一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法与流程

本发明涉及化妆品检测分析领域，尤其涉及一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法。

背景技术：

1、植物源性香料是指由植物的花、果、叶、茎、根、籽、皮或者树木的木质茎、叶、树根和树皮中提取的易挥发芳香组分的混合物。植物原料通常具有不良反应小、功效温和的优势，为了适应消费理念升级，绿色、天然、低毒成为很多化妆品品牌追求的目标和卖点。目前，在化妆品中使用的香料超过3000种，其中植物源性香料占有很大比重。但这些植物香料会产生过敏反应等副作用。这些香料过敏源可能在与皮肤直接接触时引起皮肤过敏，也可能在其挥发过程中通过呼吸引起人体过敏，或者通过光敏作用导致皮肤过敏，是不可忽视的过敏源。

2、丁香属植物在我国自然范围分布广，资源丰富，民间使用历史悠久。我国《已使用化妆品原料清单》(2021年版)中收载的丁香属原料有丁香叶油、丁香花油、丁香花蕾油、丁香提取物等16种。丁香中的挥发性成分含量较高的为甲基丁香酚、丁香酚、异丁香酚、乙酸丁香酚酯等。《化妆品安全技术规范》(2015年版)规定：“甲基丁香酚禁用，天然香料含有的除外”。乙酰基异丁香酚、乙酸丁香酚酯在2022年9月15日，被欧盟向世贸组织who通报为新增致敏性香精过敏源，并规定当浓度在驻留类产品中超过0.001％或淋洗类产品中超过0.01％时，需在成分中单独标注，以提示消费者存在这些致敏源。另外，丁香酚、异丁香酚被欧盟2009年发布的化妆品法规ecno.1223/2009明确指出，在可冲洗型化妆品中含量≥0.01％条件时，必须在化妆品标签上予以标注。

3、松节油是从松科植物中得到的一种天然精油，主要成分是蒎烯。主要为α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯等。松节油已经被列在2022年欧盟拟新增的香精过敏源清单中。同时规定当松节油浓度在驻留类产品中超过0.001％或淋洗类产品中超过0.01％时，需在成分中单独标注，以提示消费者存在这些致敏源。

4、2021年第74号公告：附件3：化妆品禁用植(动)物原料目录中，已经将万寿菊花提取物，万寿菊花油列入禁用清单中。万寿菊花提取物和孔雀草花提取物的主要光敏成分为α-三联噻吩。孔雀草花提取物目前还未被列入禁用清单中。α-三联塞酚是光敏性化合物。具有光活化毒杀作用。2018年欧盟委员会(eu)2018/978号修订案对欧盟化妆品法规(ec)no1223/2009附录ii化妆品禁用物质清单和附录iii化妆品限用物质清单进行更新：将万寿菊提取物和油列入化妆品法规禁用物质清单；将小万寿菊提取物和油列入化妆品法规限用物质清单，并设定相应使用浓度和条件，并规定了其主要成分α-三联塞酚的含量不得大于0.35％。

5、目前，gb/t30088-2013收载了化妆品中甲基丁香酚的测定气相色谱/质谱法，《化妆品安全技术规范》(2015年版)2.36化妆品中丙烯酸乙酯等40种原料的检验方法中收载了丁香酚的气质方法。而化妆品中异丁香酚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯等的检验方法目前没有标准收载，也无文献报道。而化妆品中α-蒎烯等11种致敏香料同时测定的检测方法目前也无文献报道。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，11种植物源性致敏香料为丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯、α-三联噻吩，该方法简便、易操作，通用性强，重现性好，适合实验室之间的方法的普及和应用。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

3、提供一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，所述11种植物源性致敏香料为丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯、α-三联噻吩，包括如下步骤：

4、步骤一，制备标准储备溶液：分别精密称取丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯、α-三联噻吩，置于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，配制成标准储备溶液；

5、步骤二，制备混合标准溶液：精密吸取各标准储备溶液，用甲醇稀释定容，摇匀，配制成混合标准溶液；

6、步骤三，制备标准系列溶液：准确移取混合标准溶液，用甲醇定容至刻度，摇匀，配制成标准系列溶液；

7、步骤四，样品处理：称取样品置于具塞比色管中，加入甲醇，涡旋，超处理，冷却后用甲醇定容至，摇匀，离心，取上清液过微孔滤膜，得到待测溶液；

8、步骤五，将步骤三得到的标准系列溶液和步骤四得到的待测溶液接至气相色谱-质谱系统进行检测。

9、进一步地，所述标准储备溶液的浓度为1.0mg/ml。

10、进一步地，所述混合标准溶液中各标准物的浓度均为10μg/ml。

11、进一步地，所述标准系列溶液中各标准物的浓度均依次为0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml。

12、进一步地，所述样品处理的具体步骤为：称取样品1.0g置于15ml具塞比色管中，加入8ml甲醇涡旋1min，超处理15min，冷却后用甲醇定容至10ml，摇匀，以10000r/min离心5min，取上清液过0.22μm微孔滤膜，得到待测溶液。

13、进一步地，气相色谱条件为：

14、色谱柱：5％苯基亚芳基-95％二甲基聚硅氧烷为固定相的db-5ms，30m，0.25mm×0.25μm；

15、柱温：60℃保持2分钟，以4℃每分钟升至85℃，保持5分钟，以8℃每分钟升至255℃，保持15分钟；

16、进样口温度：250℃；

17、传输线温度：280℃；

18、氮气流速：采用恒流模式，流速为1.00ml/min；

19、尾吹气：进样2.0min后开启，载气流速为20ml/min；

20、进样模式：分流进样，分流比：10:1；

21、进样量：1μl。

22、进一步地，各化合物的定量离子和定性离子信息如下：

23、

24、本发明采用以上技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：

25、本发明的检测方法可同时测定化妆品中α-蒎烯等11种植物源性致敏香料，方法简便、高效、易行；能够大幅弥补现有化妆品中异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯的方法空白，测定结果接近真实值，并相应提高其检测能力，因此，具有广阔的应用前景与良好的市场潜力。

26、本发明的提取方法作为前处理，可适用于化妆品中膏霜乳液、凝胶、油基、水剂、粉剂等5种化妆品基质，回收率可以满足要求。

技术特征：

1.一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，所述11种植物源性致敏香料为丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α-蒎烯、β-蒎烯、α-松油烯、异松油烯、α-三联噻吩，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，其特征在于，所述标准储备溶液的浓度为1.0mg/ml。

3.根据权利要求1所述的化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，其特征在于，所述混合标准溶液中各标准物的浓度均为10μg/ml。

4.根据权利要求1所述的化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，其特征在于，所述标准系列溶液中各标准物的浓度均依次为0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2μg/ml。

5.根据权利要求1所述的化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，其特征在于，所述样品处理的具体步骤为：称取样品1.0g置于15ml具塞比色管中，加入8ml甲醇涡旋1min，超处理15min，冷却后用甲醇定容至10ml，摇匀，以10000r/min离心5min，取上清液过0.22μm微孔滤膜，得到待测溶液。

6.根据权利要求1所述的化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，其特征在于，气相色谱条件为：

技术总结
本发明公开了一种化妆品中11种植物源性致敏香料的检测方法，11种植物源性致敏香料为丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、异丁香酚甲醚、乙酸丁香酚酯、乙酰基异丁香酚、α‑蒎烯、β‑蒎烯、α‑松油烯、异松油烯、α‑三联噻吩，包括如下步骤：步骤一，制备标准储备溶液；步骤二，制备混合标准溶液；步骤三，制备标准系列溶液；步骤四，样品处理：称取样品置于具塞比色管中，加入甲醇，涡旋，超处理，冷却后用甲醇定容至，摇匀，离心，取上清液过微孔滤膜，得到待测溶液；步骤五，将步骤三得到的标准系列溶液和步骤四得到的待测溶液接至气相色谱‑质谱系统进行检测。本发明的检测方法可同时测定化妆品中α‑蒎烯等11种植物源性致敏香料，方法简便、高效、易行。

技术研发人员：许勇,韩晶,惠太成,陈丹丹,简龙海,茹歌,郑荣,彭兴盛
受保护的技术使用者：上海市食品药品检验研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/7/15