一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒及其检测方法与流程

本发明涉及蛋白检测，尤其涉及一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒及其检测方法。

背景技术：

1、阿尔茨海默(alzheimer)病是一种主要表现为记忆障碍的慢性进行性神经系统退行性疾病。其中的阿尔茨海默相关神经丝蛋白(alzheimer’s disease-relatedneurofibrillary tangle protein)是指在阿尔茨海默病患者的大脑中发现的一种神经纤维细丝蛋白，也成为tau蛋白(tau protein)。

2、tau蛋白存在于神经系统的轴突内，参与间接调节微管结构。而在阿尔茨海默病中，tau蛋白会形成异常的纤维结构，聚集成一类特殊的蛋白质“沉积物”，称为神经纤维缠结或神经丝缠结(neurofibrillary tangles)。这些沉积物会积聚在大脑区域中，导致神经细胞的死亡，最终导致记忆和其他认知功能的损害。因此，阿尔茨海默相关神经丝蛋白被认为是阿尔茨海默病的主要病理特征之一。

技术实现思路

1、基于上述背景，本发明实施例提供一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒及其检测方法，具有具有操作简单、快速检测、准确性高的优点，本发明的内容如下：

2、本发明的第一个目的在于提供一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其技术点在于，包括检测卡；所述检测卡包括试纸条和用于固定所述试纸条的塑料载板；所述试纸条包括pvc胶板、黏贴在所述pvc胶板上的层析膜、依次间隔设于所述层析膜上的样品垫、荧光垫、检测线、质控线和吸收垫；所述荧光垫上固定荧光标记的来源于小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体2，所述检测线处包被有小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体1，所述质控线处包被羊抗鼠igg抗体。

3、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的层析膜的材质为硝酸纤维素膜。

4、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体1的包被浓度为0.8-1.2mg/ml。

5、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的羊抗鼠igg抗体的包被浓度为0.8-1.2mg/ml。

6、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的样品垫对的制备方法为：将样品垫浸泡在处理液内，浸泡时间为15-30min，将浸泡完成后的样品垫在37℃的环境下晾干后待用。

7、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的采用荧光染料对阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体2进行荧光标记。

8、为了更好的实现上述技术方案，本发明的阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒中的荧光染料为荧光同工异构体、异硫氰酸吗啉染料、荧光素联苯胺和荧光素酐中的任一一种。

9、本发明的第二个目的在于提供一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白的检测方法，其技术点在于，包括以下步骤：

10、步骤一，吸取90-110μl待检测样本垂直滴加至检测卡的样品垫上，开始计时；

11、步骤二，检测卡于室温反应10min后插入荧光免疫分析仪的测试卡槽中进行测试。

12、与现有技术相比，本发明一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒及其检测方法能够达到以下有益效果：

13、1、操作简便：由于检测卡中已经包含了固定板和试纸条等组成部分，操作非常方便，可以省去试剂制备和清洗等复杂的步骤。

14、2、快速检测：采用荧光标记阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体作为检测试剂，可以实现快速准确的检测，简化检测过程并缩短检测时间。

15、3、准确性高：在试纸条上设置了检测线和质控线，可以准确地判断检测结果是否有效，有效地防止误判和工作误差。

16、4、灵敏度高：通过荧光标记的检测方式来检测阿尔茨海默相关神经丝蛋白，相较于传统的酶标法更为灵敏，可以检测出更低浓度的阿尔茨海默相关神经丝蛋白。

技术特征：

1.一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，包括检测卡；所述检测卡包括试纸条和用于固定所述试纸条的塑料载板；所述试纸条包括pvc胶板、黏贴在所述pvc胶板上的层析膜、依次间隔设于所述层析膜上的样品垫、荧光垫、检测线、质控线和吸收垫；所述荧光垫上固定荧光标记的来源于小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体2，所述检测线处包被有小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体1，所述质控线处包被羊抗鼠igg抗体。

2.根据权利要求1所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述层析膜的材质为硝酸纤维素膜。

3.根据权利要求1所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体1的包被浓度为0.8-1.2mg/ml。

4.根据权利要求1所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述羊抗鼠igg抗体的包被浓度为0.8-1.2mg/ml。

5.根据权利要求1所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫对的制备方法为：将样品垫浸泡在处理液内，浸泡时间为15-30min，将浸泡完成后的样品垫在37℃的环境下晾干后待用。

6.根据权利要求1所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，采用荧光染料对所述阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体2进行荧光标记。

7.根据权利要求6所述的一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒，其特征在于，所述荧光染料为荧光同工异构体、异硫氰酸吗啉染料、荧光素联苯胺和荧光素酐中的任一一种。

8.一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

技术总结
本发明公开了一种阿尔茨海默相关神经丝蛋白检测试剂盒及其检测方法，属于蛋白检测技术领域，包括检测卡；所述检测卡包括试纸条和用于固定所述试纸条的塑料载板；所述试纸条包括PVC胶板、黏贴在所述PVC胶板上的层析膜、依次间隔设于所述层析膜上的样品垫、荧光垫、检测线、质控线和吸收垫；所述荧光垫上固定荧光标记的来源于小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体2，所述检测线处包被有小鼠的阿尔茨海默相关神经丝蛋白单克隆抗体1，所述质控线处包被羊抗鼠IgG抗体，本发明的试剂盒和检测方法具有具有操作简单、快速检测、准确性高的优点。

技术研发人员：曾曜龙,刘如石,钱伟,周喜新,蔡其浩,宋颖,汪志义,易剑峰
受保护的技术使用者：江西英大生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15