一种超氧化物歧化酶活性检测装置及检测方法与流程

本发明涉及酶活性检测，尤其涉及一种超氧化物歧化酶活性检测装置及检测方法。

背景技术：

1、超氧化物歧化酶普遍存在于动、植物与微生物体内，又称sod，sod能够清除超氧自由基，它与cat、pod等酶协同作用来防御活性氧或其他过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害，从而减少自由基对有机体的毒害，sod能通过歧化反应清除生物细胞中的超氧阴离子自由基，生成h2o2和o2，h2o2再由cat进一步催化生成h2o和o2，由于超氧自由基非常不稳定，寿命极短，一般利用间接方法测定sod活性，氮蓝四唑(nbt)在光下的还原作用来确定酶活性的大小，在有氧化物质存在时，核黄素可在光照条件下被还原。被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生o2-，当加入nbt后，在光照条件下o2-又可将nbt还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大光吸收，当加入sod时，sod可通过清除o2-而抑制了nbt的光还原反应，使蓝色甲腙生成速度减慢，于是，进行光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶的活性愈低，反之酶的活性愈高。

2、在进行实验中需要采用日光灯进行照射实现光的还原反应，要求各管受光情况一致，进而需要采用超氧化物歧化酶活性检测装置进行检测酶的活性。

3、现有技术中直接通过日光灯管进行照射，并将反应试管置于与日光灯管平行的直线上，由于光线会发生折射、漫反射、光的吸收等现象，有部分光线有可能透光一个试管进入到另一个试管内，也有可能透光两个试管进入到一个试管内，此时有可能导致每个试管的受光量产生变化，进而有可能影响试剂的光还原反应，从而有可能影响对超氧化物歧化酶活性检测的准确度。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种可以克服上述问题或者至少部分地解决上述问题的一种超氧化物歧化酶活性检测装置及检测方法。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、一种超氧化物歧化酶活性检测装置，包括：多个开口试管，还包括：多个漫射球；第二进光口，开设在所述漫射球的上端；第二出光口，设置在所述漫射球的下端；连接管，固定在所述漫射球上，且所述第二出光口的轴线与连接管的轴线重合，所述开口试管设置在连接管内，所述连接管的外侧设置有遮光涂层。

4、为了便于对开口试管遮光以及对开口试管的安装，优选地，所述连接管内螺纹连接有遮光杯，所述遮光杯底部螺纹连接有底座，所述开口试管固定在底座上，且所述开口试管的开口端与第二出光口相匹配，所述第二出光口的侧壁固定连接有漫射反光片。

5、为了降低光线射出量，优选地，所述漫射球内设置有平凸镜，所述平凸镜与漫射球之间固定连接有多个连接杆，所述平凸镜内设置有遮光层。

6、为了便于加样，优选地，所述遮光层内固定连接有多个第一密封片，相邻的两个所述第一密封片之间设置有第一连接缝，多个所述第一密封片的端部之间设置有第一交点。

7、优选地，所述遮光层内固定连接有多个第二密封片，多个所述第二密封片之间设置有第二连接缝，多个所述第二密封片的端部之间设置有第二交点。

8、为了便于对光线遮挡，优选地，所述遮光层靠近第二进光口的一端呈圆周固定连接有多个半球密封块，相邻的两个所述半球密封块相贴合。

9、为了便于提高光线的利用率，优选地，所述半球密封块的外侧设置有反射面。

10、为了便于对实现对开口试管的开口处的启闭，优选地，所述遮光杯内固定连接有磁吸环，所述磁吸环上磁吸连接有固定环，所述固定环上呈圆周固定连接有多组橡胶片，多个所述橡胶片用于对开口试管遮光，所述漫射球的外侧固定连接有与遮光杯匹配的顶动环。

11、为了便于对固定环限位，优选地，所述顶动环上呈圆周固定连接有多组第一限位柱，所述第一限位柱上固定连接有第一橡胶头，所述磁吸环上呈圆周固定连接有多组第二限位柱，所述第二限位柱上固定连接有第二橡胶头，所述固定环上呈圆周开设有多个限位孔，所述第一限位柱和第二限位柱均与限位孔相匹配。

12、一种超氧化物歧化酶活性检测方法，采用一种超氧化物歧化酶活性检测装置，主要包括以下步骤：

13、步骤一、将适量的磷酸缓冲液、met溶液、nbt溶液、edta-na2溶液、核黄素溶液和酶液加入到七个开口试管内，其中六只为三只为测定管，四只为对照管，其中一只对照管置于暗处，对照管中不加入酶液，三只测定管内均加入适量的酶液，其中核黄素最后加入到开口试管内；

14、步骤二、将开口试管置于连接管内，并通过连接管对开口试管进行遮光；

15、步骤三、将多个漫射球等距排列并使其置于相应照度的日光灯下照射十五分钟，并且时开口试管处于25摄氏度温度下；

16、步骤四、照射完成后通过分光光度计测量每个溶液在560nm下的吸光度，记录测定数据后进行计算。

17、与现有技术相比，本发明提供了一种超氧化物歧化酶活性检测装置，具备以下有益效果：

18、1、该超氧化物歧化酶活性检测装置，通过长条状灯管照射的光线从同样大小的第二进光口进入到漫射球内，通过漫射球内的漫射涂层发生漫反射，使光线更加均匀的进入到开口试管的上端，然后通过连接管对外侧的杂乱光线进行遮挡，从而使进入到每个开口试管的光量基本相同，从而有效地防止试剂受光量不同而影响测试结果的准确度。

19、2、该超氧化物歧化酶活性检测装置，通过底座先螺纹连接到遮光杯内，然后通过取样装置进行加样，从而有效地降低加样时试剂与光线的接触量，进而有效地提高了对超氧化物歧化酶活性检测的准确度。

20、3、该超氧化物歧化酶活性检测装置，通过先将底座螺纹连接到遮光杯上，然后将遮光杯安装到连接管上，将底座放置到桌面上，采用加长的取样器进行取样，然后将取样器的取样管插入到第一密封片上，使第一连接缝逐渐张开，并且第一密封片始终与取样管贴合，将试剂加入到开口试管内，然后将取样管拔出，第一密封片自动复位，此时，开口试管置于相对较暗的环境下，有效地防止加样过程中试剂提前开始光还原反应，进而有效地防止其影响实验结果的准确度。

21、4、该超氧化物歧化酶活性检测装置，通过转动遮光杯，遮光杯逐渐向下移动，此时，顶动环拉动固定环向上移动，使橡胶片逐渐复位，从而实现对开口试管的封堵，从而有效地对实验结束后的开口试管进行遮光，有效地防止氮蓝四唑nbt继续光还原反应，进而有效地提高了对超氧化物歧化酶活性检测的准确度。

22、该装置中未涉及部分均与现有技术相同或可采用现有技术加以实现，本发明有效地防止试剂受光量不同而影响测试结果的准确度，有效地防止加样过程中试剂提前开始光还原反应以及防止实验结束后氮蓝四唑nbt继续光还原反应，进而有效地提高了对超氧化物歧化酶活性检测的准确度。

技术特征：

1.一种超氧化物歧化酶活性检测装置，包括：多个开口试管(505)，其特征在于，还包括：

2.根据权利要求1所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述连接管(4)内螺纹连接有遮光杯(5)，所述遮光杯(5)底部螺纹连接有底座(504)，所述开口试管(505)固定在底座(504)上，且所述开口试管(505)的开口端与第二出光口(202)相匹配，所述第二出光口(202)的侧壁固定连接有漫射反光片(203)。

3.根据权利要求1所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述漫射球(2)内设置有平凸镜(3)，所述平凸镜(3)与漫射球(2)之间固定连接有多个连接杆(301)，所述平凸镜(3)内设置有遮光层(302)。

4.根据权利要求3所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述遮光层(302)内固定连接有多个第一密封片(305)，相邻的两个所述第一密封片(305)之间设置有第一连接缝(306)，多个所述第一密封片(305)的端部之间设置有第一交点(307)。

5.根据权利要求3所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述遮光层(302)内固定连接有多个第二密封片(308)，多个所述第二密封片(308)之间设置有第二连接缝(309)，多个所述第二密封片(308)的端部之间设置有第二交点(310)。

6.根据权利要求3所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述遮光层(302)靠近第二进光口(201)的一端呈圆周固定连接有多个半球密封块(303)，相邻的两个所述半球密封块(303)相贴合。

7.根据权利要求6所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述半球密封块(303)的外侧设置有反射面(304)。

8.根据权利要求2所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述遮光杯(5)内固定连接有磁吸环(501)，所述磁吸环(501)上磁吸连接有固定环(6)，所述固定环(6)上呈圆周固定连接有多组橡胶片(602)，多个所述橡胶片(602)用于对开口试管(505)遮光，所述漫射球(2)的外侧固定连接有与遮光杯(5)匹配的顶动环(401)。

9.根据权利要求8所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，所述顶动环(401)上呈圆周固定连接有多组第一限位柱(402)，所述第一限位柱(402)上固定连接有第一橡胶头(403)，所述磁吸环(501)上呈圆周固定连接有多组第二限位柱(502)，所述第二限位柱(502)上固定连接有第二橡胶头(503)，所述固定环(6)上呈圆周开设有多个限位孔(601)，所述第一限位柱(402)和第二限位柱(502)均与限位孔(601)相匹配。

10.一种超氧化物歧化酶活性检测方法，采用权利要求1所述的一种超氧化物歧化酶活性检测装置，其特征在于，主要包括以下步骤：

技术总结
本发明公开了一种超氧化物歧化酶活性检测装置及检测方法，属于酶活性检测领域。一种超氧化物歧化酶活性检测装置，包括：多个开口试管，还包括：多个漫射球；第二进光口，开设在所述漫射球的上端；第二出光口，设置在所述漫射球的下端；连接管，固定在所述漫射球上，且所述第二出光口的轴线与连接管的轴线重合，所述开口试管设置在连接管内，所述连接管的外侧设置有遮光涂层；本发明有效地防止试剂受光量不同而影响测试结果的准确度，有效地防止加样过程中试剂提前开始光还原反应以及防止实验结束后氮蓝四唑NBT继续光还原反应，进而有效地提高了对超氧化物歧化酶活性检测的准确度。

技术研发人员：王黔
受保护的技术使用者：苏州梦犀生物医药科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15