用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物及其获得方法与应用

本发明涉及临床医学，更具体涉及一组用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物。

背景技术：

1、骨科创伤往往伴随着肌肉软组织损伤，严重的骨骼肌损伤通常会导致再生不完全，从而导致功能障碍。在临床实践中，了解肢体创伤患者骨骼肌损伤的程度对于选择治疗方式和评估预后至关重要。

2、目前，缺乏评估机械性骨骼肌损伤严重程度的具体指标。现有的与肌肉组织分解和纤维损伤相关的经典血液蛋白标志物包括肌酸激酶、乳酸脱氢酶、肌红蛋白、醛缩酶和天冬氨酸氨基转移酶，其中肌酸激酶是肌肉损伤最常用的血清标志物。然而，这些已建立的酶缺乏高诊断可靠性，它们也无法有效区分损伤的严重程度。

3、因此，亟需提供一组用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物。

技术实现思路

1、本发明需要解决的技术问题是提供一组用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物及其获得方法与应用，以解决背景技术中的问题。

2、为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案如下。

3、用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物，所述新型蛋白标志物为troponin t3,fast skeletal type；alpha-1,4glucanphosphorylase；four and ahalflim domains1；pdz and lim domain 3；phosphoglucomutase 1；adenylosuccinate synthetase isozyme1；hormone-sensitive lipase；dnatopoisomerase i；lim and cysteine-rich domains1；glucose-6-phosphate isomerase；triosephosphate isomerase；regulator ofchromosome condensation 1；glycerol-3-phosphate dehydrogenase[nad(+)],cytoplasmic；nicotinamide phosphoribosyltransferase；malate dehydrogenase；phosphoglycerate kinase 1；sugarphosphate phosphatase；fumarylacetoacetatehydrolase domain containing 2a；exportin-2；dnaj heat shockprotein family(hsp40)member b4；elongation factor 1-gamma；phosphoethanolamine/phosphocholinephosphatase 1；adenylosuccinate lyase；5'-3'exoribonuclease；small nuclearribonucleoprotein sm d2；smproteinf；lactoylglutathione lyase；

4、adenosylhomocysteinase；dna(cytosine-5)-methyltransferase；eukaryotictranslation initiation factor 3subunit b；myg1 exonuclease；smallnuclearribonucleoprotein sm d3；valine--trnaligase；alcohol dehydrogenaseclass-3；tumornecrosis factor receptor superfamily member 11b；bpi fold-containing familyamember 2中的至少一种。

5、本发明还提供了一种用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物的获得方法，包括以下步骤：

6、s1、建立具有不同肌肉损伤程度的实验大鼠模型：通过自制气囊袖带加压装置制造大鼠小腿不同程度的机械性挤压损伤；

7、s2、大鼠受伤3小时后，通过心脏穿刺收集实验大鼠模型中大鼠的血浆，采用lc-ms/ms-4d-dia定量蛋白质组学技术检测大鼠血浆蛋白表达谱，通过差异分析，获得候选蛋白标志物；

8、s3、利用elisa方法检测36种候选蛋白标志物在临床不同程度肌肉损伤患者血液中的浓度。

9、进一步优化技术方案，所述步骤s1中的实验大鼠模型包括对照组、轻度损伤组和重度损伤组；所述步骤s1中对对照组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定在无压力的自制气囊袖带加压装置中；对轻度损伤组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定于自制气囊袖带加压装置中在300mmhg下加压2h；对重度损伤组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定于自制气囊袖带加压装置中在300mmhg压力下加压6h；在受伤后3小时和3天分别获取三组大鼠胫骨前肌进行苏木精和伊红染色以评估损伤程度；在受伤后28天进行masson三色染色以评估肌肉纤维化程度。

10、本发明还提供了用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物的应用，利用新型蛋白标志物制作试剂盒或通过质谱方法或其他任何方法用于检测来判断受试者的肌肉损伤程度。

11、由于采用了以上技术方案，本发明所取得技术进步如下。

12、本发明提供的一组新型蛋白标志物，可用于判断肌肉损伤程度，有助于临床医生为患者制定个体化的治疗方案，提高患者的治疗效果和生活质量。

技术特征：

1.用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物，其特征在于：所述新型蛋白标志物为troponin t3,fast skeletal type；alpha-1,4glucanphosphorylase；four and ahalflim domains 1；pdz and lim domain 3；phosphoglucomutase 1；

2.一种如权利要求1所述的用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物的获得方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物的获得方法，其特征在于：所述步骤s1中的实验大鼠模型包括对照组、轻度损伤组和重度损伤组；所述步骤s1中对对照组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定在无压力的自制气囊袖带加压装置中；对轻度损伤组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定于自制气囊袖带加压装置中在300mmhg下加压2h；对重度损伤组大鼠的操作为：麻醉并将大鼠的右后小腿固定于自制气囊袖带加压装置中在300mmhg压力下加压6h；在受伤后3小时和3天分别获取三组大鼠胫骨前肌进行苏木精和伊红染色以评估损伤程度；在受伤后28天进行masson三色染色以评估肌肉纤维化程度。

4.用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物的应用，其特征在于：利用新型蛋白标志物制作试剂盒或通过质谱方法用于检测来判断受试者的肌肉损伤程度。

技术总结
本发明公开了用于判断肌肉损伤程度的新型蛋白标志物及其获得方法与应用，新型蛋白标志物包括三十六种蛋白中至少一种；新型蛋白标志物的获得方法，具体包括：建立具有不同肌肉损伤程度的实验大鼠模型、收集各组大鼠血浆进行蛋白质组学检测并对比差异得到候选蛋白标志物、利用临床不同程度肌肉损伤患者的血液进行候选蛋白标志物验证并确定其诊断参考区间范围的步骤；蛋白组学标志物的应用为：利用新型蛋白标志物制作试剂盒或通过质谱方法或其他任何方法用于检测判断肌肉损伤程度。本发明为判断肌肉损伤程度提供了新的依据，便于将肌肉损伤程度进行量化。

技术研发人员：侯志勇,柳林,贾会扬,张英泽
受保护的技术使用者：河北医科大学第三医院
技术研发日：
技术公布日：2024/12/30