一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法与流程

本申请涉及一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，属于生物样品检测。

背景技术：

1、氚(tritium，3h或t)是氢的一种放射性同位素，半衰期为12.3年，能量范围为0-18.6kev，平均能量为5.69kev。氚可能引起生物体多种细胞(生殖细胞和淋巴细胞等)损伤、死亡和染色体畸变、影响神经系统、细胞死亡、癌症、遗传和生殖效应。自然界中氚进入生物体后，可以形成组织自由水氚和有机结合氚。组织自由水氚是指生物体内不与其他组织分子相结合的游离态水中的氚。对生物样品中的组织自由水氚的测定，目前常用的制样方法有共沸蒸馏法和高温蒸馏法。即将新鲜的生物样品中存在于组织、细胞和细胞间隙中游离的组织自由水收集，经纯化后与闪烁液混合，用低本底液体闪烁计数器测定样品中氚的放射性活度。

2、然而传统海产品中组织自由水需通过蒸馏提纯，该方法耗时长，操作复杂，存在改进和优化空间。本团队研究一种高效、快速、简单、对环境友好的处理方法，以实现对生物样品中的组织自由水氚进行快速处理。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，提供了一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，该方法具有准确性高、操作简单，节约时间，安全，环境友好的优点，可用于快速检测生物样品中的组织自由水氚。

2、根据本申请的一个方面，提供了一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，其包括以下步骤：

3、测量生物样品中组织自由水的含量；

4、将所述生物样品冷冻干燥，收集冻出的组织自由水；

5、将所述组织自由水通过滤膜进行过滤，得到待测样品，其中所述滤膜的孔径为0.15-0.45μm；

6、通过液体闪烁分析仪分别测定本底样品及所述待测样品中的氚的计数率；

7、计算得到所述生物样品中组织自由水氚的浓度，计算公式为：

8、

9、其中，atfwt为生物样品中组织自由水氚的活性浓度，bq/(kg·鲜)；nx为待测样品中的氚的计数率，cpm；nb为本底样品中氚的计数率，cpm；ω为生物样品中组织自由水的百分含量，％；ε为液体分析仪对氚的探测效率，％；m为待测样品的质量，g。

10、通过选择合适的孔径范围，以将除水分子以外的大分子基团过滤掉，提高样品纯度。

11、可选地，所述滤膜的孔径为0.22μm。

12、可选地，所述本底水为经过二次蒸馏的水或电阻率为18.2mω的超纯水。

13、可选地，分别取待测样品及所述本底样品与闪烁液混合均匀，暗适应10-14h后，通过液体闪烁分析仪测量氚的计数率。

14、可选地，所述液体分析闪烁仪的测量条件为：测量宽道为50-189kev，测量时间为至少1000min。

15、通过控制闪烁仪的测量条件，降低方法检测限。

16、可选地，所述闪烁液与所述待测样品的体积比为6-10:10-14；和/或

17、所述闪烁液与所述本底样品的体积比为6-10:10-14。

18、可选地，所述闪烁液的体积为12ml，所述待测样品的体积为8ml；和/或

19、所述闪烁液的体积为12ml，所述本底样品的体积为8ml。

20、通过控制样品与闪烁液的比例，以提高计数效率，降低检测限，提高该检测方法的检测范围。

21、可选地，所述冷冻干燥的条件为：压力为不大于1.5mbr，温度为不大于-50℃。

22、可选地，通过水分测定仪测量生物样品中组织自由水的含量，其中，所述水分测定仪的温度为100-110℃。

23、可选地，所述水分测定仪的温度为105℃。

24、可选地，在测量生物样品中组织自由水的含量前，还包括前处理步骤，所述前处理步骤包括清洗所述生物样品或去除所述生物样品的不可食用部分。

25、按照gb14883.1-2016《食品安全国家标准食品中放射性物质检验》要求，食品样品检测需采取可食部分。因此，本申请中可将生物样品中的不可使用部分去除后进行检测。

26、本申请的有益效果包括但不限于：根据本申请的用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，具有准确性高、操作简单，节约时间，安全，环境友好的优点，可用于快速检测生物样品中的组织自由水氚。

技术特征：

1.一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述滤膜的孔径为2.2μm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述本底水为经过二次蒸馏的水或电阻率为18.2mω的超纯水。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，分别取待测样品及所述本底样品与闪烁液混合均匀，暗适应10-14h后，通过液体闪烁分析仪测量氚的计数率。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述液体闪烁分析仪的测量条件为：测量宽道为57-189kev，测量时间为至少1000min。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述闪烁液与所述待测样品的体积比为6-10:10-14；和/或

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述闪烁液的体积为12ml，所述待测样品的体积为8ml；和/或

8.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述冷冻干燥的条件为：压力为不大于1.5mbr，温度为不大于-50℃。

9.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，通过水分测定仪测量生物样品中组织自由水的含量，其中，所述水分测定仪的温度为100-110℃。

10.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，在测量生物样品中组织自由水的含量前，还包括前处理步骤，所述前处理步骤包括清洗所述生物样品或去除所述生物样品的不可食用部分。

技术总结
本申请公开了一种用于检测生物样品中组织自由水氚活性浓度的方法，包括：测量生物样品中组织自由水的含量；将生物样品冷冻干燥，收集冻出的组织自由水；将组织自由水通过滤膜进行过滤，得到待测样品，其中滤膜的孔径为0.15‑0.45μm；通过液体闪烁分析仪分别测定本底样品及待测样品中的氚的计数率；计算得到生物样品中组织自由水氚的浓度，计算公式为：其中，A<subgt;TFWT</subgt;为生物样品中组织自由水氚的活性浓度；N<subgt;x</subgt;为待测样品中的氚的计数率；N<subgt;b</subgt;为本底样品中氚的计数率；ω为生物样品中组织自由水的百分含量；ε为液体分析仪对氚的探测效率；m为待测样品的质量。该方法准确性高、操作简单，节约时间，安全，环境友好，可用于快速检测生物样品中的组织自由水氚。

技术研发人员：曹艺耀,汪倩,任鸿,马孝香,王鹏,周磊,邹华,楼晓明
受保护的技术使用者：浙江省疾病预防控制中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15