用于长形式的心脏肌钙蛋白T的测定

本发明涉及一种确定受试者中急性心肌梗死(mi)的可能性的测定方法以及用于该测定方法的试剂盒。

背景技术：

1、高灵敏度心脏肌钙蛋白测定是急性冠状动脉综合征诊断检查中的关键要素。肌钙蛋白测量的广泛使用导致了一种情况，即日常实践中经常发现轻微的肌钙蛋白升高，并且通常不是由1型心肌梗死(mi)引起的。其他状况如慢性肾病、心房颤动、剧烈运动和心力衰竭可能会导致血浆肌钙蛋白水平暂时或持续升高，从而给诊断带来挑战，并导致重复使用诊断性冠状动脉造影术或对心肌梗死的“过度诊断”。

2、在mi期间，心脏肌钙蛋白以全尺寸肌钙蛋白和肌钙蛋白片段的组合形式从缺血性心肌中释放，随后在血清中以时间依赖性模式发生蛋白水解降解。其他临床情况下心脏肌钙蛋白释放的决定因素和机制尚不完全清楚。细胞质中的游离的片段化肌钙蛋白可以穿过已渗漏但未发生不可逆损伤的细胞膜。商用高灵敏度肌钙蛋白t(ctnt)测试也会检测到这些小片段，因此会导致mi的错误诊断。因此，已确定需要进行准确的诊断性肌钙蛋白测试，尤其是对于常见肌钙蛋白水平升高的患者群体。

技术实现思路

1、一方面，本发明涉及根据权利要求1所述的确定受试者中急性心肌梗死(mi)的可能性的体外测定方法。

2、另一方面，本发明涉及根据权利要求17所述的用于确定受试者中急性mi的可能性的试剂盒。

3、在一些进一步的方面，本发明涉及权利要求24中所列的试剂盒在用于确定受试者中急性mi的可能性中的用途，以及权利要求25中所列的试剂盒用于将患有mi的患者与出于mi以外的原因显示标准ctnt水平升高的患者相区分的用途。

4、进一步的方面、实施方案和细节在以下附图、具体实施方式、实施例和从属权利要求中列出。

技术特征：

1.一种确定受试者中急性心肌梗死(mi)的可能性的体外测定方法，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的体外测定方法，其中使用第一结合分子和第二结合分子测量所述样品中所述第一组ctnt分子的量，所述第一结合分子特异性结合对应于seq id no:1的201-288位氨基酸的ctnt区域、心脏肌钙蛋白i(ctni)、心脏肌钙蛋白c(ctnc)或者当所述第一组ctnt分子与ctni和ctnc复合或当ctni和ctnc复合时形成的表位，所述第二结合分子特异性结合对应于seq id no:1的1-200位氨基酸的ctnt区域。

3.根据权利要求2所述的体外测定方法，其中所述第一结合分子是固定在固体表面上的捕获分子，并且所述第二结合分子是包含可检测标记的示踪分子。

4.根据权利要求3所述的体外测定方法，其中所述捕获分子特异性结合对应于seq idno:1的223-242位氨基酸的ctnt表位。

5.根据权利要求3或4所述的体外测定方法，其中使用一种、两种或三种示踪分子，每种示踪分子特异性结合选自对应于seq id no:1的67-86、119-138或171-190位氨基酸的表位中的不同ctnt表位。

6.根据权利要求1所述的体外测定方法，其中通过竞争性测定确定所述第一组ctnt分子的量，并且使用特异性结合对应于seq id no:1的190-223位氨基酸、优选195-220位氨基酸的ctnt区域的结合分子来测量所述样品中所述第一组ctnt分子的量。

7.根据权利要求1所述的体外测定方法，其中使用第一结合分子和第二结合分子测量所述样品中所述第一组ctnt分子的量，所述第一结合分子特异性结合对应于seq id no:1的195-220位氨基酸的ctnt区域，所述第二结合分子特异性结合：对应于seq id no:1的1-194位氨基酸的ctnt区域、对应于221-288位氨基酸的ctnt区域、ctni、ctnc、当所述c端ctnt与ctni和ctnc复合时形成的表位或当ctni和ctnc复合时形成的表位。

8.根据权利要求7所述的体外测定方法，其中所述第一结合分子是固定在固体支持物上的捕获分子，并且所述第二结合分子是包含可检测标记的示踪分子，或者反之。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的体外测定，还包括：

10.根据权利要求9所述的体外测定方法，其中使用第三结合分子和第四结合分子测量所述样品中所述第二组ctnt分子的量，所述第三结合分子和所述第四结合分子特异性结合对应于seq id no:1的69-189位氨基酸的区域中的不同表位。

11.根据权利要求10所述的体外测定方法，其中所述第三结合分子特异性结合对应于seq id no:1的136-147位氨基酸的表位，所述第三结合分子优选为固定在固体表面上的捕获分子。

12.根据权利要求10或11所述的体外测定方法，其中所述第四结合分子特异性结合对应于seq id no:1的125-130位氨基酸的表位，所述第四结合分子优选为包含可检测标记的示踪分子。

13.根据权利要求9所述的体外测定方法，其中使用第五结合分子和第六结合分子测量所述样品中所述第三组ctnt分子的量，所述第五结合分子和所述第六结合分子特异性结合对应于seq id no:1的223-288位氨基酸的区域中的不同表位。

14.根据权利要求9所述的体外测定方法，其中使用第五结合分子和第六结合分子测量所述样品中所述第三组ctnt分子的量，所述第五结合分子特异性结合对应于seq id no:1的223-288位氨基酸的区域中的表位，所述第六结合分子特异性结合ctni、ctnc或者当所述第三组ctnt分子与ctni和ctnc复合时或当ctni和ctnc复合时形成的表位。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的体外测定方法，其用于排除受试者患有mi的可能性；确认受试者患有mi的可能性；将患有mi的患者与出于mi以外的原因显示标准ctnt水平升高的患者相区分。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的体外测定方法，其中所述样品是血液样品、血清样品或血浆样品。

17.一种用于确定受试者中mi的可能性的试剂盒，所述试剂盒包含：

18.根据权利要求17所述的试剂盒，还包含第三结合分子和第四结合分子，所述第三结合分子和第四结合分子能够特异性结合对应于seq id no:1的69-189位氨基酸区域中的不同表位。

19.根据权利要求17或18所述的试剂盒，还包含i)第五结合分子和第六结合分子，所述第五结合分子和第六结合分子能够特异性结合对应于seq id no:1的223-288位氨基酸区域中的不同表位，或ii)第五结合分子和第六结合分子，所述第五结合分子能够特异性结合对应于seq id no:1的223-288位氨基酸区域中的表位，所述第六结合分子特异性结合ctni、ctnc或当待测量的ctnt与ctni和ctnc复合时形成的表位。

20.根据权利要求17至19中任一项所述的试剂盒，其中所述第一结合分子(如果存在)、所述第三结合分子(如果存在)、所述第五结合分子(如果存在)和所述第七结合分子(如果存在)是固定在固体表面上的捕获分子。

21.根据权利要求17至20中任一项所述的试剂盒，其中所述第二结合分子、所述第四结合分子(如果存在)、所述第六结合分子(如果存在)是包含可检测标记的示踪分子。

22.根据权利要求17至20中任一项所述的试剂盒，其中所述第一结合分子(如果存在)、所述第三结合分子(如果存在)、所述第五结合分子(如果存在)和所述第七结合分子(如果存在)是包含可检测标记的示踪分子。

23.根据权利要求17至20中任一项所述的试剂盒，其中所述第二结合分子、所述第四结合分子(如果存在)、所述第六结合分子(如果存在)是固定在固体表面上的捕获分子。

24.根据权利要求17至23中任一项所述的试剂盒在用于确定受试者中mi的可能性中的用途。

25.根据权利要求17至23中任一项所述的试剂盒用于将患有mi的患者与出于mi以外的原因显示标准ctnt水平升高的患者相区分的用途。

技术总结
本发明涉及基于某些长形式的心脏肌钙蛋白T来确定受试者中急性心肌梗死的可能性的体外方法。本发明还涉及用于该方法的试剂盒。

技术研发人员：萨拉·维特福斯,尤哈尼·艾拉克西宁,图伊亚·瓦桑卡里,拉米·阿尔托,阿克塞利·拉赫蒂宁,塔皮奥·赫尔曼
受保护的技术使用者：图尔库大学
技术研发日：
技术公布日：2024/12/17