一种丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法与流程

本发明属于药物杂质检测，具体涉及一种丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法。

背景技术：

1、丙氨酰谷氨酰胺是制备丙氨酰谷氨酰胺注射液的原料药，其制剂适用于需要补充谷氨酰胺患者的肠外营养，包括处于分解代谢和高代谢状况的患者。因丙氨酰谷氨酰胺原料药生产工艺中用到水合肼作为脱保护试剂，副产物为等摩尔量的邻苯二甲酰肼，由于邻苯二甲酰肼结构中含有联胺警示结构，且邻苯二甲酰肼结构与原料药结构无关，无致突变性数据，通过软件预测邻苯二甲酰肼有致突变的风险。

技术实现思路

1、为了解决上述现有技术中的问题，本发明提供一种丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法，从而实现原料药的质量控制。

2、所述的丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法为：

3、(1)供试品溶液：取样品加水溶解并定量稀释制成每1ml中含丙氨酰谷氨酰胺0.2g的溶液，作为供试品储备液；精密量取供试品储备液用水定量稀释制成每1ml中含丙氨酰谷氨酰胺0.1g的溶液；

4、(2)对照品溶液：取邻苯二甲酰肼对照品用1％氨水溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含25μg的溶液，作为对照品贮备液；精密量取对照品贮备液用水定量稀释制成每1ml中含0.05μg的溶液；

5、(3)将对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算丙氨酰谷氨酰胺中潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的含量。

6、所述的丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：0.08-0.12％磷酸为流动相a，乙腈为流动相b，按下表进行梯度洗脱；流速：0.9-1.1ml/min；检测波长为215nm；柱温：25-35℃；进样体积20μl。

7、

8、本发明的丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法的线性检测范围为0.0025-0.1437μg/ml，定量限为0.0025μg/ml，检测限为0.0008μg/ml。该方法专属性强、灵敏度高、精确度高、线性范围宽，在丙氨酰谷氨酰胺原料生产过程中提供有效质量控制。

技术特征：

1.一种丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法，其特征在于，所述检测方法的具体步骤为：

2.根据权利要求1所述的丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法，其特征在于，色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：0.08-0.12％磷酸为流动相a，乙腈为流动相b，按下表进行梯度洗脱：

技术总结
本发明公开了一种丙氨酰谷氨酰胺潜在致突变杂质邻苯二甲酰肼的液相色谱检测方法。该方法的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：0.08‑0.12％磷酸为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；流速：0.9‑1.1ml/min；检测波长为215nm；柱温：25‑35℃；进样体积20μl。该方法的线性检测范围为0.0025‑0.1437μg/mL，定量限为0.0025μg/mL，检测限为0.0008μg/mL。该方法专属性强、灵敏度高、精确度高、线性范围宽，在丙氨酰谷氨酰胺原料生产过程中提供有效质量控制。

技术研发人员：颜芹,别粉霞
受保护的技术使用者：辰欣药业股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11