一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法与流程

发明属于药物检测，具体涉及一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法。

背景技术：

1、艾沙康唑(isavuconazole)，化学名为4[-2[(-1r，2r)-2(-2，5-二氟苯基)-2-羟基-1-甲基-3-(1h-1，2，4-三唑-1-基)丙基]-4-噻唑基]苯甲腈，是一种三唑类广谱抗真菌药，以水溶性前药硫酸艾沙康唑鎓的形式静脉注射或口服给药，其化学名为硫酸1[-3(-r)[-4(-4-氰基苯基)噻唑-2-基]-2(r)(-2，5-二氟苯基)-2-羟基丁基]-4-[1-[n-甲基-n-[3-[2-(甲氨基)乙酰氧基甲基]吡啶-2-基]氨基甲酰氧基]乙基]-1h-1，2，4-三唑-4-鎓，结构式为：

2、

3、硫酸艾沙康唑鎓为单硫酸盐，主要由两个片段构造而成：1.母核的结构片段：此部分为药效活性部分，即艾沙康唑；2.侧链结构片段：此部分为亲水性结构片段，与艾沙康唑对接后颗改善其理化性质，使水溶性增加。硫酸艾沙康唑鎓结构中具有多个碱性官能团，其中游离碱有3个碱性官能团，即三氮唑季铵阳离子、水溶性侧链尾端的仲胺和吡啶杂环，这三个碱性官能团均可与硫酸成盐。硫酸艾沙康唑鎓药液具有强酸性，ph一般在1-2，对利用高效液相(hplc)检测硫酸艾沙康唑鎓中有关物质色谱柱的选用提出了挑战。现有技术中，色谱峰保留时间不稳定，色谱柱耐受ph2.5-7.5，流动相ph1.0-2.0，由于色谱柱不耐受，色谱峰保留时间逐渐前移。同时，当溶剂为枸橼酸缓冲液-乙腈(85:15)，流动相为水-乙腈-三氟乙酸体系，流动相初始比例中乙腈约2.5％，乙腈比例差异大会产生溶剂效应，导致保留时间最早的杂质s29-zz-3出现多个色谱峰，干扰检测。因此如何改善色谱柱耐用性及溶剂效应，使检测时间缩短，提高检测效率是亟待解决的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，以解决色谱柱耐用性较差和溶剂效应，检测时长较长，检测效率较低等问题，方法分离度较好，检出有关物质多。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，取注射用硫酸艾沙康鎓本品利用稀释剂配制供试品溶液，取硫酸艾沙康鎓原料利用稀释剂配制对照品溶液；以乙腈-三氟乙酸-水溶液为流动相进行hplc检测，所述hplc检测的色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

4、进一步的，上述检测方法中，所述稀释剂为枸橼酸缓冲液-乙腈溶液，体积比(v/v)为85:15。

5、进一步的，所述枸橼酸缓冲液含35mmol/l枸橼酸和6mmol/l氢氧化钠的水溶液。

6、进一步的，上述检测方法中，所述供试品溶液浓度为2.8mg/ml。

7、进一步的，上述检测方法中，所述对照品溶液浓度为2.8mg/ml。

8、进一步的，上述检测方法中，将所述对照品溶液用稀释剂稀释2000倍作为灵敏度溶液。

9、进一步的，上述检测方法中，所述色谱柱为welch ultimate lp-c18(4.6mm×150mm，3μm)。

10、进一步的，上述检测方法中，所述流动相乙腈-三氟乙酸-水溶液体积比(v/v)为5：0.05：95。

11、进一步的，上述检测方法中，所述hplc检测的流速为1.5ml/min,柱温为40℃，自动进样器温度为4℃，检测波长为250nm和280nm；进样体积20μl。

12、进一步的，上述检测方法中，所述hplc检测的洗脱程序为：以所述流动相的总体积100％计，0-45min，流动相体积为100％。

13、系统适应性要求对照品溶液连续进样5次，主峰面积的相对标准偏差不大于2.0％。

14、对照品溶液色谱图中bal30145峰和bal31265的峰的分离度应不小于1.5，灵敏度溶液色谱图中主峰的信噪比应不小于10。

15、限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰(工艺杂质除外)，按乘以校正因子的峰面积归一化法计算，bal20019不大于0.5％，bal19875不大于0.4％，bal8728不大于1.1％，bal30145不大于2.0％。其他单个非特定杂质不大于0.2％，杂质总量不大于5.0％。峰面积小于灵敏度溶液中主峰面积的杂质峰忽略不计。

16、本发明的有益效果：

17、1.本发明提供的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，该方法操作简单，检测时间短，分离度好，检测出的有关物质多，检测效率高。

18、2.本发明提供的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，采用乙腈-三氟乙酸-水混合溶液作为独立流动相与色谱柱酸度适用范围契合，提高色谱柱耐用性和减少溶剂效应，改善峰形、克服峰展宽和拖尾，有利于有关物质的检测和积分。

技术特征：

1.一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述供试品溶液中注射用硫酸艾沙康鎓本品与稀释剂用量比为2.8mg:1ml；对照品溶液中硫酸艾沙康鎓原料与稀释剂用量比为2.8mg:1ml；灵敏度溶液中对照品溶液与稀释剂用量比为1.4ug：1ml。

3.根据权利要求1所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述稀释剂为枸橼酸缓冲液-乙腈体积比为85:15的混合溶液。

4.根据权利要求3所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述枸橼酸缓冲液为含35mmo l/l枸橼酸和6mmo l/l氢氧化钠的水溶液。

5.根据权利要求1所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述s4中色谱柱为welch ultimate lp-c184.6mm×150mm，3μm。

6.根据权利要求1所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述流动相乙腈-三氟乙酸-水溶液体积比为5：0.05：95。

7.根据权利要求1所述的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，其特征在于，所述高效液相检测的流速为1.5ml/min,柱温为40℃，自动进样器温度为4℃，进样体积20μl。

技术总结
本发明公开了一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，属于药物检测技术领域。本发明采用高效液相色谱法进行测定，包括测定条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以水‑乙腈‑三氟乙酸溶液(95:5:0.05)为流动相，进行洗脱，检测波长为250nm和280nm；系统适应性溶液配制及测定等步骤。本发明提供的一种检测注射用硫酸艾沙康鎓有关物质的方法，该方法操作简单，分离度较好，检出有关物质多，检测效率高，有效改善色谱柱耐用性和溶剂效应，与现有技术相比能够检出更多杂质，能更有效的对硫酸艾沙康鎓中有关物质进行控制。

技术研发人员：史碧婧,马莉,仲达
受保护的技术使用者：海南卫康制药（潜山）有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15