一种利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法与流程

本发明属于医药分析，具体涉及一种利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法。

背景技术：

1、2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯，英文名为methyl 2,2-dithienylglycolate，分子式：c11h10o3s2，分子量：254.32，结构式如下所示：

2、

3、2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯是噻格溴铵、阿地溴铵、噻托溴铵等化学原料药的的主要原料之一，在目前国家药品监管力度形势下，药品质量的源头控制需引起更广泛的关注。目前2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的合成工艺如下：

4、

5、该合成工艺制备2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯以草酸二甲酯为原料，在无水四氢呋喃中，金属镁催化下，与2-溴噻吩发生格式反应生成，并通过盐酸淬灭、后处理等步骤得到。工艺中可能涉及的工艺杂质及样品贮存过程中可能产生的杂质有杂质j(2-羟基-2,2-二(噻吩-2-基)乙酸)、杂质p(2-溴噻吩)、杂质q(噻吩)、杂质r(2-羟基-2-(噻吩-2-基)-2-(噻吩-3-基)乙酸甲酯)、杂质s(草酸二甲酯)，可知，合成2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的过程中会产生较多的杂质，而目前尚未有对2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中的有关物质的分析检测方法。

6、因此，提供一种检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，用于检测合成2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的各杂质，提高以2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯为原料生产的原料药的安全性和质量可控性迫在眉睫。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一种利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，用于检测合成2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的各杂质，提高以2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯为原料生产的原料药的安全性和质量可控性。

2、为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

3、一种利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，具体步骤如下：

4、1)配制供试品溶液和对照品溶液；

5、2)设置高效液相检测条件；采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-水-磷酸的混合溶液为流动相；

6、3)分别取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录并分析色谱图，计算有关物质的含量。

7、进一步的，步骤1)中，供试品溶液的制备方法为：精密称取2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯样品，用乙腈定量稀释成每1ml中含1mg的2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的溶液；对照品溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液，用乙腈定量稀释成每1ml中含1μg的2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的溶液。

8、进一步的，步骤2)中，色谱柱为waters xterra rp18，250×4.6mm，5μm。

9、进一步的，步骤2)中，乙腈、水和磷酸的体积比为30:70:0.1。

10、进一步的，步骤2)中，色谱柱的柱温为30℃。

11、进一步的，步骤3)中，供试品溶液和对照品溶液的进样体积均为10μl。

12、进一步的，步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为235nm。

13、进一步的，步骤3)中，液相色谱仪检测时流动相的流速为1.0ml/min。

14、进一步的，步骤3)中，有关物质含量的计算公式为：单个杂质含量＝ru/(rs×l)×f×100；其中，ru为供试品溶液中杂质的峰面积，rs为对照溶液中主峰的峰面积，l为对照溶液稀释倍数，f为杂质的校正因子。

15、有益效果：相比于现有技术，本发明的优点为：

16、(1)本发明利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中的各杂质，在系统适用性溶液色谱图中，出峰顺序依次为杂质j、杂质q、杂质r、2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯和杂质p，杂质r与2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯之间的分离度大于1.5，其他各成分之间的分离度均大于1.5，理论板数按2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯计算不低于5000。

17、(2)本发明的在检测过程中，空白溶剂不影响样品有关物质的检测，在供试品溶液中，检出的杂质峰理论板数均较高，具有较好的分离度，本发明的专属性较好。

18、(3)本发明检测分析的各杂质在一定浓度范围内，线性相关系数均大于0.990，浓度与峰面积之间线性关系良好。

19、(4)利用本发明的检测方法进行重复性试验，结果表明，每组供试品溶液杂质个数一致，各已知杂质和总杂含量无明显差异，本发明的检测方法重复性良好。

技术特征：

1.一种利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，具体步骤如下：

2.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤1)中，供试品溶液的制备方法为：精密称取2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯样品，用乙腈定量稀释成每1ml中含1mg的2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的溶液；对照品溶液的制备方法为：精密量取供试品溶液，用乙腈定量稀释成每1ml中含1μg的2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯的溶液。

3.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱为waters xterra rp18，250×4.6mm，5μm。

4.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，乙腈、水和磷酸的体积比为30:70:0.1。

5.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤2)中，色谱柱的柱温为30℃。

6.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，供试品溶液和对照品溶液的进样体积均为10μl。

7.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，液相色谱仪的检测波长为235nm。

8.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，液相色谱仪检测时流动相的流速为1.0ml/min。

9.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法检测2,2-二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，其特征在于，步骤3)中，有关物质含量的计算公式为：单个杂质含量＝ru/(rs×l)×f×100；其中，ru为供试品溶液中杂质的峰面积，rs为对照溶液中主峰的峰面积，l为对照溶液稀释倍数，f为杂质的校正因子。

技术总结
本发明公开了一种利用高效液相色谱法检测2,2‑二噻吩基乙醇酸甲酯中有关物质含量的方法，属于医药分析技术领域。该方法具体步骤如下：1)配制供试品溶液和对照品溶液；2)设置高效液相检测条件；采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈‑水‑磷酸的混合溶液为流动相；3)分别取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录并分析色谱图，计算有关物质的含量。本发明利用的高效液相色谱法能够准确、高效的检测出制备2,2‑二噻吩基乙醇酸甲酯过程中出现的各杂质，为药品质量的控制提高了安全性。

技术研发人员：刘慧,俞波,郭励梁
受保护的技术使用者：南京联智医药科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/7/15