一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法以及检测方法与流程

本发明涉及聚氨丙基双胍检测，尤其涉及一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法以及检测方法。

背景技术：

1、聚氨丙基双胍(polyaminopropyl biguanide，papb)是一种双胍类阳离子表面活性剂，是我国《化妆品安全技术规范》(2015年版)中规定的准用防腐剂，规定该物质在化妆品使用时的最大允许浓度为0.3％。欧盟化妆品法规(ec)第1223/2009号附件ⅴ中规定：聚氨丙基双胍在化妆品中作为防腐剂最大允许使用量为0.3％；日本《化妆品基准》中规定该物质作为化妆品中的防腐剂使用，最大允许使用量为0.1％。2017年4月7日，欧盟sccs通过了一项新的意见，根据所提供的数据，聚氨丙基双胍作为防腐剂在化妆品中的最大允许使用量最高不超过0.1％是安全的，但不建议在可喷雾配方中使用。

2、聚氨丙基双胍具有强效广谱杀菌活性，广泛应用于消毒剂、洗涤剂、隐形眼镜护理液、卸妆湿巾、牙膏、化妆水、卸妆水等，对较难处理的革兰氏阳性、阴性细菌都有较强的抑制作用，对蜜橘蒂腐病有很好的作用效果。目前在我国《化妆品卫生规范》2015年版中采用液相色谱法对聚氨丙基双胍进行定量分析。国内外关于聚氨丙基双胍的含量测定文献报道较少，1篇[1]采用固相萃取-高效液相色谱法测定角膜接触镜护理液中的聚氨丙基双胍，1篇[2]采用高效液相色谱法测定化妆品中的聚氨丙基双胍。综上，现行标准及相关文献采用的分析技术均为高效液相色谱法。但由于聚氨丙基双胍是由聚合度不同的聚合物组成的混合物，其平均分子量和分子量分布的不同导致了不同来源的聚氨丙基双胍在液相色谱中出现多个色谱峰，且响应差异高达5倍，无法对化妆品中的聚氨丙基双胍进行准确定量。同时，化妆品基质类型复杂，原料中杂质繁多，关于化妆品原料中聚氨丙基双胍的定量检测方法尚未有文献报道。

3、[1]刘曦,崔永平.固相萃取-高效液相色谱法测定角膜接触镜护理液中聚氨丙基双胍[j].首都食品与医药,2015,22(12):82-84.

4、[2]陈静,简龙海,毛北萍,等.高效液相色谱法定量测定化妆品中聚氨丙基双胍[j].上海预防医学,2021,33(4):349-354.

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法以及检测方法。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

3、第一方面是提供一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，包括如下步骤：

4、步骤一，分别称取四硼酸钠、十二烷基硫酸钠，加水溶解后，混匀，作为分离缓冲溶液；所述分离缓冲溶液用水稀释后作为样品提取溶液；

5、步骤二，液体样品处理：准确称取样品，加入所述样品提取液，定容，混匀，作为待测样品溶液；

6、膏霜乳、凝胶、粉类样品处理：准确称取样品，加入所述样品提取液，涡旋振荡，充分混匀，超声提取，再用样品提取液定容，摇匀，离心，取上清液经滤膜过滤，滤液作为待测样品溶液。

7、进一步地，所述分离缓冲溶液中四硼酸钠浓度为20mmol/l、十二烷基硫酸钠浓度为30mmol/l；所述分离缓冲溶液用水稀释10倍后作为样品提取溶液。

8、进一步地，所述涡旋振荡的时间为30s，所述超声提取的时间为20min，所述离心以10000r/min离心5min，所述滤膜平均孔径为0.22μm。

9、第二方面是提供一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的检测方法，其样品提取方法采用如上所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，包括如下步骤：

10、步骤一，精密称取聚氨丙基双胍标准品，用水溶解并定容，摇匀，配制标准储备液；将所述标准品储备液分别用样品提取溶液逐级稀释，配制成标准系列溶液；

11、步骤二，将待测样品溶液和标准系列溶液接至毛细管胶束电动色谱系统进行检测。

12、进一步地，毛细管胶束电动色谱测定条件为：

13、毛细管：熔融石英毛细管，40/50.2cm，50μm内径；

14、操作温度：25℃；

15、检测波长：235nm；

16、窗口狭缝：100×800μm；

17、分离电压：25kv；

18、进样压力及时间：0.5psi，20s。

19、进一步地，毛细管胶束电动色谱测定的毛细管冲洗步骤为：新毛细管在使用前分别用氢氧化钠溶液冲洗20min，水冲洗5min，分离缓冲溶液冲洗5min；每次进样前依次用氢氧化钠溶液冲洗2min，水冲洗2min，分离缓冲溶液冲洗2min，以保证迁移时间和校正峰面积的重现性。

20、进一步地，所述氢氧化钠溶液的浓度为1mol/l。

21、本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

22、通过使用本发明所设计的全新提取方法，能够针对不同的基质类型，快速、完全、准确地提取化妆品及原料中的聚氨丙基双胍；与现有方法相比，本方法具有以下有益效果：根据前期对化妆品样品的市场调研结果，聚氨丙基双胍多存在于化妆水及卸妆水中，根据本发明所设计的提取方法，液体(水)类基质可用样品提取液稀释后直接进样，大大节约了样品的前处理时间。

23、另外，本方法采用mekc分离模式，通过胶束将聚氨丙基双胍包裹形成大分子团，减少聚氨丙基双胍本身不同聚合度分子之间的差异，能实现不同来源的聚氨丙基双胍仅出一个峰，且保留时间及响应均无显著差异。

24、综上，采用本发明方法，能实现聚氨丙基双胍的准确定量、且前处理操作简便、易操作，通用性强，重现性好，适合实验室之间的方法的普及和应用。

25、本发明所提供的提取方法和mekc检测方法能够大幅弥补现有技术中聚氨丙基双胍本身不同聚合度分子之间的差异导致其在液相色谱中出现多个色谱峰，且响应差异接近10倍等缺陷，尤其是解决了现有方法无法对化妆品及原料中聚氨丙基双胍准确定量的技术问题。采用本方法测定化妆品及原料中聚氨丙基双胍的结果接近真实值，因此，具有广阔的应用前景与良好的市场潜力。

技术特征：

1.一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，其特征在于，所述分离缓冲溶液中四硼酸钠浓度为20mmol/l、十二烷基硫酸钠浓度为30mmol/l；所述分离缓冲溶液用水稀释10倍后作为样品提取溶液。

3.根据权利要求1所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，其特征在于，所述涡旋振荡的时间为30s，所述超声提取的时间为20min，所述离心以10000r/min离心5min，所述滤膜平均孔径为0.22μm。

4.一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的检测方法，其样品提取方法采用如权利要1-3任一项所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

5.根据权利要求4所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的检测方法，其特征在于，毛细管胶束电动色谱测定条件为：

6.根据权利要求4所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的检测方法，其特征在于，毛细管胶束电动色谱测定的毛细管冲洗步骤为：新毛细管在使用前分别用氢氧化钠溶液冲洗20min，水冲洗5min，分离缓冲溶液冲洗5min；每次进样前依次用氢氧化钠溶液冲洗2min，水冲洗2min，分离缓冲溶液冲洗2min，以保证迁移时间和校正峰面积的重现性。

7.根据权利要求6所述的化妆品及原料中聚氨丙基双胍的检测方法，其特征在于，所述氢氧化钠溶液的浓度为1mol/l。

技术总结
本发明公开了一种化妆品及原料中聚氨丙基双胍的提取方法以及检测方法，该提取方法包括如下步骤：步骤一，分别称取四硼酸钠、十二烷基硫酸钠，加水溶解后，混匀，作为分离缓冲溶液；分离缓冲溶液用水稀释后作为样品提取溶液；步骤二，采用样品提取溶液处理样品，得待测样品溶液。该检测方法包括如下步骤：步骤一，配制标准储备液、标准系列溶液；步骤二，将待测样品溶液和标准系列溶液接至毛细管胶束电动色谱系统进行检测。本发明所提供的提取方法和MEKC检测方法能够大幅弥补现有技术中聚氨丙基双胍本身不同聚合度分子之间的差异导致其在液相色谱中出现多个色谱峰，且响应差异接近10倍等缺陷，结果接近真实值，具有广阔的应用前景与良好的市场潜力。

技术研发人员：吴思霖,潘晨,毛北萍,王欣美,许勇,茹歌,惠太成,张凯,华盛琪,仇美惠,郑荣,彭兴盛
受保护的技术使用者：上海市食品药品检验研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/7/15