泪液代谢标志物HS71B的应用的制作方法

本发明涉及生物分子检验领域，具体涉及一种泪液代谢标志物hs71b的应用。

背景技术：

1、妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,gdm)是指妊娠期间首次发生的糖耐量受损或者血糖升高。gdm是最常见的妊娠并发症之一，在全球育龄期妇女中的患病率约为16.9％。妊娠期糖尿病对我国国民健康造成巨大危害。一方面是妊娠期糖尿病的患病率在不断增加。另一方面是妊娠期糖尿病可造成巨大儿、剖宫产、早产等不良妊娠结局，并增加母儿患病风险。因此，早期和准确的检测在诊断中是至关重要的，有效控制妊娠期糖尿病对我国的民生具有重大意义。

2、目前，在临床上采用的妊娠期糖尿病标准诊断方法为口服葡萄糖耐量试验(ogtt试验)。具体检测方法是在5min内口服含75g葡萄糖的水，分别在服糖前、服糖后1.0、2.0小时通过静脉采集血样，检测血样中葡萄糖分别低于5.1mmol/l、10.0mmol/l、8.5mmol/l判断受试者糖耐受是否正常。该ogtt试验方法的缺点是耗时且有创，受试者需等待几个小时完成检测且需通过静脉被采集多次血样，浪费患者大量时间，给患者带来极差的体验。临床上迫切需要非侵入性和准确的生物标志物，而且是无创并且省时的妊娠期糖尿病诊断试剂及评估方法。

3、人的眼泪中含有非常丰富多样的蛋白质和脂质，且所述蛋白质和脂质已经作为生物标志物的高级来源。可以无创地采用schirmer条带或毛细管非侵入地收集眼泪。在非眼科全身性疾病中临床证实了泪液生物标志物具有诊断能力。所以，泪液是非常理想的人体疾病诊断体液来源，况且泪液具有成份水平稳定、容易采集、并且采集方法无创伤等优点。因此，本发明开发了一种泪液代谢标志物hs71b的应用，所述泪液代谢标志物hs71b应用于制备妊娠期糖尿病诊断试剂盒。

技术实现思路

1、本发明的目的在于，提供一种泪液代谢标志物hs71b的应用。

2、为了达到以上目的，本发明公开的技术方案如下：

3、本发明提出一种泪液代谢标志物hs71b的应用，所述泪液代谢标志物hs71b用于制备试剂盒，所述试剂盒是用于妊娠期糖尿病的诊断，所述hs71 b的英文全称描述为heatshock 70kda protei n 1b，缩写为hs71b，在uniprot_all_oct2014数据库的id为3304，编码基因是hspa1b。

4、所述试剂盒在使用过程中的操作包括以下步骤：第一步：采集受试者泪液作为检测的样品；第二步：提取受试者泪液样品总蛋白并且定量分析；第三步：测量受试者泪液样品的hs71b蛋白浓度；第四步：与受试者泪液样品hs71b蛋白浓度检测方法对应的判断阈值进行比较；第五步：判断受试者是否为患妊娠期糖尿病。

5、在第一步中，所述受试者泪液是用schi rmer条带收集。

6、在第二步中，所述泪液样品总蛋白是使用微量bca蛋白检测试剂盒测量。

7、在第三步中，使用同位素标记相对和绝对定量(itraq)和质谱(ms)测定受试者泪液样品的总蛋白量。

8、在第三步中，使用酶联免疫吸附测定(eli sa)检测受试者泪液中hs71 b蛋白浓度。

9、在第四步中，正常孕中期孕妇是通过口服葡萄糖耐量试验(ogtt)测定判断为正常妊娠的孕妇，并且使用eli sa检测其泪液中hs71 b蛋白浓度作为参考数据。

10、在第五步中，判断阈值是大于4.29ng/u l，即当受试者泪液中hs71 b蛋白浓度大于4.29ng/u l时，则该受试者为妊娠期糖尿病患者gdm。

11、借由上述技术方案，本发明至少具有以下优点效果：本发明对不同妊娠期糖尿病个体的泪液进行分析，收集眼泪过程没有创伤，且节省大量时间。从微观代谢物角度诊断妊娠期糖尿病，操作过程简单，结果客观可靠，准确度非常高，灵敏性很强，能够很好地将妊娠期糖尿病组和正常组区分开，为临床准确的诊断提供了便利，而且这仅仅需要提供泪液即可进行，无需采用其他组织样本，从而大大提高临床应用的可行性，可以在临床上对孕妇进行早期准确诊断和提供早期干预方案提供参考依据。

12、上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本发明的上述和其他目的、特征和优点能够更明显易懂，以下特举较佳实施例，并配合附图，详细说明如下。

技术特征：

1.一种泪液代谢标志物hs71b的应用，其特征在于：所述泪液代谢标志物hs71b用于制备试剂盒，所述试剂盒是用于妊娠期糖尿病的诊断，所述hs71b的英文全称描述为heatshock 70kda protein 1b，缩写为hs71b，在uniprot_all_oct2014数据库的id为3304，编码基因是hspa1b。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒在使用过程中的操作包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：

技术总结
本发明是一种泪液代谢标志物HS71B的应用，其特征在于：所述泪液代谢标志物HS71B用于制备试剂盒，所述试剂盒是用于妊娠期糖尿病的诊断，所述HS71B的英文全称描述为Heat shock 70kDa protein 1B，缩写为HS71B，在Uniprot_all_Oct2014数据库的ID为3304，编码基因是HSPA1B。所述试剂盒在使用过程中的操作包括以下步骤：采集受试者泪液作为检测的样品；提取受试者泪液样品总蛋白并且定量分析；测量受试者泪液样品的HS71B蛋白浓度；与受试者泪液样品HS71B蛋白浓度检测方法对应的判断阈值进行比较；判断受试者是否为患妊娠期糖尿病。本发明至少具有对受试者无创伤，准确诊断，且节省时间的优点效果。

技术研发人员：周雷,郎廷元,王路遥,王梦妮,孟江萍,徐红兵,李维宏,俞兰
受保护的技术使用者：爱敦（广东）生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/29