一种微量血液过滤的方法及应用与流程

本发明涉及血液过滤，特别是涉及一种微量血液过滤的方法及应用。

背景技术：

1、血液检查的样本主要包括：全血、血清和血浆。血液经抗凝处理后的全部血液为全血，主要用于测定血细胞、血常规、血沉等方面。除去血细胞后所得到的淡黄色液体为血浆，多用于凝血、免疫等方面的测定。

2、传统血液的分离通常利用离心机进行分离，通过离心全血得到的血浆或血清样品来测定血液成分(例如维生素等营养元素)的种类和浓度。然而离心费力、时间长，且后续需要利用移液器小心移取出上层血清或血浆，容易导致重新混合，加大溶血的可能，提取量偏少，且离心机需要安装在水平的固定场地不能便携使用。

3、参照公开号cn109925884a的专利申请，公开了一种全血过滤的方法及用于全血过滤的滤膜结构，具体包括以下步骤：(1)选择由至少两层过滤膜依次从上至下叠加构成滤膜结构，且将所述滤膜结构进行红细胞凝集素处理，待用；(2)将全血样本加入所述滤膜结构进行过滤；(3)收集过滤后的血清或血浆。滤膜结构为至少两层过滤膜从上至下叠加构成，且叠加的过滤膜从上至下的孔径逐渐变小，面积逐渐变大或相等。通过由至少两层过滤膜叠加构成的滤膜结构，且将所述滤膜结构进行红细胞凝集素处理，使全血样本中的红细胞与滤膜中红细胞凝集素相结合，被截留在滤膜结构中，从而以保证红细胞完全过滤吸附在滤膜结构中，从而实现能从非常少量的血液中有效稳定地分离出血浆/血清。但是该发明选择直接用双层膜进行过滤全血，其缺点在于其滤膜在使用前需要进行预处理，可能会造成血浆中处理液的残余，影响测试结果，且其整体操作时间长；而且过滤操作压力较大，速度慢，而且促凝剂一定程度会加剧膜孔堵塞，导致滤膜结构需要经常维护或更换，整体成本较高。

技术实现思路

1、本发明的一个目的在于提供一种微量血液过滤的方法，能实现微量血液快速过滤，分离速率较快，避免大分子物质及有害物质的残留，使得血液中营养元素检测的准确性较佳。

2、一种微量血液过滤的方法，包括以下步骤：

3、(1)吸取微量血液，微量为1～200ul；

4、(2)在所述血液中加入等渗溶液来稀释血液，混匀，得到混合液；

5、(3)将所述混合液挤压过滤，过滤时间为8～18s，收集过滤后的血清或血浆。

6、采用上述技术方案，等渗溶液是指渗透压与血浆渗透压相等的溶液。在人体内，正常血浆渗透压为280-320mmol/l，平均300mmol/l，1mosm/l＝1mmol/l，凡是和此渗透压近似相等的溶液为等渗溶液。

7、优选的，所述等渗溶液包括氯化钠溶液、葡萄糖溶液、乳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、蔗糖溶液中的至少一种。

8、优选的，所述氯化钠溶液的等渗浓度为0.85％-0.93％w/v，所述氯化钠溶液的渗透压为290-318mosm/l；所述葡萄糖溶液的等渗浓度为5％-5.75％w/v，所述葡萄糖溶液的渗透压为278-319mosm/l；所述乳酸钠溶液的等渗浓度为1.57％-1.87％w/v，即渗透压为285-334mosm/l；所述碳酸氢钠溶液的等渗浓度为1.18％-1.42％w/v，所述碳酸氢钠溶液的渗透压为283-338mosm/l；所述蔗糖溶液的等渗浓度为9.6％-10.9％w/v，所述蔗糖溶液的渗透压为280-319mosm/l。

9、优选的，在步骤(2)中，所述等渗溶液与血液的稀释倍数为1-400倍。

10、优选的，在步骤(3)中，挤压的压力为0-5mpa。

11、优选的，在步骤(3)中，过滤是用过滤膜过滤，所述过滤膜为多层膜组合而成，所述多层膜的层数为2～4层。

12、优选的，所述过滤膜的膜材包括gf、nylon、pes、ptfe、pp中的至少一种。

13、优选的，所述膜材的孔径为0.22-10um。

14、优选的，所述过滤膜的孔径由上至下逐次减小，所述过滤膜的滤膜面积由上至下保持相等或逐次减小。

15、本发明的另一个目的是提供一种根据所述的微量血液过滤的方法的应用，应用于检测该方法过滤后的血清或血浆中的成分，所述成分包括营养成分，所述营养成分包括维生素a、维生素d、维生素e、维生素k1、b族维生素中的至少一种。

16、本发明的有益效果是：

17、(1)通过等渗溶液对血液进行稀释，阻止血液快速凝固。因为血液暴露在空气中会凝固，当血液滴入滤膜中时，由于毛细效应，血液会扩散，中间需要一点时间，如果血液凝固过快，再加上有加压作用，可能造成血液未完成过滤，就已经凝固；

18、(2)利用膜分离方式截留全胞血中红细、白细胞，无溶血现象，血浆回收率高；且过滤操作简单，无需任何预处理；

19、(3)替代离心，实现微量血液的过滤，缩短血液预处理步骤，加快血液过滤速率，节省时间，快速实现微量血液的过滤，对于检测血液中的维生素及某些需要及时检测的疾病具有重要的应用价值。

20、(4)可以优化一些仪器的样品前处理步骤，比如液相、质谱等；能够定量上样、缩减上样前过膜步骤，进一步将离心与过膜进行一体化；

21、(5)操作方便、成本低、适用范围广，可适用于多种仪器所测样品的前处理。

22、综上，本发明能实现微量血液快速过滤，分离速率较快，避免大分子物质及有害物质的残留，使得血液中营养元素检测的准确性较佳。

技术特征：

1.一种微量血液过滤的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，所述等渗溶液包括氯化钠溶液、葡萄糖溶液、乳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、蔗糖溶液中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，所述氯化钠溶液的等渗浓度为0.85％-0.93％w/v，所述氯化钠溶液的渗透压为290-318mosm/l；所述葡萄糖溶液的等渗浓度为5％-5.75％w/v，所述葡萄糖溶液的渗透压为278-319mosm/l；所述乳酸钠溶液的等渗浓度为1.57％-1.87％w/v，即渗透压为285-334mosm/l；所述碳酸氢钠溶液的等渗浓度为1.18％-1.42％w/v，所述碳酸氢钠溶液的渗透压为283-338mosm/l；所述蔗糖溶液的等渗浓度为9.6％-10.9％w/v，所述蔗糖溶液的渗透压为280-319mosm/l。

4.根据权利要求1所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述等渗溶液与血液的稀释倍数为1-400倍。

5.根据权利要求1所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，在步骤(3)中，挤压的压力为0-5mpa。

6.根据权利要求1所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，在步骤(3)中，过滤是用过滤膜过滤，所述过滤膜为多层膜组合而成，所述多层膜的层数为2～4层。

7.根据权利要求6所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，所述过滤膜的膜材包括gf、nylon、pes、ptfe、pp中的至少一种。

8.根据权利要求7所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，所述膜材的孔径为0.22-10um。

9.根据权利要求6～8任意一项所述的微量血液过滤的方法，其特征在于，所述过滤膜的孔径由上至下逐次减小，所述过滤膜的滤膜面积由上至下保持相等或逐次减小。

10.一种根据权利要求1～8任意一项所述的微量血液过滤的方法的应用，其特征在于，应用于检测该方法过滤后的血清或血浆中的成分，所述成分包括营养成分，所述营养成分包括维生素a、维生素d、维生素e、维生素k1、b族维生素中的至少一种。

技术总结
本发明涉及血液过滤技术领域，特别是涉及一种微量血液过滤的方法及应用。该方法，包括步骤：(1)吸取微量血液；(2)在血液中加入等渗溶液来稀释血液，混匀，得到混合液；(3)将混合液挤压过滤，过滤时间为8～18s，收集过滤后的血清或血浆。一种根据该方法的应用，应用于检测该方法过滤后的血清或血浆中的成分，成分包括营养成分，营养成分包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K1、B族维生素中的至少一种。本发明能实现微量血液快速过滤，分离速率较快，避免大分子物质及有害物质的残留，使得血液中营养元素检测的准确性较佳。

技术研发人员：王维金,田宋魁,闻志莹,庞思路
受保护的技术使用者：安徽九陆生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14