一种用于石蜡切片的组织脱蜡液及脱蜡方法与流程

本发明属于病理检验，具体涉及一种用于石蜡切片的组织脱蜡液及脱蜡方法。

背景技术：

1、为探讨器官、组织或细胞所发生的疾病过程，会将病变组织或细胞制成切片或涂片，经过染色后在显微镜下观察，检查它们所发生的病变，探讨病变产生的病因、发病机理、病变的发生发展过程，最后作出病理诊断。目前病理检查已大量应用于临床工作及科学研究。

2、石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法，其制作方法为：将组织经过固定、取材、洗涤和脱水、透明、浸蜡等操作处理，使石蜡浸入组织中包埋形成蜡块，再进行切片、摊片和烤片即得。所得石蜡切片经过脱蜡、染色、再脱水、再透明、封片等步骤，才能在显微镜下观察。在上述步骤中，脱蜡是必经的过程。

3、传统的脱蜡方法是依次经过二甲苯i15min，二甲苯ii 15min，二甲苯iii 15min，无水乙醇i 5min，无水乙醇ii 5min，95％酒精i 5min，95％酒精ii 5min，80％酒精5min，70％酒精5min，蒸馏水洗；整个过程不仅操作繁琐，脱蜡时间长，而且二甲苯做为脱蜡剂，具有强烈刺激性气味，长时间接触会危害人体健康，还会污染环境。

技术实现思路

1、针对现有技术中的问题，本发明的目的在于提供一种安全、快速的组织脱蜡液和脱蜡方法。

2、为了实现上述目的，本发明的技术方案具体为：

3、一种用于石蜡切片的组织脱蜡液，包括d-柠檬烯、脂肪醇聚氧乙烯醚-9(aeo-9)和水。

4、进一步地，在上述技术方案中，组织脱蜡液包括1～5％ d-柠檬烯，10～25％脂肪醇聚氧乙烯醚-9以及余量的水，按体积比计。

5、进一步地，在上述技术方案中，组织脱蜡液的制备过程为：先将水加热至45～80℃，加入脂肪醇聚氧乙烯醚-9溶解，再加入d-柠檬烯混匀，冷却至室温即得。在溶解aeo-9之前，先对水进行加热，可以加快aeo-9的溶解速度。

6、本发明进一步提供了用于石蜡切片的脱蜡方法，具体为：将石蜡切片烤片后浸入预热的组织脱蜡液中进行脱蜡反应。

7、进一步地，在上述技术方案中，脱蜡反应的条件为：60～65℃下反应15～30min。

8、进一步地，在上述技术方案中，待所述脱蜡反应结束后，直接用水冲洗切片上残留的组织脱蜡液。

9、本发明的有益效果为：

10、1)d-柠檬烯与aeo-9按比例复配后，与水混合形成稳定透明的溶液，对石蜡具有极好的乳化、分散、润湿性能；且其脱蜡效果与传统的二甲苯无异，可以取得较好的染色效果；

11、2)本发明的组织脱蜡液安全无毒，对人和环境均不会造成影响，还可以重复使用2～3次；

12、3)本发明的组织脱蜡液用于脱蜡时，步骤少，时间短，操作极为简单；而且由于脱蜡液是水溶性的，脱完蜡后可直接用水洗，进行染色步骤，不需要经过复水操作，进一步简化步骤并节约时间。

技术特征：

1.一种用于石蜡切片的组织脱蜡液，其特征在于，包括d-柠檬烯、脂肪醇聚氧乙烯醚-9和水。

2.根据权利要求1所述的组织脱蜡液，其特征在于，按体积比计，所述组织脱蜡液包括1～5％d-柠檬烯，10～25％脂肪醇聚氧乙烯醚-9以及余量的水。

3.根据权利要求1所述的组织脱蜡液，其特征在于，所述组织脱蜡液的制备过程为：先将水加热至45～80℃，加入脂肪醇聚氧乙烯醚-9溶解，再加入d-柠檬烯混匀，冷却至室温即得。

4.一种用于石蜡切片的脱蜡方法，其特征在于，将石蜡切片烤片后浸入预热的组织脱蜡液中进行脱蜡反应。

5.根据权利要求4所述的脱蜡方法，其特征在于，所述脱蜡反应的条件为：60～65℃下反应15～30min。

6.根据权利要求4所述的脱蜡方法，其特征在于，待所述脱蜡反应结束后，直接用水冲洗切片上残留的组织脱蜡液。

技术总结
本发明提供了一种用于石蜡切片的组织脱蜡液及脱蜡方法，所述组织脱蜡液包括D‑柠檬烯、脂肪醇聚氧乙烯醚‑9和水，将石蜡切片烤片后浸入预热的组织脱蜡液中即可脱蜡。本发明的脱蜡液安全无毒，与传统的二甲苯脱蜡效果无差异，能取代二甲苯用于常规石蜡切片的脱蜡；而且操作简便，脱蜡时间短，适宜进一步推广应用。

技术研发人员：冷毅斌,舒翔,熊蓉蓉
受保护的技术使用者：武汉优恩生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11