姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法及应用与流程

本发明涉及药物检测，尤其涉及一种姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法及应用。

背景技术：

1、姜科植物姜黄的干燥根茎，其性温，味苦、辛，归脾、肝经，具有破血行气、通经止痛的功效，用于胸胁刺痛、胸痹心痛、痛经闭经、癥瘕、风湿肩臂疼痛、跌扑肿痛。姜黄提取物是姜黄干燥根茎的提取物，主要生物活性物质是姜黄素(curcumin)和姜黄酮，具有降血压、降血脂、利胆、抗菌、抗炎和抗氧化等作用。

2、姜黄提取物中含有大约60％左右的姜黄素类成分，是姜黄提取物中的主要成分。但姜黄提取物中其余的40％左右的成分目前尚不明确，仍存在多种质量不可控成分，这会影响姜黄提取物的产品质量控制和药理活性研究。研究发现姜黄提取物中含有一些脂肪酸类成分，但姜黄提取物中具体含有哪些脂肪酸类成分，如何对这些脂肪酸类成分进行检测分析，目前鲜有报道。为更充分了解姜黄提取物中脂肪酸类成分的种类，建立一种关于姜黄提取物中脂肪酸类成分的质量控制体系，有必要对姜黄提取物中脂肪酸类成分做进一步研究和定性。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供一种姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法及应用。

2、为实现上述目的，本发明所采用的技术方案为：

3、一种姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，所述分析方法是采用高效液相色谱串联质谱联用技术以乙腈-水作为流动相经等度洗脱，对姜黄提取物中的脂肪酸类成分进行表征。

4、进一步的，流动相中乙腈与水的体积比为89～91：9～11。

5、进一步的，所述分析方法还包括：

6、以亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸作为对照品，对姜黄提取物中的脂肪酸类成分进行表征。

7、进一步的，所述高效液相色谱串联质谱联用技术中的色谱条件包括：色谱柱为welchrom topsil c18(4.6×150mm,3μm)色谱柱、柱温为38～42℃、流速为0.48～0.52ml/min。

8、进一步的，所述高效液相色谱串联质谱联用技术中采用dad全波长扫描(190～410nm)。

9、进一步的，所述高效液相色谱串联质谱联用技术采用的质谱条件为：负离子采集模式，采集时间为3～30min，质量范围m/z为100～1000，scan/dwell time(ms)：500，detector gain factor：1，frag：135v，gas temperature：350℃，gas flow：10l/min，nebulizer：50psi，capillary voltage：4000v。

10、进一步的，所述分析方法具体包括以下步骤：

11、取姜黄提取物制备供试品溶液；

12、取亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸分别制备相应的对照品溶液；

13、取供试品溶液和各待测成分相应的对照品溶液，分别经高速离心后，所得上清液分别采用采用高效液相色谱串联质谱进行hplc-msd分析，得姜黄提取物中脂肪酸类成分的表征结果。

14、进一步的，所述供试品溶液是取姜黄提取物经78～82wt％的乙腈水溶液超声溶解制得。

15、进一步的，所述各待测成分相应的对照品溶液是取亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸分别加入乙腈溶解后，再利用78～82wt％的乙腈水溶液稀释后制得。

16、一种利用上述分析方法获得的姜黄提取物中脂肪酸类成分的表征结果在姜黄提取物的研究/开发/生产/临床应用全过程质量评价或控制中的应用，所述表征结果是在姜黄提取物中一次性鉴定出4种脂肪酸类成分，分别为亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸。

17、本发明的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法及应用的有益效果为：

18、本发明通过调整洗脱体系，通过一次进样成功将姜黄提取物中4种脂肪酸类成分有效分离、检出并定性，填补了姜黄提取物中脂肪酸类成分检测的空白，为姜黄提取物的研究提供更为充足的科学依据，有利于后续姜黄提取物的药理活性和安全性的判断；

19、本发明采用hplc-msd分析方法，一次性检测4种脂肪酸类成分，效率高、速度快，能够得到准确的质荷比(m/z)、保留时间等信息，为姜黄提取物中脂肪酸类成分分析提供了良好的技术手段，具有超高的灵敏度和优异的定性能力；

20、本发明中分析的姜黄提取物中的4种脂肪酸类成分，只需在仪器上完成质谱图库和各成分对应的保留时间的构建，后续分析过程中可无需对照品，只需检测样品，将样品测试结果与质谱图库及各成分对应的保留时间比较，即可确证样品中是否含有目标脂肪酸类成分；

21、本发明的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法适用于各类姜黄提取物制剂的脂肪酸类成分检测，进而判断姜黄提取物中脂肪酸类成分与药理活性的关系；

22、本发明的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，方法简单、准确度高、稳定性好、重复性良好、活性成分分离效果好，可作为姜黄提取物药理活性检查的重要方法之一。

技术特征：

1.一种姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法是采用高效液相色谱串联质谱联用技术以乙腈-水作为流动相经等度洗脱，对姜黄提取物中的脂肪酸类成分进行表征。

2.根据权利要求1所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，流动相中乙腈与水的体积比为89~91：9~11。

3.根据权利要求1或2所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法还包括：

4.根据权利要求1或2所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱串联质谱联用技术中的色谱条件包括：色谱柱为welchrom topsil c18色谱柱、柱温为38~42℃、流速为0.48~0.52ml/min。

5.根据权利要求1或2所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱串联质谱联用技术中采用dad全波长扫描。

6.根据权利要求1或2所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱串联质谱联用技术采用的质谱条件为：负离子采集模式，采集时间为3~30min，质量范围m/z为100~1000。

7.根据权利要求1或2所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法具体包括以下步骤：

8.根据权利要求7所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述供试品溶液是取姜黄提取物经78~82wt%的乙腈水溶液超声溶解制得。

9.根据权利要求7所述的姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法，其特征在于，所述各待测成分相应的对照品溶液是取亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸分别加入乙腈溶解后，再利用78~82wt%的乙腈水溶液稀释后制得。

10.利用权利要求1-9中所述的分析方法获得的姜黄提取物中脂肪酸类成分的表征结果在姜黄提取物的研究/开发/生产/临床应用全过程质量评价或控制中的应用，其特征在于，所述表征结果是在姜黄提取物中一次性鉴定出4种脂肪酸类成分，分别为亚麻酸、亚油酸、油酸和棕榈酸。

技术总结
本发明提供一种姜黄提取物中脂肪酸类成分的分析方法及应用，属于药物检测技术领域，所述分析方法是采用高效液相色谱串联质谱联用技术以乙腈‑水作为流动相经等度洗脱，对姜黄提取物中的脂肪酸类成分进行表征；获得的姜黄提取物中脂肪酸类成分的表征结果用于姜黄提取物的研究/开发/生产/临床应用全过程质量评价或控制。本发明通过调整洗脱体系，通过一次进样成功将姜黄提取物中4种脂肪酸类成分有效分离、检出并定性，填补了姜黄提取物中脂肪酸类成分检测的空白，为姜黄提取物的研究提供更为充足的科学依据，有利于后续姜黄提取物的药理活性和安全性的判断。

技术研发人员：周永妍,林珊,李菲,张珊珊,姜国志,李振江
受保护的技术使用者：神威药业集团有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17