一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法与流程

本发明涉及化合物分析检测，具体指一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法。

背景技术：

1、吉西他滨为嘧啶类抗代谢物，在细胞内经核苷激酶的作用被代谢为具有活性的二磷酸(dfdcdp)及三磷酸核苷(dfdctp)。dfdcdp和dfdctp通过抑制dna合成，从而实现吉西他滨的细胞毒作用。盐酸吉西他滨主要临床适应症为非小细胞肺癌、胰腺癌、胆道癌、尿路上皮癌、不能手术或复发的乳腺癌、癌症化疗后加重的卵巢癌、复发或难治性恶性淋巴瘤。

2、异丙叉丙酮，cas号为141-79-7，化学名为甲基异丁烯甲酮、4-甲基-3-戊烯-2-酮，是重要的有机合成中间体，

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4、异丙叉丙酮主要用于药物、精细化学品及杀虫剂等，可以用作中沸点溶剂，用作硝酸纤维素和多种树脂尤其是乙烯基树脂以及喷漆等的溶剂。

5、佛尔酮，cas号为504-20-1，化学名为3，5，5-三甲基-2-环己烯-1-酮，

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7、佛尔酮由丙酮催化缩合、脱水而得，也是一种重要的有机化工原料，用作溶剂，也用于合成树脂、纤维、医药中间体、润滑油添加剂、防臭剂的生产。

8、盐酸吉西他滨的生产工艺中需要用到有机溶剂，丙酮是化学合成中常用的有机溶剂，化合物与酸成盐也是药物化学中常用的技术。丙酮会在盐酸或者氯化氢蒸汽环境中发生聚合，其二聚产物主要为异丙叉丙酮，三聚反应主要产物为佛尔酮。如果在盐酸吉西他滨的生产工艺中使用丙酮作溶剂或精制溶剂，极有可能会生成异丙叉丙酮和佛尔酮，二者均为不饱和酮结构，含有遗传毒性致癌警示结构，因此盐酸吉西他滨中需要关注潜在的致突变杂质异丙叉丙酮和佛尔酮的残留。

9、现有文献测定异丙叉丙酮和佛尔酮多为气相色谱法，且目前没有关于盐酸吉西他滨原料和制剂中异丙叉丙酮和佛尔酮的检测技术。因此，开发一种能有效检测盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮的检测技术是十分必要的，进而保障盐酸吉西他滨原料药和制剂的质量。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种专属性强、检测能力高的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，该方法可以同时检测盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮的残留，保障了盐酸吉西他滨原料药和制剂的质量，同时提高了实际生产检测效率。

2、本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

3、一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，采用高效液相色谱法，以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，通过以下步骤实现：

4、(1)色谱条件：

5、以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

6、以水为流动相a，乙腈为流动相b，通过梯度洗脱程序进行；

7、(2)溶液制备：

8、对照品溶液：称取异丙叉丙酮和佛尔酮对照品，加溶剂制成每1ml中含佛尔酮和异丙叉丙酮各0.005μg～0.5μg的溶液；

9、供试品溶液：取盐酸吉西他滨，加溶剂制成1mg/ml～50mg/ml的溶液。

10、优选地，所述的色谱柱为inertsil ods-3、4.6mm×250mm、5μm或inertsil ods-3v、4.6mm×250mm、5μm的色谱柱。

11、优选地，所述梯度洗脱的程序为：

12、

13、优选地，检测柱温为15℃～40℃，流速为0.5ml/min～2ml/min，检测波长为200nm～300nm，进样体积为10μl～100μl。

14、优选地，用于配置对照品溶液、供试品溶液的溶剂为体积浓度为10％～90％的乙腈。

15、进一步优选，所述对照品溶液的浓度0.05μg/ml，所述供试品溶液的浓度为10mg/ml。

16、与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明提供了一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，采用高效液相色谱仪，以水和乙腈为流动相，通过调整流动相梯度洗脱程序，并选择了合适的色谱柱、柱温和检测波长，实现了盐酸吉西他滨中致突变杂质异丙叉丙酮和佛尔酮的有效分离，可以高效、快速地对盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮进行定量检测，从而提高对盐酸吉西他滨原料药和制剂的质量控制。

技术特征：

1.一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：采用高效液相色谱法，以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，通过以下步骤实现，

2.根据权利要求1所述的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：所述的色谱柱为inertsil ods-3、4.6mm×250mm、5μm或inertsil ods-3v、4.6mm×250mm、5μm的色谱柱。

3.根据权利要求1所述的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：所述梯度洗脱的程序为

4.根据权利要求1所述的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：检测柱温为15℃～40℃，流速为0.5ml/min～2ml/min，检测波长为200nm～300nm，进样体积为10μl～100μl。

5.根据权利要求1所述的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：用于配置对照品溶液、供试品溶液的溶剂为体积浓度为10％～90％的乙腈。

6.根据权利要求5所述的测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，其特征在于：所述对照品溶液的浓度0.05μg/ml，所述供试品溶液的浓度为10mg/ml。

技术总结
本发明涉及一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，本发明提供了一种测定盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮残留的方法，采用高效液相色谱仪，以水和乙腈为流动相，通过调整流动相梯度洗脱程序，并选择了合适的色谱柱、柱温和检测波长，实现了盐酸吉西他滨中致突变杂质异丙叉丙酮和佛尔酮的有效分离，可以高效、快速地对盐酸吉西他滨中异丙叉丙酮和佛尔酮进行定量检测，从而提高对盐酸吉西他滨原料药和制剂的质量控制。

技术研发人员：姚田田,高雪娟,罗开伟,汪伟
受保护的技术使用者：福安药业集团宁波天衡制药有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/11/14