇核苷酸适配体溶液、金纳米颗粒溶液以及氯化钠溶液;其中,所述沙丁胺醇核苷酸适配体的核苷酸序列如seq idno.1所示。
2.根据权利要求1所述一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,其特征在于,所述金纳米颗粒溶液的浓度为0.35mg/ml,所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液的浓度大于或等于1μm。
3.根据权利要求1所述一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,其特征在于,所述金纳米颗粒表面包裹有柠檬酸钠。
4.根据权利要求3所述一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,其特征在于,所述金纳米颗粒的粒径为4~6nm。
5.根据权利要求1~4任意一项所述一种用于检测沙丁胺醇的试剂盒,其特征在于,所述氯化钠溶液的浓度为0.45~0.55mol/l。
6.一种采用如权利要求1~5任意一项所述的试剂盒对沙丁胺醇的检测方法,其特征在于,将所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液与待测样品溶液混合,加入所述金纳米颗粒溶液并混合,得到混合溶液;再向所述混合溶液中加入所述氯化钠溶液;
7.根据权利要求6所述一种沙丁胺醇的检测方法,其特征在于,所述待测样品溶液、所述沙丁胺醇核苷酸适配体溶液、所述金纳米颗粒溶液以及所述氯化钠溶液的体积比为1:1:7:1。
8.根据权利要求6所述一种沙丁胺醇的检测方法,其特征在于,通过肉眼判断所述混合溶液的颜色变化;具体的判断方式为,当所述混合溶液的颜色由亮红色变为深蓝色时,所述待测样品溶液中含有沙丁胺醇。
9.根据权利要求6所述一种沙丁胺醇的检测方法,其特征在于,通过吸光光度检测仪判断所述混合溶液的颜色变化;具体的判断方式为,当所述混合溶液在波长为650nm处的吸光强度升高、并在波长为520nm处的吸光强度下降时,所述待测样品溶液中含有沙丁胺醇。
10.根据权利要求9所述一种沙丁胺醇的检测方法,其特征在于,所述混合溶液在650nm处的吸光强度为a650,在波长为520nm处的吸光强度为a520,a650/a520的值与所述待测样品溶液中沙丁胺醇的含量呈正比。