一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法

本发明属于食品风味分析检测，具体涉及一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法。

背景技术：

1、甜瓜的香气不仅可反映不同品种甜瓜的特点及成熟程度，也是评价甜瓜风味品质的重要指标。甜瓜特殊的香气是由各类挥发性化合物共同作用决定的，不同甜瓜品种中报道的香气物质已有近400种，其中酯、醛、醇、酮为甜瓜挥发性成分的主要物质。目前关于甜瓜挥发性成分的研究多集中于对厚皮甜瓜的分析，对薄皮甜瓜中香气物质的分析相对较少，薄皮甜瓜中的香气物质具体种类和含量尚不明晰。

2、目前，气相色谱-质谱联用(gc-ms)是水果挥发性成分测定最常用的分析手段，可在单个甜瓜品种检出挥发性成分近百种，其主要采用不同极性的一维色谱柱对香气物质进行分离，但受色谱柱材料限制，部分化合物在一维色谱中分离困难、易共洗脱。因此为扩大峰容量、提高检测灵敏度，全二维气相色谱-飞行时间质谱(gc×gc-tof-ms)通过串联两根不同极性的色谱柱，并连接特定调制器对样品进行富集，对结构、极性、沸点相似的挥发性化合物的分离效果良好，目前该技术已在不同食品基质挥发性物质检测分析中被广泛应用，例如，现有技术(李沃颖,卢思捷.使用全二维气相色谱-飞行时间质谱仪分析茶叶挥发性香味成份探究[j]广东化工,2023,23(49):223～226)公开了将龙井茶叶顶空进样，孵化，萃取解析，然后进行全二维气相色谱-飞行时间质谱联用仪分析并收集数据。但不同食品基质中挥发性物质种类及数量差异较大，现有的gc×gc-tof-ms检测方法直接应用于薄皮甜瓜中挥发性成分检测会导致部分物质检测缺失，进而导致分析的准确度降低，因此无法直接用于对薄皮甜瓜中挥发性成分检测。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明目的在于提供一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法，本发明对薄皮甜瓜中挥发性成分的种类及含量的分析能够更加全面的解析薄皮甜瓜中香气成分种类及含量，挥发性成分的检测结果准确度高。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供了一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法，包括以下步骤：

4、将薄皮甜瓜待测样品与内标液混合后孵化，得到孵化样品；所述内标液包括庚酸甲酯标准溶液、正庚醇标准溶液或二乙基正丁酸标准溶液；

5、将所述孵化样品进行固相微萃取后解析，得到萃取样品；所述固相微萃取采用的萃取头为dvb/car/pdms萃取头；

6、将所述萃取样品进行全二维气相色谱-飞行时间质谱检测，得到检测结果；所述检测结果包括定性检测结果和/或半定量检测结果；

7、所述全二维气相色谱-飞行时间质谱检测包括全二维气相色谱分离和飞行时间质谱检测；

8、所述全二维气相色谱分离条件包括：一维色谱柱为db-5ms；二维色谱柱为db-17ms；调制周期为8～9s；进样口温度为230～250℃；载气为氦气；柱箱温度采用程序升温，所述程序升温为0～2min，35℃；2～50min，由35℃匀速升温至230℃；50～53min，230℃；53～57min，由230℃匀速升温至250℃；57～60min，250℃；

9、所述飞行时间质谱检测的检测器电压为-1830～-1840v。

10、优选的，所述全二维气相色谱分离的进样方式为分流进样，所述分流进样的分流比为1～3：1，柱流量为1～2ml/min，采用的全二维气相调制器为固态热调制器，调制柱为hv调制柱。

11、优选的，所述飞行时间质谱检测的条件包括：离子源为电子轰击离子源；灯丝发射电流为100μa；电离电压为-70v；离子源温度为230～250℃；接口温度为230～250℃；采集质量范围为40～350u；采集速度为80～100谱/s。

12、优选的，所述内标液的浓度为5.0～20.0mg/l。

13、优选的，所述孵化的温度为35～40℃，时间为20～40min；所述孵化包括震荡孵化；所述震荡孵化的速度为400～500r/min。

14、优选的，所述固相微萃取的时间为30～40min；

15、所述萃取头在使用前先进行老化；所述老化的温度为230～250℃，时间为10～15min。

16、优选的，所述解析的温度为230～250℃，时间为3～8min。

17、优选的，所述得到检测结果包括：

18、采用全二维数据处理工作站软件对所述全二维气相色谱-飞行时间质谱检测得到的数据进行处理，得到数据处理结果；所述数据处理结果包括化合物质谱图和化合物保留指数；

19、对所述化合物质谱图、化合物保留指数和标准保留指数进行分析，分别得到定性检测结果和半定量检测结果；所述标准保留指数为c7～c30正构烷烃的保留指数。

20、优选的，所述定性检测结果的获得方法包括以下步骤：

21、设置峰自动识别最低信噪比为10，采用nist谱库对所述化合物质谱图进行检索，结合所述化合物保留指数和所述标准保留指数得到定性检测结果。

22、优选的，所述半定量检测结果的获得方法包括以下步骤：

23、删除所述化合物保留指数中硅类物质、正反向匹配度均低于800和重复检出一次及以下的化合物保留指数，得到剩余化合物保留指数；

24、采用内标法对所述剩余化合物保留指数进行半定量分析，得到半定量检测结果。

25、本发明提供了一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法。本发明提供的检测方法采用固相微萃取对薄皮甜瓜中香气进行提取富集，无需有机溶剂，操作简单，易于操作，萃取物质种类及数量丰富；本发明采用二维气相色谱串联质谱，可在较短时间内完成薄皮甜瓜中挥发性化合物的高分离度分析，色谱分离度高，峰容量大，分离及分析效率高，可检测的香气物质种类及数量更加丰富；而且，本发明利用高分辨质谱对薄皮甜瓜中挥发性成分进行定性，通过内标法确定不同挥发性成分的相对含量，更加全面的解析薄皮甜瓜中香气成分种类及含量。

26、进一步的，本发明采用标准谱库匹配、精确分子量、保留指数确保定性结果的可靠性，适合于薄皮甜瓜中挥发性成分的定性分析与半定量分析。

技术特征：

1.一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述全二维气相色谱分离的进样方式为分流进样，所述分流进样的分流比为1～3：1，柱流量为1～2ml/min，采用的全二维气相调制器为固态热调制器，调制柱为hv调制柱。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述飞行时间质谱检测的条件包括：离子源为电子轰击离子源；灯丝发射电流为100μa；电离电压为-70v；离子源温度为230～250℃；接口温度为230～250℃；采集质量范围为40～350u；采集速度为80～100谱/s。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述内标液的浓度为5.0～20.0mg/l。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述孵化的温度为35～40℃，时间为20～40min；所述孵化包括震荡孵化；所述震荡孵化的速度为400～500r/min。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述固相微萃取的时间为30～40min；

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述解析的温度为230～250℃，时间为3～8min。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述得到检测结果包括：

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述定性检测结果的获得方法包括以下步骤：

10.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述半定量检测结果的获得方法包括以下步骤：

技术总结
本发明提供了一种薄皮甜瓜挥发性成分的检测方法，属于食品风味分析检测技术领域。本发明采用固相微萃取法对薄皮甜瓜待测样品进行提取，无需有机溶剂，操作简单，易于操作；结合全二维气相色谱‑飞行时间质谱检测法进行定性分析和半定量分析，可在较短时间内完成薄皮甜瓜中挥发性化合物的高分离度分析，色谱分离度高，峰容量大，分离及分析效率高，不会造成挥发性成分的检测缺失。如实施例检测结果所示，采用本发明提供的检测方法在成熟薄皮甜瓜中共检出香气物质175种，其中酯、醛、醇、酮等物质均被检出，检出物质种类及数量与现有技术相比均显著提升，更加全面的解析了薄皮甜瓜中香气成分种类及含量。

技术研发人员：金芬,李晓慧,王琦,陈雪英
受保护的技术使用者：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15