一种评估RIF患者子宫内膜容受性的生物标志物及其检测试剂盒

本发明属于生殖生物学领域，特别涉及一种评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物及其检测试剂盒。

背景技术：

1、反复着床失败(recurrent implantation failure，rif)是指排除了异常核型、畸形宫腔、输卵管积水，年龄小于40岁的女性行体外受精(ivf)或卵母细胞胞质内精子注射(icsi)，移植3次及以上优良胚胎或累积移植胚胎数量≥10枚仍未获得临床妊娠，发生率约占ivf-et周期数的10％，该疾病不仅极大困扰着临床医生，也造成了胚胎资源的严重浪费，增加了患者的经济负担和心理创伤。rif的病因复杂，已知因素如母体内分泌异常、血液高凝状态、部分已知免疫因素、子宫畸形、子宫肌瘤及宫腔黏连等病因，可以通过手术或药物治疗得以改善，有效提高患者妊娠率。但是仍然有很大比例的rif原因不明，缺乏有效治疗手段。由于良好的子宫内膜容受性是胚胎着床必不可少的条件，研究认为rif的发生主要与子宫内膜容受性低下相关。

2、目前对于子宫内膜容受性的评估主要从以下几个方面进行：

3、一、组织形态学评估，如胞饮突。

4、二、超声评估：(1)通过检测子宫内膜厚度：研究发现ivf周期中，非妊娠组与妊娠组相比，子宫内膜厚度存在明显差异，当内膜厚度＞6～7mm时，妊娠率显著提高；(2)子宫内膜动脉血流灌注情况：通过搏动指数及阻力指数指标评定；(3)子宫回声类型：研究表明三线型子宫内膜女性妊娠率明显高于均质型内膜女性；(4)子宫内膜容积：子宫内膜容积<1ml时将影响妊娠率，而当子宫内膜容积>2ml时妊娠率明显提高；(5)子宫动脉等综合评定子宫内膜容受性。

5、三、影响子宫内膜容受性调控因子的表达水平评估：子宫内膜容受性阵列技术和转录组学基因谱分析研究的快速发展拓宽了研究者对子宫内膜容受性的评估手段。基于不同的研究对象，如子宫内膜组织、宫腔液、子宫内膜的活检产物、血浆等或其组合的研究，在子宫内膜容受性相关反复着床相关风险评估标志物的探索上有了初步成果，并发现部分分子生物学标志物，如白血病抑制因子(lif)、hoxa10、炎症细胞因子以及细胞黏附分子(cams)等。

6、目前的评估方法有如下缺点：

7、一、组织形态学评估：对评估者的经验要求高，结果判断的主观性强。

8、二、超声评估：尽管高分辨率多普勒超声评估具有无创、直观、实时、精确性高等特点，但超声检测指标目前仍无明确定论。

9、三、目前针对子宫内膜容受性评估的基因检测试剂盒具有如下弊端：

10、①已有一些子宫内膜容受性相关标志物被应用于临床探索，但rif患者具有高度异质性，仅采用单一的容受性标志物检测准确率有限、特异性不高。②子宫内膜容受性相关因子的简单组合检测试剂盒可解决部分子宫内膜容受性受损患者的评估问题，但特异性和灵敏性受限，仍有众多功能分子待进一步挖掘与开发。③检测分析深度不够，仅能初步判断子宫内膜容受性是否存在异常，尚不能检测容受性异常的类型，如子宫内膜上皮细胞功能异常或子宫内膜间质细胞功能异常。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是提供一种评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物及其检测试剂盒，所筛选的生物标志物可针对性提示内膜容受性异常类型，区分子宫内膜上皮细胞功能异常或子宫内膜间质细胞功能异常，对辅助生殖治疗方案的制定具有一定指导意义。

2、本发明提供了一种评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物，所述生物标志物包括actn1、cd44v3、cdyl中的一种或几种的组合。

3、选用cdyl基因作为标志物，如果检测的表达水平低于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好。

4、选用actn1基因作为标志物，如果检测的表达水平高于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，主要表现为子宫内膜上皮细胞能力异常，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好。

5、选用cd44v3基因作为标志物，如果检测的表达水平低于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，主要表现为子宫内膜间质细胞能力异常，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好。

6、本发明还提供了一种评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物的检测试剂盒。

7、优选的，所述试剂盒包括用于检测上述生物标志物表达量的试剂。

8、优选的，所述试剂盒针对的检测样品为来自受试者的子宫内膜，进行免疫组化检测。

9、优选的，所述试剂盒还包括内参。

10、有益效果

11、(1)本发明利用临床中反复种植失败患者芯片检测结果，并结合多个数据库验证，获得大量临床数据的验证和细胞功能实验的支持，在子宫内膜容受性相关反复种植失败风险评估上具有更高说服力；

12、(2)本发明所筛选的生物标志物，可针对性提示内膜容受性异常类型，区分子宫内膜上皮细胞功能异常或子宫内膜间质细胞功能异常，对辅助生殖治疗方案的制定具有一定指导意义。

技术特征：

1.一种评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物，其特征在于：所述生物标志物包括actn1、cd44v3、cdyl中的一种或几种的组合。

2.根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于：选用cdyl基因作为标志物，如果检测的表达水平低于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好；选用actn1基因作为标志物，如果检测的表达水平高于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，主要表现为子宫内膜上皮细胞能力异常，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好；选用cd44v3基因作为标志物，如果检测的表达水平低于参考值，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性差，主要表现为子宫内膜间质细胞能力异常，如果检测的基因表达水平与参考值无显著差异，则预测该待测rif患者的子宫内膜容受性良好。

3.一种包含如权利要求1所述的评估rif患者子宫内膜容受性的生物标志物的检测试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括用于检测上述生物标志物表达量的试剂。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒针对的检测样品为来自受试者的子宫内膜，进行免疫组化检测。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括内参。

技术总结
本发明涉及一种评估RIF患者子宫内膜容受性的生物标志物及其检测试剂盒，所述生物标志物包括ACTN1、CD44v3、CDYL中的一种或几种的组合。本发明所筛选的生物标志物，可针对性提示内膜容受性异常类型，区分子宫内膜上皮细胞功能异常或子宫内膜间质细胞功能异常，对辅助生殖治疗方案的制定具有一定指导意义。

技术研发人员：周晓薇,张爱军,徐步芳,陈骞
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院附属瑞金医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15