一种N-Boc-L-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法及其应用与流程

本发明涉及药物分析，尤其是涉及一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法及其应用。

背景技术：

1、l-焦谷氨酸酯是一类重要且极具应用前景的手性诱导试剂，其具有五元含氮杂环和酯羰基、酰胺基双功能结构，且5个碳的反应活性各不相同，因此，l-焦谷氨酸酯可作为理想的手性原料合成大量天然或非天然的手性化合物，同时，由于其具有天然保温性能，作为原料/中间体广泛应用于日化和医药工业领域。由于制备条件较为温和，操作简便，n-boc-l-焦谷氨酸乙酯成为了最常用的l-焦谷氨酸酯之一，然而，由于其对映异构体n-boc-d-焦谷氨酸乙酯含量占比，会直接影响往后的工艺，进而直接影响该药物疗效。因此，分离n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体对加强n-boc-l-焦谷氨酸乙酯质量控制具有重要意义。

2、然而现有技术中尚未有n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体分离方法的相关报道。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法。

2、本发明还提出一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的检测方法。

3、本发明还提出上述分离或检测方法的应用。

4、根据本发明的一个方面，提出了一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，包括如下步骤：取含n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的供试品，通过液相色谱进行分离，所述液相色谱的色谱条件包括：以大赛璐色谱柱ad-h为固定相，以含有正己烷和无水乙醇的混合溶液作为流动相等度洗脱，其中，所述流动相中正己烷与无水乙醇的体积比为3～9：1，优选为5.67：1。

5、根据本发明的一种优选的实施方式，至少具有以下有益效果：通过本发明方案的色谱条件可实现n-boc-l-焦谷氨酸乙酯与其对映异构体的有效分离，两者分离度可达9.77以上。同时，通过本发明方案中n-boc-l-焦谷氨酸乙酯的保留时间短，可实现快速有效分离，为控制n-boc-l-焦谷氨酸乙酯的品质提供了技术保障。

6、在本发明的一些实施方式中，所述大赛璐色谱柱ad-h的规格参数包括：柱长250mm，内径4.6mm，料径为5μm。

7、在本发明的一些实施方式中，所述液相色谱的色谱条件还包括：流速为0.5ml/min～1.5ml/min；优选为1ml/min。

8、在本发明的一些实施方式中，所述液相色谱的色谱条件还包括：柱温为室温。

9、在本发明的一些实施方式中，所述室温是20℃～35℃；优选为25℃～35℃。

10、在本发明的一些实施方式中，所述液相色谱的色谱条件还包括：进样量为10μl～30μl，优选为20μl。

11、在本发明的一些实施方式中，所述流动相和/或稀释液中添加有二乙胺。加入二乙胺使峰型更好。

12、在本发明的一些实施方式中，所述流动相和/或稀释液中二乙胺的体积占比为0.1～2％。

13、在本发明的一些实施方式中，所述供试品为采用稀释液处理后的供试品，所述稀释液为正己烷-无水乙醇-二乙胺。本发明方案可仅在稀释液中添加，节约成本。

14、在本发明的一些实施方式中，所述供试品为采用稀释液处理后的供试品，所述稀释液为正己烷-无水乙醇-二乙胺，三者的体积比依次为85：15：(0.1～2)。

15、在本发明的一些优选实施方式中，所述供试品为采用稀释液处理后的供试品，所述稀释液为正己烷-无水乙醇-二乙胺，三者的体积比依次为85：15：1。

16、根据本发明的另一个方面，提出了一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：通过上述分离方法进行分离后，通过检测器对n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体进行检测。

17、根据本发明的一种优选的实施方式的检测方法，至少具有以下有益效果：通过本发明方案对n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体进行分离后，通过检测器检测时，色谱峰峰型良好，基线稳定，能够准确定位n-boc-l-焦谷氨酸乙酯与其对映异构体的主峰位置，具有专属性强、精密度高、准确度高、耐用性好等优点。

18、在本发明的一些实施方式中，所述检测器为紫外检测器。

19、在本发明的一些实施方式中，所述紫外检测器的检测波长为210nm。

20、在本发明的一些实施方式中，所述检测方法还包括通过保留时间对检测结果进行定性分析的步骤。

21、在本发明的一些实施方式中，所述检测方法还包括通过面积归一法对检测结果进行定量分析的步骤。

22、根据本发明的再一个方面，提出了上述分离或检测方法在n-boc-l-焦谷氨酸乙酯的质量控制中的应用。

23、根据本发明的一种优选的实施方式的质量控制，至少具有以下有益效果：本发明方案的分离方法及检测方法在n-boc-l-焦谷氨酸乙酯的质量控制中具有良好的应用前景。

24、本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。

技术特征：

1.一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：包括如下步骤：取含n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的供试品，通过液相色谱进行分离，所述液相色谱的色谱条件包括：以大赛璐色谱柱ad-h为固定相，以含有正己烷和无水乙醇的混合溶液作为流动相等度洗脱，其中，所述流动相中正己烷与无水乙醇的体积比为3～9：1，优选为5.67：1。

2.根据权利要求1所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：所述大赛璐色谱柱ad-h的规格参数包括：柱长250mm，内径4.6mm，料径为5μm。

3.根据权利要求1所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：所述液相色谱的色谱条件还包括：流速为0.5ml/min～1.5ml/min；优选为1ml/min。

4.根据权利要求1所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：所述液相色谱的色谱条件还包括：柱温为室温；优选地，所述室温是20℃～35℃；优选为25℃～35℃。

5.根据权利要求1所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：所述液相色谱的色谱条件还包括：进样量为10μl～30μl，优选为20μl。

6.根据权利要求1所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法，其特征在于：所述流动相和/或稀释液中添加有二乙胺；优选地，所述供试品为采用稀释液处理后的供试品，所述稀释液为正己烷-无水乙醇-二乙胺，三者的体积比依次为85：15：(0.1～2)；优选地，正己烷-无水乙醇-二乙胺的体积比依次为85：15：1。

7.一种n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括如下步骤：通过如权利要求1至6任一项所述的分离方法进行分离后，通过检测器对n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体进行检测。

8.根据权利要求7所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的检测方法，其特征在于：所述检测器为紫外检测器；优选地，所述紫外检测器的检测波长为210nm。

9.根据权利要求7所述的n-boc-l-焦谷氨酸乙酯对映异构体的检测方法，其特征在于：所述检测方法还包括通过保留时间对检测结果进行定性分析的步骤或通过面积归一法对检测结果进行定量分析的步骤。

10.如权利要求1至6任一项所述的分离方法或如权利要求7至9任一项所述的检测方法在n-boc-l-焦谷氨酸乙酯的质量控制中的应用。

技术总结
本发明公开了一种N‑Boc‑L‑焦谷氨酸乙酯对映异构体的分离方法及其应用，包括如下步骤：取含N‑Boc‑L‑焦谷氨酸乙酯对映异构体的供试品，通过液相色谱进行分离，所述液相色谱的条件包括：以大赛璐色谱柱AD‑H为固定相，以含有正己烷和无水乙醇的混合溶液作为流动相等度洗脱，其中，所述流动相中正己烷与无水乙醇的体积比为3～9：1。通过本发明方案的色谱条件可实现N‑Boc‑L‑焦谷氨酸乙酯与其对映异构体的有效分离，两者分离度可达9.77以上。同时，通过本发明方案中N‑Boc‑L‑焦谷氨酸乙酯的保留时间短，可实现快速有效分离，为控制N‑Boc‑L‑焦谷氨酸乙酯的品质提供了技术保障。

技术研发人员：邱坤新,莫汝见,欧一机,罗艳飞,廖晓妮,黄丽华
受保护的技术使用者：广西奕安泰药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13