一种检测头孢克肟有关物质的方法与流程

本发明涉及检测方法领域，特别是涉及一种检测头孢克肟有关物质的方法。

背景技术：

1、头孢克肟为口服用的第三代头孢菌素类抗生素，适用于治疗敏感菌所致的呼吸、泌尿和胆道等部位的感染。头孢克肟中有关物质可能会影响头孢克肟产品的安全性和有效性，需要进行检测以控制产品的质量。

2、目前头孢克肟有关物质的检测方法，只能实现单独检测降解杂质或单独检测聚合物杂质，并且分离能力较差，无法实现对每个已知杂质的定位。采用目前的检测方法对头孢克肟有关物质进行检测，一方面需要检测多次，导致药物分析工作人员工作量极大；另一方面检测能力有限，无法保证较好地对质量进行控制，导致产品的安全性存在隐患。

技术实现思路

1、基于此，本发明的目的在于，提供一种检测头孢克肟有关物质的方法，能够实现同时检出头孢克肟的有关物质，包括杂质a1、杂质a2、杂质a3、杂质a4、杂质b1、杂质b2、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、反式杂质b1、反式杂质b2、头孢克肟叔丁酯a、头孢克肟聚合物b、头孢克肟二聚体d、头孢克肟7位甲酯、头孢克肟imp杂质、头孢克肟氧化杂质和avna杂质1，能实现将头孢克肟有关物质与头孢克肟主峰完全分开，且每个杂质的分离度均能满足药典定量检测要求，能很好的满足原料药和制剂工艺过程中的杂质监控及原料药和制剂的成品中的杂质控制要求，具有检出能力强、稳定性好、专属性强的优点。

2、一种检测头孢克肟有关物质的方法。采用液相色谱法进行检测，所述有关物质为杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、反式杂质b、头孢克肟叔丁酯a、头孢克肟聚合物b、头孢克肟二聚体d、头孢克肟7位甲酯、头孢克肟imp杂质、头孢克肟氧化杂质和avna杂质1；其中所述杂质a包括杂质a1、杂质a2、杂质a3和杂质a4；所述杂质b包括杂质b1和杂质b2；所述反式杂质b包括反式杂质b1和反式杂质b2；所述液相色谱法的检测条件包括：

3、色谱柱：ods柱；

4、流动相a：乙酸铵水溶液和甲醇，所述流动相a中乙酸铵水溶液和甲醇的体积比为95：5，所述流动相a的ph为4.1；

5、流动相b：乙酸铵水溶液和甲醇，所述流动相b中乙酸铵水溶液和甲醇的体积比为50：50，所述流动相b的ph为3.8-3.9；

6、检测过程采用梯度洗脱程序进行，所述梯度洗脱程序的流动相由流动相a和流动相b组成，所述梯度洗脱程序设置如下：

7、在0～5min，流动相a的体积百分含量为90-100％；

8、在5～10min，流动相a的体积百分含量为85-95％；

9、在10～20min，流动相a的体积百分含量为80-90％；

10、在20～30min，流动相a的体积百分含量为70-80％；

11、在30～60min，流动相a的体积百分含量为60-70％；

12、在60～75min，流动相a的体积百分含量为30-40％；

13、在75～85min，流动相a的体积百分含量为0-10％；

14、在85～95min，流动相a的体积百分含量为90-100％。

15、本发明所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，能够实现同时检出头孢克肟的有关物质，包括杂质a1、杂质a2、杂质a3、杂质a4、杂质b1、杂质b2、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、反式杂质b1、反式杂质b2、头孢克肟叔丁酯a、头孢克肟聚合物b、头孢克肟二聚体d、头孢克肟7位甲酯、头孢克肟imp杂质、头孢克肟氧化杂质和avna杂质1，具有检出能力强、稳定性好、专属性强的优点。

16、进一步地，所述梯度洗脱程序设置如下：

17、在0～5min，流动相a的体积百分含量为100％；

18、在5～10min，流动相a的体积百分含量为95％；

19、在10～20min，流动相a的体积百分含量为90％；

20、在20～30min，流动相a的体积百分含量为80％；

21、在30～60min，流动相a的体积百分含量为70％；

22、在60～75min，流动相a的体积百分含量为40％；

23、在75～85min，流动相a的体积百分含量为0％；

24、在85～95min，流动相a的体积百分含量为100％。

25、进一步地，所述液相色谱法的检测条件还包括：

26、所述色谱柱的规格：4.6*250mm，5μm；

27、柱温：40-45℃；

28、流速：1.5ml/min；

29、进样器温度：4-15℃；

30、进样量：20μl；

31、检测波长：254nm。

32、进一步地，所述乙酸铵水溶液的浓度为3.85g/l。

33、进一步地，所述色谱柱的前端还接有鬼峰捕集柱。在色谱柱前端接入鬼峰捕集柱，可以减少基线噪音对杂质检测的干扰，减少从业人员的工作量。

34、进一步地，所述方法包括以下步骤：

35、配制空白溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、对照品溶液和供试品溶液；

36、用液相色谱进行检测，获取检测结果，进行定性、定量分析。

37、进一步地，采用加校正因子的主成分自身对照法计算所述有关物质的含量。相对于对目前药典采用的面积归一法和不加校正因子的自身对照法，采用加校正因子的主成分自身对照法，可以对头孢克肟中所有已知杂质准确定量，即能更准确地得知杂质的真实含量，并且能更准确反应产品真实质量。

38、进一步地，所述校正因子采用标准曲线法测定。

39、进一步地，所述分析包括定性和/或定量分析。

40、为了更好地理解和实施，下面结合附图详细说明本发明。

技术特征：

1.一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，采用液相色谱法进行检测，所述有关物质为杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、反式杂质b、头孢克肟叔丁酯a、头孢克肟聚合物b、头孢克肟二聚体d、头孢克肟7位甲酯、头孢克肟imp杂质、头孢克肟氧化杂质和avna杂质1；其中所述杂质a包括杂质a1、杂质a2、杂质a3和杂质a4；所述杂质b包括杂质b1和杂质b2；所述反式杂质b包括反式杂质b1和反式杂质b2；所述液相色谱法的检测条件包括：

2.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序设置如下：

3.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述液相色谱法的检测条件还包括：

4.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述乙酸铵水溶液的浓度为3.85g/l。

5.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述色谱柱的前端还接有鬼峰捕集柱。

6.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

7.根据权利要求1所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，采用加校正因子的主成分自身对照法计算所述有关物质的含量。

8.根据权利要求7所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述校正因子采用标准曲线法测定。

9.根据权利要求8所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述标准曲线法包括以下步骤：

10.根据权利要求6所述的一种检测头孢克肟有关物质的方法，其特征在于，所述分析包括定性和/或定量分析。

技术总结
本发明涉及一种检测头孢克肟有关物质的方法，涉及药物质量检测技术领域。该方法包括使用高效液相色谱法检测，所述高效液相色谱法的检测条件包括：流动相：由流动相A和流动相B组成，其中，流动相A为乙酸铵水溶液‑甲醇(95：5)，流动相B为乙酸铵水溶液‑甲醇(50：50)。本发明提供的检测头孢克肟聚合物杂质的方法能能够实现同时检出头孢克肟的有关物质，包括杂质A1、杂质A2、杂质A3、杂质A4、杂质B1、杂质B2、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、反式杂质B1、反式杂质B2、头孢克肟叔丁酯A、头孢克肟聚合物B、头孢克肟二聚体D、头孢克肟7位甲酯、头孢克肟imp杂质、头孢克肟氧化杂质和AVNA杂质1，具有检出能力强、稳定性好、专属性强的优点。

技术研发人员：陈燕苹,姜安民,黄梓洋,黄论达
受保护的技术使用者：广药白云山化学制药(珠海)有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12