一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法、设备及程序产品

本申请涉及智能医疗领域，具体涉及一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法、设备、程序产品及计算机存储介质。

背景技术：

1、补体反应是一种酶级联反应，是血液和细胞表面蛋白质的集合。补体系统由30种不同的蛋白质组成，包括血清蛋白、浆膜蛋白和细胞膜受体，这些蛋白质在先天免疫系统中扮演重要角色。补体系统具有四大功能，包括溶解感染性生物体、激活炎症、调理和免疫清除。补体被认为在先天免疫(非特异性免疫，innate immune system)中发挥主要作用，即针对入侵的病原体产生快速且强大的反应。然而，近期的研究表明，补体在t细胞和b细胞参与的适应性免疫(adaptive immune systems)中也发挥着重要作用。补体系统不但参与先天免疫和适应性免疫，还与组织再生、肿瘤生长等有关。其中，补体激活途径的途径中：c5b可与c6稳定结合为c5b6，后者自发与c7结合成c5b-7，该复合物中的c7初步插入靶细胞膜脂质双分子层，继而c8于插入膜上的c5b-7高亲和力结合，形成稳定的、深插入细胞膜的c5b-8，该复合物可c9分子结合为c5b-9，此即膜攻击复合物(mac)。可以直接攻击细胞膜，导致细胞崩解，从而导致损伤。同时补体通路上可以释放出c3a、c5a等炎症介质，可以介导炎症。补体的过度激活或者失调，可以导致组织的损伤和炎症。如补体过度激活发生在循环中，可以攻击红细胞，患者可以表现为低补体血症，表现为阵发性睡眠性血红蛋白尿症；如果补体的过度激活发生组织局部，如补体终末产物攻击内皮细胞，就会导致相应器官损伤，如血栓性微血管病(tma)，如主要靶向器官为肾脏，则诊断为血栓性微血管病肾损伤，其中不典型溶血尿毒综合是最严重的一种类型，同时还包括恶性高血压、妊娠相关溶血尿毒综合征、移植相关tma、狼疮介导tma、硬皮病介导tma、抗磷脂综合征介导tma等。

技术实现思路

1、针对上述问题，在诊断补体相关疾病，已经寻找用药指征时，应针对上述补体局部活化的程度，而非整个补体系统，于是本发明提出一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，包括：

2、s1:获取检测对象的血清；

3、s2:获取人内皮细胞并将检测对象的血清、人内皮细胞加至人内皮细胞培养基中培养得到培养后的内皮细胞；

4、s3:对所述培养后的内皮细胞中加入一抗进行孵育得到一抗孵育产物，所述一抗为内皮细胞上与补体反应相关的蛋白的一抗；

5、s4:将所述一抗孵育产物中加入二抗进行孵育得到二抗孵育产物；

6、s5:所述二抗孵育产物通过流式细胞仪或者电子显微镜检测得到荧光强度，基于所述荧光强度得到补体反应水平。

7、所述内皮细胞包括下列的一种或几种：人肾小球内皮细胞、人脐静脉内皮细胞、人真皮血管内皮细胞。

8、所述补体反应相关的蛋白的一抗包括下列的一种或几种：c5b-9、c5b-8、c3、c4d、c5a，所述二抗选自与一抗相结合并被流式细胞仪检测到信号的二抗，包括下列的一种或几种：af647-lgg、别藻青蛋-lgg、cy5-lgg。

9、所述s2还包括对所述内皮细胞培养4-8代。

10、所述s2还包括添加二磷酸腺苷至人内皮细胞培养基中。

11、本发明的目的在于提供一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的系统，包括：

12、获取单元:获取检测对象的血清；

13、提取单元:获取人内皮细胞并将检测对象的血清、人内皮细胞加至人内皮细胞培养基中培养得到培养后的内皮细胞；

14、一次孵育单元:对所述培养后的内皮细胞中加入一抗进行孵育得到一抗孵育产物，所述一抗为内皮细胞上与补体反应相关的蛋白的一抗；

15、二次孵育单元:将所述一抗孵育产物中加入二抗进行孵育得到二抗孵育产物；

16、检测单元:所述二抗孵育产物通过流式细胞仪或者电子显微镜检测得到荧光强度，基于所述荧光强度得到补体反应水平。

17、本发明的目的在于提供一种计算机程序产品，其包括计算机程序或指令，所述计算机程序或指令被处理器执行实现上述基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法。

18、本发明的目的在于提供一种计算机设备，包括：

19、存储器和处理器，所述存储器用于存储程序指令；所述处理器用于调用程序指令，当程序指令被执行时实现上述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法。

20、本发明的目的在于提供一种计算机可读存储介质，其上有计算机程序，包括：

21、所述计算机程序被处理器执行时实现上述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法。

22、本发明的目的在于提供一种mdt决策方法，所述方法执行实现上述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法得到内皮细胞中的补体反应水平，当判定患者补体反应水平异常时，给予待测者用药方案中加入推荐抑制补体活化的药物。

23、所述抑制补体活化的药物为针对补体通路活化程度大于正常程度时进行抑制的药物。

24、进一步，当判定待测者c5b-9或者c5b-8补体反应水平异常时，推荐给予待测者补体抑制剂，所述补体抑制剂包括下列的一种或几种：c5单抗、b因子抑制剂、c3抑制剂、d因子抑制剂。

25、所述c5单抗包括依库珠单抗(eculiumab)、crovalimab、piasky、ravulizumab；所述b因子抑制剂包括iptacopan、ntq5082；所述c3抑制剂包括pegcetagoplan、empaveli；所述d因子抑制剂包括danicopan。

26、本发明的目的在于提供一种计算机程序产品，其包括计算机程序或指令，所述计算机程序或指令被处理器执行实现上述mdt决策的方法。

27、本发明的目的在于提供一种mdt决策设备，包括：

28、存储器和处理器，所述存储器用于存储程序指令；所述处理器用于调用程序指令，当程序指令被执行时实现上述的mdt决策方法。

29、本发明的目的在于提供一种计算机可读存储介质，其上有计算机程序，包括：

30、所述计算机程序被处理器执行时实现上述的mdt决策方法。

31、本发明的优势：

32、1.提出一种无创的体外检测组织补体反应的方法，通过该方法能够直观准确的检测患者组织局部是否发生补体激活，进而能够及时给予患者进行针对性治疗。

33、2.提出mdt决策方法，基于补体反应对患者进行分型，并根据分型结果给予患者用药指导，在使用药物中反复测定补体激活反应，调整用药剂量，避免用药过量或过少的问题。

34、3.对于疑似tma肾损伤的患者进行补体反应检测，能够准确判断患者是否发生血栓性微血管类的血管病变，避免进行肾脏穿刺，降低检查难度，减少患者的检查痛苦。

技术特征：

1.一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，其特征在于，所述内皮细胞包括下列的一种或几种：人肾小球内皮细胞、人脐静脉内皮细胞、人真皮血管内皮细胞。

3.根据权利要求1所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，其特征在于，所述补体反应相关的蛋白的一抗包括下列的一种或几种：c5b-9、c5b-8、c3、c4d、c5a，所述二抗选自与一抗相结合并被流式细胞仪检测到信号的二抗，包括下列的一种或几种：af647-lgg、别藻青蛋-lgg、cy5-lgg。

4.根据权利要求1所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，其特征在于，所述s2还包括添加二磷酸腺苷至人内皮细胞培养基。

5.一种mdt决策方法，其特征在于，包括：

6.根据权利要求5所述的mdt决策方法，其特征在于，所述抑制补体活化的药物为针对补体通路活化程度大于正常程度时进行抑制的药物；

7.根据权利要求6所述的mdt决策方法，其特征在于，所述c5单抗包括依库珠单抗、crovalimab、piasky、ravulizumab；

8.一种计算机程序产品，其包括计算机程序或指令，其特征在于，所述计算机程序或指令被处理器执行实现权利要求1-4任意一项所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，或执行实现权利要求5所述的mdt决策方法。

9.一种计算机设备，包括存储器、处理器及存储在存储器上的计算机程序或指令，其特征在于，所述处理器用于调用计算机程序或指令，当程序指令被执行时实现权利要求1-4任意一项所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，或执行实现权利要求5所述的mdt决策方法。

10.一种计算机可读存储介质，其上存储有计算机程序或指令，其特征在于，所述计算机程序被处理器执行时实现权利要求1-4任意一项所述的基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法，或执行实现权利要求5所述的mdt决策方法。

技术总结
本申请涉及智能医疗领域，具体涉及一种基于内皮细胞检测补体系统反应程度的方法、设备及程序产品。包括S1:获取检测对象的血清；S2:获取人内皮细胞并将检测对象的血清、人内皮细胞加至人内皮细胞培养基中培养得到培养后的内皮细胞；S3:对所述培养后的内皮细胞中加入一抗进行孵育得到一抗孵育产物，所述一抗为内皮细胞上与补体反应相关的蛋白的一抗；S4:将所述一抗孵育产物中加入二抗进行孵育得到二抗孵育产物；S5:所述二抗孵育产物通过流式细胞仪或者电子显微镜检测得到荧光强度，基于所述荧光强度得到补体反应水平。该方法能够反映组织中补体激活程度，用于补体反应检测，具有很好临床价值。

技术研发人员：谭颖,谭萌,赵明辉
受保护的技术使用者：北京大学第一医院（北京大学第一临床医学院）
技术研发日：
技术公布日：2024/12/17