一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法

本发明属于药物分析，具体涉及一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法。

背景技术：

1、金花茶(camellia nitidissima)是一种药食同源的珍稀植物，主要分布在我国的西南部和越南北部，是我国一级保护植物，享有“茶族皇后”美誉。目前世界上已报道的金花茶有42种和5个变种，其中29种5个变种均产于广西南部和西南部。金花茶作为广西民间草药，含有很多活性成分，包含黄酮、皂苷、挥发油、多糖、氨基酸及微量元素等多种成分，具有很高的药用价值，被越来越多的人们所关注。据《广西中药材标准第2册》记载，金花茶有清热解毒，利尿消肿的功能，可用于咽喉炎，痢疾，肾炎，水肿，尿路感染，黄疸型肝炎，肝硬化腹水，高血压，疮疡，预防肿瘤。近年来，关于金花茶的药理研究也表明，其具有抗氧化，降血糖，抗抑郁，抗焦虑，抗肥胖，抗菌，抗癌等多种活性。对此，需要一种快速、简便的分析方法来对金花茶中多种活性成分进行质量评价。

2、目前为止，针对金花茶中化学成分的定量多采用高效液相色谱-紫外检测(hplc-uv),但并不是所有的检测成分都有较好的紫外吸收，还会受基质干扰，该测定方法灵敏度不足以适用于提取物的检测。鉴于此，亟需建立一种灵敏度高，快速的金花茶醇提物中化合物含量测定方法，为金花茶提取物的内控质量标准建设提供更多依据。

技术实现思路

1、本发明旨在解决上述技术问题，提供一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，该测定方法简单，能够实现对金花茶中多种有效成分的同时检测。

2、本发明的技术方案为：

3、一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，包括以下步骤：

4、(1)标准品溶液的配制：取没食子酸、儿茶素、表儿茶素、阿魏酸、芦丁、异槲皮苷、槲皮苷、芹甙元-7-葡萄糖苷、杨梅素、根皮苷、槲皮素、山奈酚、金丝桃苷、木犀草素、夏佛塔苷、落新妇苷，分别加甲醇溶解，然后混合，稀释，得到含有16种化合物的标准品溶液；

5、(2)制作标准曲线：取步骤(1)的标准品溶液，采用液相色谱-质谱联用的检测方法检测，记录每个浓度化合物对应的峰面积，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制出线性标准曲线；

6、(3)供试品溶液的配制：取待测金花茶样品，加入0.1mol/l盐酸-乙醇标准溶液，加热提取，滤过，滤液放冷，调节ph至3.5-4，在45℃下蒸干，加入甲醇溶解，滤过，再经稀释，得到供试品溶液；

7、(4)测定方法：取步骤(3)的供试品溶液，采用液相色谱-质谱联用的检测方法检测，通过步骤(2)的标准曲线计算待测金花茶样品中16种成分的浓度。

8、作为一个优选的方案，步骤(3)中，所述金花茶样品与所述0.1mol/l盐酸-乙醇标准溶液的料液比为1:(30-50)。

9、作为一个优选的方案，所述液相色谱-质谱条件如下：

10、液相色谱条件：色谱柱：zorbax rrhd eclipse plus c18；流动相a为0.1％甲酸水，流动相b为乙腈，洗脱方式为梯度洗脱，流速：0.2ml/min；柱温：30℃；进样量：10μl；

11、质谱条件：采用电喷雾离子源esi，喷雾电压：-4500v；离子源温度：450℃，氮气作为加热气和雾化气，雾化气：45psi，加热气：45psi，气帘气：30psi；扫描方式为多反应监测模式mrm，每个离子对的滞留时间为50ms。

12、作为一个优选的方案，所述梯度洗脱的洗脱程序为：0-5min,13-13％流动相b；5-6min，13-15％流动相b；6-15min，15-18％流动相b；15-17min，18-23％流动相b；17-19min，23-25％流动相b；19-23min，25-25％流动相b；23-24min，25-30％流动相b；24-27min，30-60％流动相b；27-28min，60-13％流动相b；28-30min，13-13％流动相b。

13、由于采用上述技术方案，本发明的有益效果为：本发明采用液质联用技术建立了金花茶中16个化合物含量测定方法，可以对金花茶的质量进行分析，建立的液质联用方法灵敏度高、专属性强，重现性好，为完善金花茶质量控制标准提供了依据。

技术特征：

1.一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，其特征在于：步骤(3)中，所述金花茶样品与所述0.1mol/l盐酸-乙醇标准溶液的料液比为1:(30-50)。

3.如权利要求1所述的液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，其特征在于：所述液相色谱-质谱条件如下：

4.如权利要求3所述的液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序为：0-5min,13-13％流动相b；5-6min，13-15％流动相b；6-15min，15-18％流动相b；15-17min，18-23％流动相b；17-19min，23-25％流动相b；19-23min，25-25％流动相b；23-24min，25-30％流动相b；24-27min，30-60％流动相b；27-28min，60-13％流动相b；28-30min，13-13％流动相b。

技术总结
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种液质联用同时检测金花茶中16种成分含量的方法，包括以下步骤：(1)标准品溶液的配制；(2)制作标准曲线；(3)供试品溶液的配制；(4)测定方法：取步骤(3)的供试品溶液，采用液相色谱‑质谱联用的检测方法检测，通过步骤(2)的标准曲线计算待测金花茶样品中16种成分的浓度。本发明可以对金花茶的质量进行分析，建立的液质联用方法灵敏度高、专属性强，重现性好，为完善金花茶质量控制标准提供了依据。

技术研发人员：杨克迪,韩小芳,武雨欣,李晓敏,葛利
受保护的技术使用者：广西大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13