一种分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法与流程

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法。

背景技术：

1、缬沙坦氨氯地平片为缬沙坦和苯磺酸氨氯地平的复方制剂，适用于治疗原发性高血压，主要用于那些单独采用氨氯地平或缬沙坦等药物治疗后效果不佳的高血压患者；缬沙坦为n-(1-戊酰基)-n-[4-[2-(1h-四氮唑-5-基)苯基]苄基]-l-缬氨酸，缬沙坦中含有1个手性中心，存在1对对映异构体，由于r-对映体药物活性远低于s-对映体，故需要控制r-对映体(缬沙坦对映异构体)的限度。

2、

3、现有技术中，《中国药典》2020年版四部中是以α-酸性糖蛋白柱(agp)为色谱柱，ph7.0磷酸盐缓冲液-异丙醇(98:2)为流动相，在波长为227nm下分离检测缬沙坦原料中的对映异构体；该方法存在agp柱使用条件严苛，且使用寿命短等问题。

4、公开号为cn114689731a的中国专利文献公开了一种缬沙坦对映异构体的检测方法，检测条件为：od色谱柱，以正已烷为流动相a，含0.1％三氟乙酸的乙醇为流动相b，流速0.5～1.0ml/min，柱温20～40℃，检测波长为210～270nm；该方法为正相液相色谱法，od色谱柱价格昂贵，对杂质承受能力低，使用寿命短，且利用梯度洗脱，方法较为复杂，同时基于手性色谱柱的hplc法重复性差，实验室间的方法学转移难度大。

5、公开号为cn115248262a的中国专利文献公开了一种缬沙坦及对映异构体的分离检测方法，该发明采用chiralpak ia色谱柱，流动相为正相混合溶剂正己烷-异丙醇，在流速为0.8～1.2ml/min，色谱柱温度为33～37℃，检测波长为227nm的条件下进行分离检测。chiralpak ia色谱柱是将淀粉-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面作为填料，价格昂贵，且该方法仅适用于单独缬沙坦中对映异构体的检测。

6、为了克服上述现有技术的不足，有必要开发一种易于实施、抗干扰能力强、方法简单、重复性高、实验室之间易于进行方法学转移的基于c18反相色谱柱的hplc法用于分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中的对映异构体。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种基于c18反相色谱柱的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，该方法分离度高，操作简便易行，能够更好地控制缬沙坦氨氯地平药物组合物的产品质量。

2、具体采用的技术方案如下：

3、一种分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，使用c18为填料的反相色谱柱，以含有三乙醇胺的乙腈-水作为流动相，利用等度洗脱对缬沙坦氨氯地平药物组合物中的缬沙坦对映异构体进行hplc分离测定。

4、与现有技术中使用的α-酸性糖蛋白柱或od色谱柱等相比，c18色谱柱寿命长、通用性好，ph值耐受范围宽，本发明利用常见的、易于获得的c18色谱柱即可实现缬沙坦对映异构体的分离测定，且分离检测效果好，另外，本发明以含有三乙醇胺的乙腈-水为流动相，三乙醇胺能够与缬沙坦对映异构体通过氢键等非共价键结合形成可逆的非对映体配合物，从而实现缬沙坦和缬沙坦对映异构体的分离。

5、优选的，所述的c18为填料的反相色谱柱选用welch xtimate c18，150×4.6mm，3μm。上述型号的色谱柱的性能更好，可耐受的ph值范围更宽，达到1.0～12.5。

6、优选的，所述的流动相中乙腈和水的体积比为45～50：50～55。

7、进一步优选的，所述的流动相中，三乙醇胺的体积占乙腈和水的总体积的0.2-0.4％。当流动相中的三乙醇胺含量在上述范围时，检测效果好。

8、所述的hplc的色谱条件包括：

9、流动相流速0.8～1.0ml/min；

10、色谱柱温度28～30℃；

11、检测器采用紫外检测器，检测波长为230nm。

12、进一步优选的，所述的hplc的色谱条件包括：流动相流速0.8ml/min；色谱柱温度30℃。

13、取缬沙坦氨氯地平药物组合物适量，研细，使用流动相溶解后过滤，制备成缬沙坦浓度为0.4-0.6mg/ml的供试品溶液后，再进行hplc分离测定。

14、优选的，供试品溶液的进样量为5～10μl。

15、进一步优选的，供试品溶液的进样量为10μl。

16、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

17、(1)本发明方法采用常见的、易于获得的c18色谱柱即可实现缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的分离检测，且分离检测效果好，使用的反相色谱系统具有色谱介质性能稳定，ph值耐受范围宽，分离能力强，易于操作等优点，能够更加方便的实现缬沙坦氨氯地平药物组合物的质量控制。

18、(2)本发明选用含有三乙醇胺的乙腈-水作为流动相，其中三乙醇胺能与缬沙坦对映异构体通过氢键等非共价键结合形成可逆的非对映体配合物，使缬沙坦和缬沙坦对映异构体在固定相的保留时间和分配不同而得到分离，本发明检测方法定量限为0.1467μg/ml，检测限为0.0734μg/ml，专属性良好、准确度良好、且对仪器设备要求低、灵敏度良好、进样精密度和重复性好，实际检测效果良好。

技术特征：

1.一种分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，使用c18为填料的反相色谱柱，以含有三乙醇胺的乙腈-水作为流动相，利用等度洗脱对缬沙坦氨氯地平药物组合物中的缬沙坦对映异构体进行hplc分离测定。

2.根据权利要求1所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，所述的c18为填料的反相色谱柱选用welch xtimate c18，150×4.6mm，3μm。

3.根据权利要求1所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，所述的流动相中乙腈和水的体积比为45～50：50～55。

4.根据权利要求1所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，所述的流动相中，三乙醇胺的体积占乙腈和水的总体积的0.2-0.4％。

5.根据权利要求1所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，

6.根据权利要求1或5所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，所述的hplc的色谱条件包括：流动相流速0.8ml/min；色谱柱温度30℃。

7.根据权利要求1所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，取缬沙坦氨氯地平药物组合物适量，研细，使用流动相溶解后过滤，制备成缬沙坦浓度为0.4-0.6mg/ml的供试品溶液后，再进行hplc分离测定。

8.根据权利要求7所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，供试品溶液的进样量为5～10μl。

9.根据权利要求7所述的分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，其特征在于，供试品溶液的进样量为10μl。

技术总结
本发明公开了一种分离检测缬沙坦氨氯地平药物组合物中对映异构体的方法，属于药物分析领域，该方法使用C18为填料的反相色谱柱，以含有三乙醇胺的乙腈‑水作为流动相，利用等度洗脱对缬沙坦氨氯地平药物组合物中的缬沙坦对映异构体进行HPLC分离测定。本发明使用的反相色谱系统具有色谱介质性能稳定，pH值耐受范围宽，分离能力强，易于操作等优点，且本发明方法专属性良好、准确度良好、对仪器设备要求低、灵敏度良好、进样精密度和重复性好，实际检测效果良好，能够更好地控制缬沙坦氨氯地平药物组合物的产品质量。

技术研发人员：刘景萍,刘全国,符丹玉,陈克领
受保护的技术使用者：海南葫芦娃药业集团股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11