一种用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条

本发明属于心肌梗死即时检测领域，具体涉及一种用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条。

背景技术：

1、急性心肌梗死是指冠状动脉急性持续缺血缺氧，导致部分心肌缺血坏死，它是最严重的冠心病之一。心肌肌钙蛋白i（ctni）是一种独特的心肌蛋白，当心肌梗死时，心肌肌钙蛋白i从受影响的心肌细胞中释放出来，并已被证明是心肌梗死的可靠且敏感的生物标志物，心肌肌钙蛋白i水平与心肌梗死高度相关，在急性心肌梗死后2小时内可升高，12～48小时达高峰，因此心肌肌钙蛋白i用于急性心肌梗死的快速诊断。急性心肌梗死经常导致中老年人死亡，随着老年人口数量的不断增加，越来越多的老年人选择独自在家生活，而不是去养老院，这也严重限制了他们在紧急情况下获得及时救助的能力，增加了因突发疾病而死亡的风险，因此，我们如果能够对心肌梗死的早期有效检测对于提供有效治疗和挽救生命至关重要。

2、侧流免疫层析（lateral flow immunoassay，lfia）是一种基于抗原、抗体免疫反应的即时检测（point of care testing，poct）技术，具有携带方便，操作简单快速，对于检测条件和人员适用性高以及无需专业人员等优势。经典的基于胶体金纳米粒子(gnps)的侧流免疫流层析试纸条如图1所示，由样品垫2（用于加样）、结合垫3、层析膜4和吸水垫5（用于吸收多余样品液体防止回流）按顺序部分叠加固定于支撑背板1上，结合垫3上包被有gnps标记的生物活性材料，它可与待检样品溶液里的检测靶标结合形成免疫复合物，层析膜4上有两条喷印的检测线41（t线）和质控线42（c线），分别包被有不同生物活性物质（如抗原或抗体），用于拦截带标记的免疫复合物，如cn101059519a公开的心肌肌钙蛋白i纳米金标检测试纸条及其制备方法，遗憾的是，由于胶体金本身比色信号不足检测灵敏度较低，容易产生假阴性的结果，只能用作定性或半定量分析。

技术实现思路

1、针对上述现有技术的不足，本发明提供一种基于铂钯纳米颗粒的用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条，以实现对心肌梗死快速、灵敏的检测。

2、本发明为了实现上述目的，采用了如下技术方案：

3、一种用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条，包括依次固定在支撑背板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫，所述层析膜设有检测线和质控线，所述结合垫包被有铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1，所述检测线包被有抗ctni单克隆抗体2，所述质控线包被有羊抗鼠lgg。

4、优选地，所述铂钯纳米颗粒的核为钯，核的表面包裹铂纳米粒子。

5、优选地，所述铂钯纳米颗粒的钯铂摩尔比为1:9。

6、优选地，所述铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1通过包括以下步骤的方法制备得到：

7、先用碳酸钾调节铂钯纳米颗粒悬液至适合的ph值；

8、然后加入抗ctni单克隆抗体1，孵育一定时间；

9、最后加入封闭剂进行封闭，得到铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1。

10、更优选地，抗ctni单克隆抗体1与铂钯纳米颗粒的质量比为5~10:100，最优选地为7.5:100。

11、优选地，所述结合垫上铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1的包被量为20~25μg/cm。

12、优选地，所述检测线上抗ctni单克隆抗体2的包被量为2μg/cm。

13、优选地，所述质控线上羊抗鼠lgg的包被量为1μg/cm。

14、体系中碳酸钾的浓度为0.5mmol/l。

15、所述封闭剂为酪蛋白钠盐。

16、铂钯纳米颗粒作为抗体的标记材料在制备用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条中的应用。

17、优选地，所述铂钯纳米颗粒的核为钯，核的表面包裹铂纳米粒子。

18、优选地，所述铂钯纳米颗粒通过包括以下步骤的方法制备得到：

19、在酸性条件和非离子表面活性剂的作用下，将四氯钯酸钠、六氯代铂酸钠和还原剂混合反应得到所述铂钯纳米颗粒。

20、优选地，所述四氯钯酸钠与六氯代铂酸钠的摩尔用量比为1:9。

21、优选地，所述非离子表面活性剂为泊洛沙姆。

22、优选地，反应体系中，非离子表面活性剂的浓度为0.2~0.8wt%，酸的浓度为0.05~0.1mol/l。

23、优选地，所述还原剂为抗坏血酸。

24、有益效果：

25、与现有胶体金标记的试纸条相比，本发明采用铂钯纳米颗粒作为比色信号标记抗体，其具有更大的摩尔消光系数，能够整体放大比色响应，从而提高试纸条对心肌肌钙蛋白i的检测灵敏度，并且心肌肌钙蛋白i的浓度与t/c比值呈良好的线性关系。

技术特征：

1.一种用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条，包括依次固定在支撑背板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫，所述层析膜设有检测线和质控线，其特征在于：所述结合垫包被有铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1，所述检测线包被有抗ctni单克隆抗体2，所述质控线包被有羊抗鼠lgg。

2.根据权利要求1所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述铂钯纳米颗粒的核为钯，核的表面包裹铂纳米粒子。

3.根据权利要求1或2所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述铂钯纳米颗粒的钯铂摩尔比为1:9。

4.根据权利要求1所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1通过包括以下步骤的方法制备得到：

5.根据权利要求4所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：抗ctni单克隆抗体1与铂钯纳米颗粒的质量比为5~10:100，优选地为7.5:100。

6.根据权利要求1或5所述的侧流免疫层析试纸条，其特征在于：所述结合垫上铂钯纳米颗粒标记的抗ctni单克隆抗体1的包被量为20~25μg/cm，所述检测线上抗ctni单克隆抗体2的包被量为2μg/cm，所述质控线上羊抗鼠lgg的包被量为1μg/cm。

7.铂钯纳米颗粒作为抗体的标记材料在制备用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述铂钯纳米颗粒的核为钯，核的表面包裹铂纳米粒子。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于：所述铂钯纳米颗粒通过包括以下步骤的方法制备得到：

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述四氯钯酸钠与六氯代铂酸钠的摩尔用量比为1:9；所述非离子表面活性剂为泊洛沙姆；反应体系中，非离子表面活性剂的浓度为0.2~0.8wt%，酸的浓度为0.05~0.1mol/l；所述还原剂为抗坏血酸。

技术总结
本发明公开了一种用于心肌梗死即时检测的侧流免疫层析试纸条。其包括依次固定在支撑背板上的样品垫、结合垫、层析膜和吸水垫，所述层析膜设有检测线和质控线，所述结合垫包被有铂钯纳米颗粒标记的抗cTnI单克隆抗体1，所述检测线包被有抗cTnI单克隆抗体2，所述质控线包被有羊抗鼠lgG。与现有技术相比，本发明的试纸条可快速、灵敏地定量检测心肌肌钙蛋白I，从而实现心肌梗死即时检测。

技术研发人员：薛中华,张承风,陈亚园,刘海乐,孙盼盼,罗明月,李建颖
受保护的技术使用者：西北师范大学
技术研发日：
技术公布日：2024/10/24