αTAT1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用的制作方法

本发明属于疾病预后诊断，尤其涉及一种αtat1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用。

背景技术：

1、原发性肝细胞癌(以下简称为肝癌，hepatocellular carcinoma，hcc)是我国最常见和预后最差的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均居恶性肿瘤的前列。目前治疗肝癌最有效的方法仍是手术切除。然而，多数患者在确诊时已处于中晚期，不具备手术的条件，加上术后的高复发率，导致肝癌的五年总体生存率仍较低。因此，有效预测患者术后总体生存期及复发率将可以帮助选择合适的治疗人群和方式，为有效诊治提供有力的支持。

2、目前临床多依赖于肝癌临床特征(如肿瘤数目和大小等)及组织病理分型(如肿瘤细胞分化程度等)对患者术后进行预后判断。然而，目前依赖肝癌临床特征及组织病理分型对患者术后预后判断的效力较低，精确度较差。

3、α-微管蛋白乙酰基转移酶1(α-tubulin acetyltransferase 1，αtat1)是最为关键的微管乙酰化酶，能够促进微管发生乙酰化修饰。微管乙酰化修饰在细胞分裂、迁移及物质运输中发挥重要作用。

4、美国发明专利公开了us20190024170a1 inhibitors of alpha-tubulinacetylation for the treatment of pain，该发明中α-微管蛋白乙酰转移酶抑制剂作为镇痛剂，过调控α-微管蛋白乙酰化抑制由感觉神经元介导的神经感觉从而抑制机械疼痛。。

5、但是αtat1在原发性肝癌的作用机制及与预后的关系，尚未见研究报道。

技术实现思路

1、针对以上缺陷，本发明解决的技术问题是提供一种αtat1的新用途，即αtat1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用。

2、本发明αtat1可以作为预后标记物，预测肝细胞癌切除术后患者生存期及其复发率。αtat1高表达组的患者，总生存期显著低于αtat1低表达组的患者，而肿瘤复发率显著高于αtat1低表达组的患者。

3、在一个具体实施例中，所述肝癌预后预测为肝细胞癌切除术后患者生存期或复发率预测。

4、在一个具体实施例中，所述试剂盒为免疫组化检测试剂盒。

5、本发明还提供本发明所述αtat1的抗体作为第一抗体在制备肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒中的应用。

6、本发明还提供一种用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒。

7、本发明用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，包括第一抗体与第二抗体，所述第一抗体为αtat1的抗体；所述第二抗体为酶标二抗。

8、在一个具体的实施例中，所述第二抗体为辣根过氧化物酶标记的第二抗体。

9、在本发明一个具体实施方式中，所述试剂盒还包括酪胺信号放大试剂。

10、在本发明一个具体实施方式中，所述试剂盒还包括免疫组化检测所需试剂。

11、在本发明一个具体实施方式中，所述试剂盒采用以下步骤进行肝癌预后预测：

12、(1)基于免疫组织化学技术检测αtat1在肝癌切除术患者肿瘤组织和癌旁组织中的表达情况；

13、(2)根据每个视野中阳性细胞百分比和染色强度进行评分：①阳性细胞百分比＜5％为0分，5％～25％为1分，26％～50％为2分，51％～75％为3分，＞75％为4分；②无染色为0分，淡黄色染色为1分，棕黄色为2分，深褐色为3分；两者计分相乘即为评分结果。

14、(3)将上述评分结果按≥4分计为阳性，＜4分计为阴性，阳性则αtat1表达量高，患者预后生存时间短，肿瘤易复发，阴性则αtat1表达量低，患者生存时间长，肿瘤不易复发。

15、本发明中通过免疫组化法客观精准高效地检测肝癌组织中αtat1的表达，并根据癌旁组织的计数和评分，有效地预测患者的生存时间，为有效的诊断治疗提供更加有力的支持，从而帮助医生选择更适合治疗的患者人群和方法，进行更加精准的个性化治疗。

16、本发明具有以下有益效果：

17、(1)本发明提供了αtat1作为预后标记物在肝癌预后预测中的新用途。

18、(2)本发明提供的检测试剂盒采用免疫组织化学的方法检测原位肝癌αtat1的表达，实验方法简单，方便高效直观、可重复性好，能够直观高效地区分αtat1表达水平的高低，从而更好地预测患者的生存时间。

技术特征：

1.αtat1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于：所述肝癌预后预测为肝细胞癌切除术后患者生存期或复发率预测。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于：所述试剂盒为免疫组化检测试剂盒。

4.αtat1的抗体作为第一抗体在制备肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒中的应用。

5.用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，包括第一抗体与第二抗体，其特征在于：所述第一抗体为αtat1的抗体；所述第二抗体为酶标二抗。

6.根据权利要求5中所述的用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，其特征在于：所述第二抗体为辣根过氧化物酶标记的第二抗体。

7.根据权利要求5中所述的用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，其特征在于：还包括酪胺信号放大试剂。

8.根据权利要求5中所述的用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，其特征在于：还包括免疫组化检测所需试剂。

9.根据权利要求5中所述的用于肝癌预后预测的免疫组化检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用以下步骤进行肝癌预后预测：

技术总结
本发明属于疾病预后诊断技术领域，尤其涉及αTAT1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用。本发明解决的技术问题是提供一种αTAT1的新用途，即αTAT1作为预后标记物在制备肝癌预后预测试剂盒中的应用。αTAT1可以作为预后标记物，预测肝细胞癌切除术后患者生存期及其复发率。本发明还提供包括αTAT1的抗体的组合作为第一抗体、辣根过氧化物酶标记的第二抗体，还包含酪胺信号放大试剂在制备用于肝癌切除术后预后的免疫组化检测试剂盒的应用和用于肝癌切除术后预后预测的免疫组化检测试剂盒，采用免疫组织化学的方法检测原位肝癌αTAT1的表达，实验方法简单，方便高效直观、可重复性好，能够直观高效地区分αTAT1表达水平的高低，从而更好地预测患者的生存时间。

技术研发人员：李冬筱,丁向明,谢萌,王干一,李修岭
受保护的技术使用者：河南省人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16