胆红素干化学试纸的制备试剂、试纸及其制备方法与流程

本申请涉及体外诊断领域，特别涉及用检测胆红素的干化学试纸及其制备方法。

背景技术：

1、尿液检测的临床常规检测的重要项目之一。尿胆红素阳性可能提示肝细胞受损或胆道受阻。

2、目前采用干化学试纸可以半定量地检测尿液中的胆红素。这类检测通常是通过在试纸上吸附能够与胆红素反应显色的反应试剂，如重氮盐，当将试纸与尿液接触时，重氮盐与尿液中的胆红素反应呈现紫红色，并基于胆红素的浓度显示不同深浅的颜色，从而对尿液中胆红素的含量呈现半定量的结果。胆红素可分为未经肝处理的间接胆红素(或称为未结合的胆红素)和经肝与葡萄糖醛酸结合形成的直接胆红素(或称结合胆红素)。直接胆红素能够直接与重氮盐反应。而间接胆红素通过分子间氢键相互结合不溶于水，且与血液中的蛋白质结合，不能与重氮盐直接反应，需断开分子间的氢键，并在不形成分子内氢键时反应发生更充分，灵敏度提高。间接胆红素参与检测反应的程度不足将导致检测结果不可靠。

3、因此，干化学试纸中通常还含有加速剂，作用是破坏胆红素的氢键并维持胆红素结构的稳定性不形成分子内氢键，使胆红素能与重氮盐充分反应。常用的加速剂是咖啡因，且用量较大。然而咖啡因是国家管控的精神类药物，其使用受到限制，获取资质难度较大。此外，也有使用亚硝酸盐作为加速剂，但是亚硝酸盐是剧毒物质，且加速效果不理想。

4、因此，需要提供一种安全性好、检测结果准确性改进的尿胆红素干化学试纸。

技术实现思路

1、本申请的目的在于提供一种用于检测胆红素，特别是尿胆红素的干化学试纸的制备试剂，利用该试剂制备干化学试纸的方法和由此获得的干化学试纸，所述干化学试纸采用卡拉胶、果胶、明胶、琼脂中的一种或多种作为加速剂，制备过程安全，而且加速效果好，改进了试纸检测的灵敏度和准确性。

2、为此，第一方面，本发明提供一种制备用于检测胆红素的干化学试纸的试剂，所述试剂包括主反应物、酸、加速剂、加速剂稳定剂和溶剂，其中所述加速剂选自卡拉胶、果胶、明胶、琼脂中的一种或多种。

3、根据一些实施方式，所述加速剂的含量为1-5g/l。

4、根据一些实施方式，所述试剂的ph值为1.5-3.0，优选为1.5-2.5。

5、所述酸用于调整所述试剂的ph值在上述范围内。根据一些实施方式，所述酸选自5-磺基水杨酸、偏磷酸、顺丁烯二酸、柠檬酸中的一种或多种，优选地，所述酸包括5-磺基水杨酸，更优选地，所述酸包括5-磺基水杨酸和顺丁烯二酸。

6、根据一些实施方式，所述酸的含量为10-30g/l。

7、根据一些实施方式，所述加速剂稳定剂为d-(+)海藻糖。优选地，所述d(+)海藻糖的含量为10-30g/l。

8、根据一些实施方式，所述主反应物为重氮盐。优选地，所述主反应物为2,4-二氯苯重氮盐。更优选地，所述主反应物为2,4-二氯苯重氮四氟硼酸盐。

9、根据一些实施方式，所述主反应物的含量为0.2-1.0g/l。

10、根据一些实施方式，所述溶剂为水。

11、根据一些实施方式，所述试剂进一步包括0.05-0.1g/l的黄色染料。

12、根据一些实施方式，所述试剂以多个子试剂的形式提供。优选地，所述多个子试剂包括第一试剂和第二试剂，其中所述第一试剂包括溶于所述溶剂中的所述主反应物和所述酸；且所述第二试剂包括溶于所述溶剂中的所述加速剂和所述加速剂稳定剂。在一些实施方式中，所述第二试剂还包括0.05-0.1g/l的黄色染料。根据较优的实施方式，所述试剂用于检测尿胆红素的干化学试纸的制备。

13、第二方面，本发明提供一种制备用于检测胆红素的干化学试纸的方法，包括用前述试剂浸渍滤纸并干燥的步骤。

14、根据一些实施方式，所述试剂以多个子试剂的形式提供，所述方法包括依次用各所述子试剂处理所述滤纸并干燥的步骤。

15、优选地，在所述实施方式中，所述方法包括：用第一试剂处理所述滤纸并干燥，所述第一试剂包括溶于溶剂中的主反应物和酸；并用第二试剂处理被所述第一试剂处理并干燥所得到的滤纸并干燥，所述第二试剂包括溶于所述溶剂中的加速剂、加速剂稳定剂和可选的黄色染料。第三方面，本发明提供一种用于检测胆红素的干化学试纸通过上述方法制备而成。

16、较优地，所述干化学试纸用于检查尿胆红素。

17、本发明采用水溶性蛋白质或多糖作为加速剂，能够有效与断开分子间氢键的游离胆红素结合，阻止游离胆红素形成分子内氢键，从而使样本中的胆红素能够充分地与主反应物反应，从而提高了反应效率，提高了试纸的检测灵敏度和准确性。而且，由于样本中的胆红素充分参与反应，所需的主反应物，即重氮盐的用量也可进一步减少，从而降低了成本。

18、本发明进一步通过控制制备干化学试纸的试剂的ph为1.5-2.5的较强酸性，为间接胆红素断开分子间氢键创造了外部环境，更加有利于加速剂发挥作用。

19、所述试剂中加速剂稳定剂可稳定加速剂，进一步提高试纸的检测灵敏度。

20、此外，所述试剂对维生素c等还原性物质有很好的抗干扰性，使检测不受样本，特别是尿样中还原性物质的干扰。

技术特征：

1.一种制备用于检测胆红素的干化学试纸的试剂，所述试剂包括主反应物、酸、加速剂、加速剂稳定剂和溶剂，其中，

2.根据权利要求1所述的试剂，其中所述加速剂的含量为1-5g/l。

3.根据权利要求1所述的试剂，其中所述试剂的ph值为1.5-3.0，优选为1.5-2.5。

4.根据权利要求3所述的试剂，其中所述酸选自5-磺基水杨酸、偏磷酸、顺丁烯二酸、柠檬酸中的一种或多种，优选地，所述酸包括5-磺基水杨酸，更优选地，所述酸包括5-磺基水杨酸和顺丁烯二酸。

5.根据权利要求4所述的试剂，其中所述酸的含量为10-30g/l。

6.根据权利要求1所述的试剂，其中所述加速剂稳定剂为d-(+)海藻糖，优选地，所述d(+)海藻糖的含量为10-30g/l。

7.根据权利要求1所述的试剂，其中所述主反应物为重氮盐，优选地，所述主反应物为2,4-二氯苯重氮盐，更优选地，所述主反应物为2,4-二氯苯重氮四氟硼酸盐。

8.根据权利要求7所述的试剂，其中所述主反应物的含量为0.2-1.0g/l。

9.根据权利要求1所述的试剂，其中所述溶剂为水。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的试剂，其中所述试剂进一步包括0.05-0.1g/l的黄色染料。

11.根据权利要求1～9中任一项所述的试剂，其中所述试剂以多个子试剂的形式提供，优选地，所述多个子试剂包括第一试剂和第二试剂，其中所述第一试剂包括溶于所述溶剂中的所述主反应物和所述酸；且所述第二试剂包括溶于所述溶剂中的所述加速剂和所述加速剂稳定剂，其中优选地，所述第二试剂还包括0.05-0.1g/l的黄色染料。

12.一种制备用于检测胆红素的干化学试纸的方法，包括用根据权利要求1～11中任意一项所述试剂处理滤纸并干燥的步骤。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述试剂以多个子试剂的形式提供，所述方法包括依次用各所述子试剂处理所述滤纸并干燥的步骤，

14.一种用于检测胆红素的干化学试纸，通过根据权利要求12或13所述的方法制备而成。

技术总结
本申请公开了胆红素干化学试纸的制备试剂、试纸及其制备方法。所述试剂包括主反应物、酸、加速剂、加速剂稳定剂和溶剂，其中所述加速剂为选自卡拉胶、果胶、明胶、琼脂中的一种或多种。利用该试剂制备干化学试纸，制备过程安全，加速效果好，改进了胆红素干化学试纸检测的灵敏度和准确性。

技术研发人员：李莹,陈庚文
受保护的技术使用者：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/12/30