一种骨组织脱钙套装液及骨组织脱钙方法与流程

本发明涉及生物，更具体的说是涉及一种骨组织脱钙套装液及骨组织脱钙方法。

背景技术：

1、在实验病理研究或临床病理中，经常会对动物或人体骨组织进行组织病理学观察，但其内含大量钙组织，且十分坚硬，需要脱钙处理后再进行制片，脱钙是组织切片的重要环节。不同骨组织脱钙时，需兼顾脱钙充分和组织完整性，脱钙不充分和脱钙过度都将对病理诊断造成不利影响。脱钙不充分，会造成切片刀刃的损坏和组织脱片等现象的出现。脱钙过度则会破坏组织结构，影响染色效果或使组织抗原丢失，影响病理诊断结果。因此，研究并选择合适的脱钙方法，既保证脱钙效果，又不影响后续的he染色、特染和免疫组化染色，对骨组织的病理诊断尤为重要。

2、当前的骨组织脱钙液，主要包括edta脱钙液、硝酸甲醛脱钙液、盐酸甲醛脱钙液等。然而，edta脱钙法虽然对组织结构影响小，但脱钙时间慢，对于大的骨组织需数周，不能满足临床和实验动物周期所需。盐酸/硝酸甲醛脱钙法可以在短时间内除去大量的钙，但对组织形态的破坏性较强，不能用于免疫组化染色，且脱钙结束后需长时间(12-24小时)流水冲洗以减少强酸试剂，不符合环保和节约理念。

3、因此，提供一种兼顾脱钙性能和组织的完整性，同时又体现绿色、节约概念的骨组织脱钙产品或方法是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种骨组织脱钙套装液及骨组织脱钙方法。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种骨组织脱钙方法，包括以下步骤：将固定后的骨组织浸泡于骨组织脱钙套装液a液中，待注射器针头扎入无阻力后，根据骨组织形态的不同将骨组织修整为大小合适，厚度均匀的组织块，置于脱水盒中；将含组织块的脱水盒置于b液中浸泡2～12小时后转入c液中浸泡2～4小时，随后流水冲洗0.5～4小时；

4、其中，a液为含有16.5％甲酸和2％甲醛的甲酸甲醛混合液；b液为5％硫酸钠溶液；c液为70％乙醇溶液。

5、优选的，所述含组织块的脱水盒置于b液中浸泡的时间为2小时。

6、优选的，所述含组织块的脱水盒置于c液中浸泡的时间为2小时。

7、优选的，所述流水冲洗的时间为0.5小时。

8、本发明的另一目的是，提供一种骨组织脱钙套装液，所述套装液由a液、b液和c液组成；其中，a液为含有16.5％甲酸和2％甲醛的甲酸甲醛混合液；b液为5％硫酸钠溶液；c液为70％乙醇溶液。

9、本发明的另一目的是，提供上述骨组织脱钙套装液的制备方法，所述a液由33％甲酸溶液与4％甲醛溶液按体积比1:1混合而得；所述b液为硫酸钠按照比例以纯净水稀释而得；所述c液为无水乙醇以纯净水稀释而得。

10、有益效果：本发明骨组织脱钙套装液及脱钙方法脱钙效果好，脱钙后骨组织完整性佳，满足观察所需，且极显著缩短了脱钙时间，利于临床及实验病理试验结果的快速判断。

技术特征：

1.一种骨组织脱钙方法，其特征在于，包括以下步骤：将固定后的骨组织浸泡于骨组织脱钙套装液a液中，待注射器针头扎入无阻力后，根据骨组织形态的不同，将骨组织修整为大小合适，厚度均匀的组织块，置于脱水盒中；将含组织块的脱水盒置于b液中浸泡2～12小时后转入c液中浸泡2～4小时，随后流水冲洗0.5～4小时；

2.根据权利要求1所述的骨组织脱钙方法，其特征在于，所述含组织块的脱水盒置于b液中浸泡的时间为2小时。

3.根据权利要求1所述的骨组织脱钙方法，其特征在于，所述含组织块的脱水盒置于c液中浸泡的时间为2小时。

4.根据权利要求1所述的骨组织脱钙方法，其特征在于，所述流水冲洗的时间为0.5小时。

5.一种骨组织脱钙套装液，其特征在于，所述套装液由a液、b液和c液组成；其中，a液为含有16.5％甲酸和2％甲醛的甲酸甲醛混合液；b液为5％硫酸钠溶液；c液为70％乙醇溶液。

6.权利要求5所述骨组织脱钙套装液的制备方法，其特征在于，所述a液由33％甲酸溶液与4％甲醛溶液按体积比1:1混合而得；所述b液为硫酸钠按照比例以纯净水稀释而得；所述c液为无水乙醇以纯净水稀释而得。

技术总结
本发明公开了一种骨组织脱钙套装液及骨组织脱钙方法，涉及生物技术领域。本发明骨组织脱钙方法，包括以下步骤：将固定后的骨组织浸泡于骨组织脱钙套装液a液中，待注射器针头扎入无阻力后，根据骨组织形态的不同，将其修整为大小合适，厚度均匀的组织块，置于脱水盒中；将含组织块的脱水盒置于b液中浸泡2～12小时后转入c液中浸泡2～4小时，随后流水冲洗0.5～4小时；其中，a液为含有16.5％甲酸和2％甲醛的甲酸甲醛混合液；b液为5％硫酸钠溶液；c液为70％乙醇溶液。本发明骨组织脱钙套装液及脱钙方法脱钙效果好，脱钙后骨组织完整性佳，满足观察所需，且极显著缩短了脱钙时间，利于临床及试验结果的快速判断。

技术研发人员：刘伟伟,刘大卫,崔晓雪,袁玲,陈斌,史梦柔,李锡晶
受保护的技术使用者：天津市医药科学研究所（天津市医药与健康研究中心）
技术研发日：
技术公布日：2024/11/11