一种生物标志物组合在胃癌筛查中的应用的制作方法

本发明属于生物检测，尤其是涉及一种生物标志物组合在胃癌筛查中的应用。

背景技术：

1、相关数据显示，胃癌发病率和死亡率在各种恶性肿瘤中均位居第三。胃癌中早期胃癌占比很低，仅约20％，大多数发现时已是进展期，总体5年生存率不足50％。早期诊断、早期治疗对于提高胃癌治疗疗效、降低病死率具有重要意义。开展胃癌筛查可显著提高胃癌早期病变检出率，改善患者预后，大幅提高患者生存率。

2、目前胃癌的筛查方法主要包括内镜筛查和血清学筛查。内镜筛查包括普通电子胃镜、磁控胶囊内镜和高清胃镜精查等方法，内镜检查结合内镜下活检是目前胃癌诊断的金标准，但由于内镜检查具有一定的侵入性，且依赖于专业设备和操作人员，整体普及率仍然较低。血清学筛查包括胃蛋白酶原、胃泌素17、幽门螺旋杆菌抗体和其他血清肿瘤标志物(cea、ca19-9、ca72-4、ca125、ca242等)。血清肿瘤标志物在进展期胃癌中的阳性率仅为20-30％，在早期胃癌中的阳性率低于10％。因此，亟待开发更加精准的血液筛查方法，以提高胃癌大规模筛查的普及率。

技术实现思路

1、发明目的：针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种生物标志物组合在胃癌筛查中的应用。

2、技术方案：为达到上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种生物标志物组合在制备胃癌筛查试剂盒中的应用，所述生物标志物组合包括以下蛋白中的一种或多种：a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c、pdli1、actg1、co1a1、at2b1、catb、fiba、k2c7、finc、fgl2、tgm2、mmp1、npl、pigr、sep15、typh、plod2、dhx9、olfm4、serpinb5、at2b4、grn、tr10c、tpm2、srgn、mmp9、a2gl、a4、fkb10、ei2be、fibg、itih3、wdr53、timp1、erd22和nampt。

4、优选的，所述生物标志物组合包括a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c和pdli1。

5、作为具体实施方案，所述胃癌筛查包括：受试者的胃癌患病风险gc-score通过以下公式计算：gc-score＝2.18*10-7*xa1bg+2.03*10-8*xactn1+2.89*10-8*xcalx+4.46*10-9*xcamp+6.57*10-10*xhsp7c+3.21*10-9*xpdli1，x为每个蛋白对应的定量检测值；如果受试者的gc-score≥2.271，则提示受试者可能患有胃癌；如果受试者的gc-score<2.271，则受试者为非胃癌患者。

6、第二方面，本发明提供了一种胃癌筛查试剂盒，所述试剂盒包括所述生物标志物组合的捕获试剂和检测试剂。

7、进一步的，所述捕获试剂为固定在固相载体表面的抗体，所述检测试剂为标记信号分子的抗体或质谱检测试剂。

8、更进一步的，所述信号分子为荧光基团、化学发光基团或酶。

9、优选的，所述荧光基团包括fitc、alexafluor 488、alexafluor 532、alexafluor647、cy3或cy5；所述化学发光基团包括吖啶酯或三联吡啶钌；所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

10、作为具体实施方案，所述试剂盒还包括样本稀释液、捕获试剂稀释液、检测试剂稀释液、反应缓冲液和清洗液。

11、第三方面，本发明提供了所述的试剂盒在胃癌筛查中的应用。

12、作为具体实施方案，所述应用包括利用所述试剂盒检测受试者血液样本中生物标志物，所述生物标志物包括以下蛋白中的一种或多种：a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c、pdli1、actg1、co1a1、at2b1、catb、fiba、k2c7、finc、fgl2、tgm2、mmp1、npl、pigr、sep15、typh、plod2、dhx9、olfm4、serpinb5、at2b4、grn、tr10c、tpm2、srgn、mmp9、a2gl、a4、fkb10、ei2be、fibg、itih3、wdr53、timp1、erd22和nampt。

13、优选的，所述血液样本包括受试者的血清、血浆或全血。

14、作为具体实施方案，获得所述生物标志物的定量检测数据后，所述受试者的胃癌患病风险gc-score通过以下公式计算：gc-score＝k1*x1+k2*x2+…+kn*xn，其中n为蛋白个数，k为每个蛋白对应的权重系数，x为每个蛋白对应的定量检测值。如果受试者的gc-score≥阈值，则提示受试者可能患有胃癌；如果受试者的gc-score<阈值，则受试者为非胃癌患者。

15、优选的，所述受试者的胃癌患病风险gc-score通过以下公式计算：gc-score＝2.18*10-7*xa1bg+2.03*10-8*xactn1+2.89*10-8*xcalx+4.46*10-9*xcamp+6.57*10-10*xhsp7c+3.21*10-9*xpdli1，x为每个蛋白对应的定量检测值；如果受试者的gc-score≥2.271，则提示受试者可能患有胃癌；如果受试者的gc-score<2.271，则受试者为非胃癌患者。

16、有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优势：

17、1、利用本发明生物标志物进行检测，可达到无创、快速、准确的效果。无需通过内镜获取组织样本，仅需不超过1ml外周血样本即可完成检测，采样方便、检测成本低，适用于大规模人群的胃癌筛查。

18、2、通过本发明提供的多种生物标志物组合，能够有效克服胃癌患者个体间差异，提高检测灵敏度和特异性。

技术特征：

1.一种生物标志物组合在制备胃癌筛查试剂盒中的应用，其特征在于，所述生物标志物组合包括以下蛋白中的一种或多种：a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c、pdli1、actg1、co1a1、at2b1、catb、fiba、k2c7、finc、fgl2、tgm2、mmp1、npl、pigr、sep15、typh、plod2、dhx9、olfm4、serpinb5、at2b4、grn、tr10c、tpm2、srgn、mmp9、a2gl、a4、fkb10、ei2be、fibg、itih3、wdr53、timp1、erd22和nampt。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物组合包括a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c和pdli1。

3.一种胃癌筛查试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述生物标志物组合的捕获试剂和检测试剂。

4.根据权利要求3所述的胃癌筛查试剂盒，其特征在于，所述捕获试剂为固定在固相载体表面的抗体，所述检测试剂为标记信号分子的抗体或质谱检测试剂；优选的，所述信号分子为荧光基团、化学发光基团或酶；进一步优选的，所述荧光基团包括fitc、alexafluor488、alexafluor 532、alexafluor 647、cy3或cy5；所述化学发光基团包括吖啶酯或三联吡啶钌；所述酶为碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶。

5.根据权利要求3所述的胃癌筛查试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括样本稀释液、捕获试剂稀释液、检测试剂稀释液、反应缓冲液和清洗液。

6.权利要求2-5所述的试剂盒在胃癌筛查中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用包括利用所述试剂盒检测受试者血液样本中生物标志物，所述生物标志物包括以下蛋白中的一种或多种：a1bg、actn1、calx、camp、hsp7c、pdli1、actg1、co1a1、at2b1、catb、fiba、k2c7、finc、fgl2、tgm2、mmp1、npl、pigr、sep15、typh、plod2、dhx9、olfm4、serpinb5、at2b4、grn、tr10c、tpm2、srgn、mmp9、a2gl、a4、fkb10、ei2be、fibg、itih3、wdr53、timp1、erd22和nampt。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述血液样本包括受试者的血清、血浆或全血。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述受试者的胃癌患病风险gc-score通过以下公式计算：gc-score＝k1*x1+k2*x2+…+kn*xn，其中n为蛋白个数，k为每个蛋白对应的权重系数，x为每个蛋白对应的定量检测值；如果受试者的gc-score≥阈值，则提示受试者可能患有胃癌；如果受试者的gc-score<阈值，则受试者为非胃癌患者。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述受试者的胃癌患病风险gc-score通过以下公式计算：gc-score＝2.18*10-7*xa1bg+2.03*10-8*xactn1+2.89*10-8*xcalx+4.46*10-9*xcamp+6.57*10-10*xhsp7c+3.21*10-9*xpdli1，x为每个蛋白对应的定量检测值；如果受试者的gc-score≥2.271，则提示受试者可能患有胃癌；如果受试者的gc-score<2.271，则受试者为非胃癌患者。

技术总结
本发明公开了一种生物标志物组合在制备胃癌筛查试剂盒中的应用，所述生物标志物组合包括以下蛋白中的一种或多种：A1BG、ACTN1、CALX、CAMP、HSP7C、PDLI1、ACTG1、CO1A1、AT2B1、CATB、FIBA、K2C7、FINC、FGL2、TGM2、MMP1、NPL、PIGR、SEP15、TYPH、PLOD2、DHX9、OLFM4、SERPINB5、AT2B4、GRN、TR10C、TPM2、SRGN、MMP9、A2GL、A4、FKB10、EI2BE、FIBG、ITIH3、WDR53、TIMP1、ERD22和NAMPT。本发明将上述生物标志物组合应用于胃癌与非胃癌样本检测，在开发队列与独立验证队列中均有良好的区分效果。本发明还提供了上述标志物的检测试剂盒，具有无创、准确性高的优势，适用于大规模胃癌筛查。

技术研发人员：李臻,赵小红,李捷
受保护的技术使用者：谱天（天津）生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16