与血管正常化相关的血浆蛋白作为肺腺癌早期诊断及预后标志物及其应用

本发明涉及蛋白组学及肿瘤学，尤其涉及与血管正常化相关的血浆蛋白作为肺腺癌早期诊断及预后标志物及其应用。

背景技术：

1、肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。由于持续增长的烟草消费、严重的环境污染以及生活方式的改变，肺癌已严重威胁到我国居民的生命和健康。非小细胞肺癌约占所有肺癌病例的85％，而肺腺癌是非小细胞肺癌最常见的组织学亚型，约占所有非小细胞肺癌的60％。更重要的是，肺腺癌的发病特征在不同性别间存在差异，近年来女性肺腺癌患者的发病率明显增加。由于肺腺癌早期通常无症状且转移风险较高，同时缺乏有效的筛查项目，因此导致很多肺腺癌患者在晚期才被诊断，预后很差。然而，事实证明在早期就被诊断的肺腺癌患者或接受过手术的患者更有可能获得较好的生存率，这表明现如今迫切需要一个有效的筛查和诊断策略，以便更早的发现和诊断肺腺癌。

2、尽管在肺腺癌的临床应用中通常推荐使用组织活检和组织生物标志物并且不可替代。但是组织活检的主要临床意义是通过病理学检查对良性和恶性肿瘤进行鉴别，通常是给予患者最终诊断的一步，难以用于肺腺癌的早期筛查和早期诊断。组织生物标志物可以指示治疗效果并预测肺腺癌患者的生存率。然而，组织生物标志物需要在发现肿瘤组织之后才能进行检测，且组织采样具有侵袭性，不仅难以获取，还可能会对患者造成一定的伤害，同时有些患者由于自己的意愿或其他医疗原因无法进行组织采样。有时为了获得足够的样本，患者需要重复活检，多次采样可能加重了患者的身体负担。而液体活检的出现有望弥补这些局限性，可能更适合那些不愿意或不能进行组织活检的肺腺癌患者。

3、液体活检的样本涉及血液、粘膜、胸腔积液、尿液和脑脊液等。由于血液样本的获取和分析比其他体液更方便、更实惠，血液已成为液体活检分析的关键液体。血液活检是一种有价值的诊断工具，可以支持鉴别诊断、估计预后和早期发现残余或进展中的疾病。血液活检的分析物包括循环肿瘤细胞、循环核酸、cfdna的肿瘤来源部分、cfrna、细胞外囊泡、肿瘤诱导血小板、蛋白质和代谢物等。

4、肿瘤异常血管的特征是内皮连接不连续和基底层缺失，这促使肿瘤细胞及其相关物质进入体内循环。因此，来源于肿瘤细胞的血浆蛋白生物标志物在识别肺腺癌方面可能更敏感和特异，因此需要识别血浆蛋白的来源。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术中对于早期的肺腺癌缺乏有效的筛查和诊断策略的技术问题。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、一种与血管正常化相关的血浆蛋白作为标志物在制备肺腺癌早期诊断或预后的试剂或试剂盒中的应用。

4、优选的，所述血浆蛋白为gpi和pgd中的一种或其组合。

5、本申请还提供了一种肺腺癌早期诊断的试剂盒，所述试剂盒以血浆蛋白gpi和pgd中的一种或其组合作为标志物。

6、本申请还提供了gpi和pgd用于肺腺癌早期诊断的候选血浆蛋白生物标志物的验证方法，包含以下步骤：

7、s1：样本收集和资料整理；

8、s2：计算roc曲线和auc。

9、优选的，所述样本包括102名肺腺癌病例和102名健康对照者；所述病例组都经由病理组织学的证实，排除了有既往恶性肿瘤病史、其他器官转移及采血前接受过化疗或放疗的病人；健康对照组则是从接受常规健康检查的健康人群中，按照年龄、性别频数匹配的原则，随机抽选出来的，所有对照均是排除了有呼吸系统疾病或恶性肿瘤病史的健康对照。

10、本申请还提供了gpi和pgd用于肺腺癌预后的候选血浆蛋白生物标志物的验证方法，包括以下步骤：

11、s1：生存分析；

12、s2：功能分析。

13、本申请中通过在肺腺癌病人肿瘤组织和血浆中差异表达一致的蛋白进行了探索，发现肿瘤组织中gpi蛋白的高表达会降低血管正常化水平，从而导致肺腺癌病人血浆中gpi蛋白表达水平的增高。同时血浆中pgd蛋白的表达与肿瘤组织血管正常化水平呈负相关，说明血浆中gpi和pgd的表达水平能反应肿瘤组织血管正常化水平，从而预测肺腺癌病人的转移风险。在此基础上，构建了小鼠荷瘤主动转移模型，发现有肺转移的原位肿瘤组织呈现出异常的血管形态，且gpi和pgd在有肺转移的小鼠的肿瘤组织中表达量最高，进一步验证了血浆中gpi和pgd的浓度可以反映肿瘤内血管的正常化水平，推断肿瘤转移的风险和恶性程度，为评估肺腺癌病人的预后做出贡献。

技术特征：

1.一种与血管正常化相关的血浆蛋白作为标志物在制备肺腺癌早期诊断或预后的试剂或试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述血浆蛋白为gpi和pgd中的一种或其组合。

3.一种肺腺癌早期诊断的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒以血浆蛋白gpi和pgd中的一种或其组合作为标志物进行检测。

4.gpi和pgd用于肺腺癌早期诊断的候选血浆蛋白生物标志物的验证方法，其特征在于：包含以下步骤：

5.根据权利要求4所述的gpi和pgd用于肺腺癌早期诊断的候选血浆蛋白生物标志物的验证方法，其特征在于：所述样本包括102名肺腺癌病例和102名健康对照者；所述病例组都经由病理组织学的证实，排除了有既往恶性肿瘤病史、其他器官转移及采血前接受过化疗或放疗的病人；健康对照组则是从接受常规健康检查的健康人群中，按照年龄、性别频数匹配的原则，随机抽选出来的，所有对照均是排除了有呼吸系统疾病或恶性肿瘤病史的健康对照。

6.gpi和pgd用于肺腺癌预后的候选血浆蛋白生物标志物的验证方法，其特征在于：包括以下步骤：

技术总结
本发明提供与血管正常化相关的血浆蛋白作为标志物在制备肺腺癌早期诊断或预后的试剂或试剂盒中的应用，涉及蛋白组学及肿瘤学技术领域，所述血浆蛋白为GPI和PGD中的一种或其组合。本申请通过验证发现肿瘤组织中GPI的高表达会降低血管正常化水平，从而导致肺腺癌病人血浆中GPI表达水平的增高。同时血浆中PGD蛋白的表达与肿瘤组织血管正常化水平呈负相关，说明血浆中GPI和PGD的表达水平能反应肿瘤组织血管正常化水平，以预测肺腺癌病人的转移风险。在此基础上，构建小鼠荷瘤主动转移模型，发现有肺转移的原位肿瘤组织呈现出异常的血管形态，且GPI和PGD在有肺转移的小鼠的肿瘤组织中表达量最高，进而验证了血浆中GPI和PGD的浓度可以反映肿瘤内血管的正常化水平。

技术研发人员：褚敏捷,崔佳华,刘以然,田甜,张磊
受保护的技术使用者：南通大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13