一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法与流程

本发明涉及一种测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，特别是涉及一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法。

背景技术：

1、2,4-二溴-5-氯苯甲酸，是一种有机芳香羧酸，在室温下为白色固体，可以溶于丙酮、甲醇、乙醇、n,n-二甲基酰胺中。2,4-二溴-5-氯苯甲酸是用于制备兽药常山酮的重要中间体之一。该化合物是通过2,4-二溴-5-氯甲苯经由氧化得到，在药物合成中应用较为广泛，且该中间体质量对后续中间体及最终产品影响极大。

2、因此，研究开发一种2,4-二溴-5-氯苯甲酸的检验方法是一个亟待解决的课题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，本发明采用乙腈-三氟乙酸水溶液混合溶液体系，外标法定量分析2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的分析方法。该方法具有样品处理及分析过程简单，分析结果准确性高，重现性好特点。本发明可以准确测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的高效液相色谱分析方法，用于评估经由amoco法制备得到的2,4-二溴-5-氯苯甲酸质量，利于实现后续中间体及产品常山酮的质量控制。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述方法包括以下步骤：

4、1)液相色谱条件：色谱柱：zorbaxeclipsexdb-c18；流动相：a:0.01mol/l三氟乙酸水溶液，b:乙腈，a:b＝(50-5):(50-95)；流速：1.000ml/min；波长：210nm；柱温：30.0℃；进样量：10.0μl；

5、2)精密称量2,4-二溴-5-氯苯甲酸标准品，使用0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液溶解定量，配制成不同浓度的标准溶液；

6、3)用流动相走基线至波动小于0.5mau，再分析步骤2)中的标准溶液，绘制标准曲线；

7、4)精确称取待测样品，使用0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液定容成待测样溶液；进待测样溶液进行分析测试，计算2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量即可。

8、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述zorbaxeclipse xdb-c18色谱柱，型号为4.6mm×150mm，5.0μm，

9、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述步骤2)和步骤4)中0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液为两者的等体积混合液。

10、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述步骤2)中不同浓度的标准溶液分别为0.25μg/ml、0.50μg/ml、0.75μg/ml、1.00μg/ml、1.50μg/ml的标准溶液。

11、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述步骤4)中待测样品为2,4-二溴-5-氯甲苯经amoco法氧化得到的2,4-二溴-5-氯苯甲酸粗品。

12、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述步骤4)中待测样品精密称取0.1g，使用乙腈定容至50ml，取10ml该溶液并使用0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液进行二次稀释并定容至50ml。

13、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述步骤4)中在仪器基线平稳后，先注入标准溶液，测定结果与理论值偏差≤1％后，进待测样溶液进行分析测试。

14、所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，所述测试时，在2,4-二溴-5-氯苯甲酸目标峰完全出峰后，增大流动相中乙腈体积比例至95％直至2,4-二溴-5-氯甲苯与色谱柱分离后，再将流动相恢复为乙腈占比50％，基线稳定后进行下一次测试。

15、本发明的优点与效果是：

16、采用本发明所述的高效液相色谱分析的色谱条件，实现了2,4-二溴-5-氯苯甲酸在色谱柱上的保留，同时可以与其制备使用的原料2,4-二溴-5-氯甲苯充分分离，不仅可以用于2,4-二溴-5-氯苯甲酸的含量测定，也可用于2,4-二溴-5-氯甲苯制备2,4-二溴-5-氯苯甲酸的反应中控，以监测反应的转化进度。本方法的准确度高，重现性良好，线性良好，灵敏度高，检测下限低至0.02μg/ml，信号峰对称性好。采用本发明的方法可快速准确测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸的含量。

技术特征：

1.一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述zorbaxeclipsexdb-c18色谱柱，型号为4.6mm×150mm，5.0μm，

3.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述步骤2)和步骤4)中0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液为两者的等体积混合液。

4.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述步骤2)中不同浓度的标准溶液分别为0.25μg/ml、0.50μg/ml、0.75μg/ml、1.00μg/ml、1.50μg/ml的标准溶液。

5.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述步骤4)中待测样品为2,4-二溴-5-氯甲苯经amoco法氧化得到的2,4-二溴-5-氯苯甲酸粗品。

6.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述步骤4)中待测样品精密称取0.1g，使用乙腈定容至50ml，取10ml该溶液并使用0.01mol/l三氟乙酸水溶液和乙腈的混合溶液进行二次稀释并定容至50ml。

7.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述步骤4)中在仪器基线平稳后，先注入标准溶液，测定结果与理论值偏差≤1％后，进待测样溶液进行分析测试。

8.根据权利要求1所述的一种用高效液相色谱测定2,4-二溴-5-氯苯甲酸含量的方法，其特征在于，所述测试时，在2,4-二溴-5-氯苯甲酸目标峰完全出峰后，增大流动相中乙腈体积比例至95％直至2,4-二溴-5-氯甲苯与色谱柱分离后，再将流动相恢复为乙腈占比50％，基线稳定后进行下一次测试。

技术总结
一种用高效液相色谱测定2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸含量的方法，涉及一种测定2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸含量的方法，采用高效液相色谱法测定2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸含量的方法，采用乙腈‑三氟乙酸水溶液混合溶液体系，外标法定量分析2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸含量的分析方法。其色谱条件为：色谱柱：ZORBAXEclipseXDB‑C18；流动相：A:三氟乙酸水溶液，B:乙腈，A:B＝(50‑5):(50‑95)；流速：1.000mL/min；检测波长：210nm；进样量：10.0μL；柱温：30.0oC。该方法具有样品处理及分析过程简单，分析结果准确性高，重现性好等优点。可以准确测定2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸含量的高效液相色谱分析，用于评估经由Amoco法制备得到的2,4‑二溴‑5‑氯苯甲酸质量，利于实现后续中间体及产品常山酮的质量控制。

技术研发人员：沈困知,李善柱,刘睿,王越,王思萌
受保护的技术使用者：沈阳感光化工研究院有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11