一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物及其应用

本申请涉及生物医学，尤其涉及一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物及其应用。

背景技术：

1、早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,poi)是指女性在40岁之前出现卵巢功能衰退的综合征，临床上常以月经周期紊乱为先兆，主要表现为月经稀发或停经，也可出现潮热、盗汗、失眠等围绝经期综合征症状。卵巢功能下降还会增加心血管疾病、骨质疏松、认知障碍等远期并发症风险，引起多器官、多系统功能障碍，严重影响患者的身心健康和生活质量。更重要的是，poi会导致生殖功能显著下降，在确诊之后，只有约10％的患者可因早期卵巢功能的间歇性紊乱自然受孕，而且即使可以成功受孕，因卵母细胞的质量下降，子代的健康也会受到不同程度的影响，从长远看将极大影响人口增长和人口质量。因此，poi对于患者个人的健康和事业发展、家庭幸福，以及社会的稳定和国家的发展都有难以估量的影响，而对poi早预防、早发现、早干预以降低远期并发症和其他系统相关疾病的风险是十分重要的。

2、目前临床上主要依靠血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,fsh)水平和患者月经情况来诊断poi，诊断标准为月经稀发或停经至少4个月，且间隔超过4周、连续两次血清fsh水平>25iu/l。然而，血清学检测为有创操作，且当患者达到诊断标准时，其卵巢功能往往已经近乎完全衰竭，无法有效预测poi的发生。此外，poi病因复杂，受遗传、环境、免疫、感染、医疗等多种因素的影响，饮食也是其中的一个重要因素。据研究报道，长期高脂饮食除导致代谢紊乱以外，也会损害卵巢功能，导致始基卵泡减少、卵泡刺激素水平升高、雌激素水平降低、生育力下降等poi表型，但是目前临床上尚缺乏针对高脂饮食诱导poi的特异性生物标志物。因此，开发一种针对高脂饮食诱导poi的特异性生物标志物，将有利于该人群的早发现、早诊断和早治疗，为改善其卵巢功能提供理论和技术支持。

3、根据目前的研究报道，肠道菌群代谢产物会参与多种疾病的发生发展，如糖尿病、高血压、非酒精性脂肪肝等，这提示肠道菌群代谢产物有成为疾病新型生物标志物的巨大潜力。但是，目前肠道菌群代谢产物对poi的诊疗价值尚不清楚，因此如何提供来源于肠道菌群代谢产物的诊断标志物，以实现对早发性卵巢功能不全的准确诊断，是目前亟需解决的技术问题。

技术实现思路

1、本申请提供了一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物及其应，以填补现有技术中肠道菌群代谢产物对poi诊疗的空白。

2、第一方面，本申请提供了一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物，所述诊断标志物为高于正常水平表达的肠道菌群代谢产物，所述肠道菌群代谢产物包括l-酵母氨酸；

3、其中，所述早发性卵巢功能不全是由高脂饮食所导致的。

4、进一步地，所述l-酵母氨酸的含量相对于正常的l-酵母氨酸含量的1.64倍以上。

5、进一步地，当所述l-酵母氨酸的含量高于正常l-酵母氨酸含量的1.64倍时，则判断此时卵巢处于早发性卵巢功能不全的状态。

6、进一步地，所述l-酵母氨酸的受试者工作特征曲线的曲线下面积≥0.97。

7、第二方面，本申请提供了一种筛选第一方面所述的诊断标志物的方法，所述方法包括：

8、构建高脂饮食诱导早发性卵巢功能不全的动物模型；

9、评估所述动物模型的一般情况和卵巢功能，判断动物模型是否存在早发性卵巢功能不全；

10、若是，则收集所述动物模型的粪便；

11、对收集的所述粪便进行代谢组学分析，并筛选出差异代谢产物，后对差异代谢产物进行诊断能力评估，得到早发性卵巢功能不全的诊断标志物。

12、进一步地，所述一般情况包括体重变化、糖耐量水平和血脂水平。

13、进一步地，所述对收集的所述粪便进行代谢组学分析，并筛选出差异代谢产物，后对差异代谢产物进行诊断能力评估，得到早发性卵巢功能不全的诊断标志物，具体包括：

14、对收集的所述粪便进行前处理，后进行超高效液相色谱-串联质谱检测，得到检测数据；

15、提取所述检测数据的代谢物峰，后进行代谢物注释和代谢物定量，得到稳定的代谢物；

16、对所述稳定的代谢物进行差异代谢产物的筛选，得到生物标志物；

17、对所述生物标志物进行诊断能力的评估，得到早发性卵巢功能不全的诊断标志物。

18、第三方面，本申请提供了一种第一方面所述的诊断标志物的应用，所述应用包括将第一方面所述的诊断标志物用于筛查或辅助筛查早发性卵巢功能不全中；和/或，

19、将第一方面所述的诊断标志物用于评价或辅助评价早发性卵巢功能不全预后效果中。

20、第四方面，本申请提供了一种筛查或辅助筛查早发性卵巢功能不全的试剂，所述试剂包括检测肠道菌群代谢产物中l-酵母氨酸含量的药剂。

21、第五方面，本申请提供了一种评价或辅助评价早发性卵巢功能不全预后效果的试剂，所述试剂包括检测肠道菌群代谢产物中l-酵母氨酸含量的药剂。

22、本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点：

23、本申请实施例提供的一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物，通过本研究发现，在高脂饮食动物模型的粪便中的肠道菌群代谢产物中l-酵母氨酸的含量偏高，同时该高脂饮食动物模型也证实发生了早发性卵巢功能不全，而通过后期代谢组学分析和差异代谢产物的筛选，明确了l-酵母氨酸的含量和早发性卵巢功能不全之间具有一定关系，而后期对诊断能力的评估，进一步明确了l-酵母氨酸的含量可以作为早发性卵巢功能不全的诊断标志物，且该诊断标志物的灵敏度和特异度均较好，表明肠道菌群代谢产物l-酵母氨酸对早发性卵巢功能不全的预测性较好。

技术特征：

1.一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物，其特征在于，所述诊断标志物为高于正常水平表达的肠道菌群代谢产物，所述肠道菌群代谢产物为l-酵母氨酸；

2.根据权利要求1所述的诊断标志物，其特征在于，所述l-酵母氨酸的含量相对于正常的l-酵母氨酸含量的1.64倍以上。

3.根据权利要求2所述的诊断标志物，其特征在于，当所述l-酵母氨酸的含量高于正常l-酵母氨酸含量的1.64倍时，则判断此时卵巢处于早发性卵巢功能不全的状态。

4.根据权利要求1所述的诊断标志物，其特征在于，所述l-酵母氨酸的受试者工作特征曲线的曲线下面积≥0.97。

5.一种筛选如权利要求1-4任一项所述的诊断标志物的方法，其特征在于，所述方法包括：

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述一般情况包括体重变化、糖耐量水平和血脂水平。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述对收集的所述粪便进行代谢组学分析，并筛选出差异代谢产物，后对差异代谢产物进行诊断能力评估，得到早发性卵巢功能不全的诊断标志物，具体包括：

8.一种如权利要求1-4任一项所述的诊断标志物的应用，其特征在于，所述应用包括将如权利要求1-4任一项所述的诊断标志物用于筛查或辅助筛查早发性卵巢功能不全中；和/或，

9.一种筛查或辅助筛查早发性卵巢功能不全的试剂，其特征在于，所述试剂包括检测肠道菌群代谢产物中l-酵母氨酸含量的药剂。

10.一种评价或辅助评价早发性卵巢功能不全预后效果的试剂，其特征在于，所述试剂包括检测肠道菌群代谢产物中l-酵母氨酸含量的药剂。

技术总结
本申请涉及生物医学技术领域，尤其涉及一种早发性卵巢功能不全的诊断标志物及其应用；所述诊断标志物为高于正常水平表达的肠道菌群代谢产物，肠道菌群代谢产物为L‑酵母氨酸；其中，所述早发性卵巢功能不全是由高脂饮食所导致的；通过本研究发现，在高脂饮食动物模型的粪便中的肠道菌群代谢产物中L‑酵母氨酸的含量偏高，同时该高脂饮食动物模型也证实发生了早发性卵巢功能不全，而通过后期代谢学组分析和差异代谢产物的筛选，明确了L‑酵母氨酸的含量和早发性卵巢功能不全之间具有一定相关性，而后期对诊断能力的评估，明确了L‑酵母氨酸的含量可以作为早发性卵巢功能不全的诊断标志物。

技术研发人员：王世宣,张金金,文景宜
受保护的技术使用者：华中科技大学同济医学院附属同济医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13