一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法与流程

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法。

背景技术：

1、术后肠麻痹(postoperative ileus，poi)往往出现于外科手术之后，患者出现无法经口摄入的临床现象，其特征是胃肠蠕动功能受损，临床可表现为术后恶心、呕吐、腹痛及停止排气、排便等症状。术后通气方由江苏省中医院药学专家与临床专家研发，由炒莱菔子、炒黄芥子、炒紫苏子、蒲公英、焦山楂、炒鸡内金、陈皮、甘草8味中药组成。方中炒莱菔子、炒紫苏子、炒黄芥子为君药，取自经典方剂“三子养亲汤”，该方出自《韩氏医通》，具有降气消食，温肺化痰之功效。炒鸡内金、焦山楂消食健胃助消化，辅以陈皮理气健脾，而蒲公英清热解毒、消肿散结、利尿通淋，四者共为臣药，佐以甘草调和诸药，补心脾气。本方肺胃肠同治，宣肺降气，健胃助运，表里同调，上下合治，促进恢复胃肠通降功能；全方降气化痰，消导助运，促进术后肠胃功能的恢复。

2、中药指纹图谱较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。hplc指纹图谱可有效控制中药质量，即使色谱峰属于未知化合物，hplc指纹图谱也能提供充分可靠的信息，可用于鉴别中药的质量。

3、中药复方具有多成分、多靶点、多层次的特点，这表明单一指标不能全面整体地反映复方特征，多指标综合评价可综合多项重要指标。目前术后通气方汤剂缺少相关的质量控制方法，无法精确的判断药物的质量。因此，研究一种能够精确的判断术后通气方汤剂质量的方法成为了亟待解决的问题。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的技术空白等问题，本发明的目的是提供一种术后通气方汤剂指纹图谱的建立方法及术后通气方汤剂质量检测方法，以解决现有技术没有定量测定难以作为术后通气方汤剂整体质量的评价标准的问题。

2、本发明为实现其目的采用的技术方案是：提供了一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

3、(1)对照品溶液的制备：精密称定5-hmf、绿原酸、芥子碱硫氰酸盐、菊苣酸、芸香柚皮苷、3,6’-二芥酰基蔗糖、橙皮苷和迷迭香酸对照品，加甲醇制成混合对照品溶液；

4、(2)供试品溶液的制备：精密称取术后通气方汤剂5ml于10ml容量瓶，加甲醇定容到刻度线，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

5、(3)采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱；步骤(3)中，所述高效液相色谱法的条件为：中谱科技rd-c18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相乙腈(a)-甲醇(b)-0.2％磷酸(c)，梯度洗脱(0-15min，9％-10％ a，1％-5％b；15-40min，10％-15％b，5％-13％b；40-50min，15％-20％a，13％-20％b；50-55min，20％-10％a，20％-0％b；55-60min，10％a，0％b)；体积流量1.0min/ml；柱温30℃；检测波长300nm，进样体积10μl。

6、所述一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，混合对照品溶液中5-hmf浓度为39.200μg·ml-1、绿原酸浓度为3.258μg·ml-1、芥子碱硫氰酸盐浓度为95.020μg·ml-1、菊苣酸浓度为14.500μg·ml-1、芸香柚皮苷浓度为13.950μg·ml-1、3,6’-二芥酰基蔗糖浓度为38.290μg·ml-1、橙皮苷浓度为36.040μg·ml-1、迷迭香酸浓度为11.830μg·ml-1。

7、所述一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，术后通气方汤剂的制备方法为：称取炒莱菔子30重量份、炒芥子10重量份、炒紫苏子10重量份、炒鸡内金9重量份、蒲公英30重量份、焦山楂10重量份、陈皮6重量份、甘草3重量份，放入陶炉中，煎煮两次，一煎加入12倍水浸泡30min，煎煮30min，二煎加入6倍水煎煮30min，滤过，合并滤液，滤液加水定容至1600重量份。

8、一种术后通气方汤剂指纹图谱，其由上述中药指纹图谱的建立方法检测构建而成。

9、所述的术后通气方汤剂指纹图谱，所述指纹图谱中2号峰5-hmf、4号峰绿原酸、6号峰芥子碱硫氰酸盐、14号峰菊苣酸、15号峰芸香柚皮苷、17号峰3,6’-二芥酰基蔗糖、18号峰橙皮苷、19号峰迷迭香酸。

10、一种术后通气方汤剂质量检测方法，将术后通气方汤剂待检测样品按照上述构建方法进行检测，得到术后通气方汤剂检测样品的高效液相色谱图谱，按照上述构建方法构建术后通气方汤剂指纹图谱，将术后通气方汤剂待检测样品的高效液相色谱图谱与术后通气方汤剂指纹图谱进行比较。

11、有益效果：

12、(1)本发明采用了不同的梯度洗脱对术后通气方汤剂进行高效液相色谱检测，分离效果好；

13、(2)本发明提供的方法，通过合理选择对照品成分，并根据成分的最大吸收波长，采用定时波长的方法，能够有效的表示样品间成分量的变化，从而更加精确的评判样品的质量；

14、(3)本发明提供的方法针对术后通气方汤剂的药效、所含成分的结构特点等，对对照品、供试品溶液等的配置进行了筛选和优化，制定的方法重复性及稳定性好，能够更加全面的对术后通气方汤剂进行质量监控，本方法为中药汤剂的质量评价和标准化提供有价值的参考。

15、(4)本发明涉及的中药复方制剂中药多，有效成分比较复杂，仅对一种或者几种有效成分含量测定，难以准确评级中药制剂的质量。本发明通过构建术后通气方汤剂的hplc指纹图谱，可以很好地对术后通气方汤剂产品质量进行定性分析，为全面评价术后通气方汤剂的质量标准提供依据。

16、(5)本发明确定芥子碱硫氰酸盐、菊苣酸、橙皮苷、迷迭香酸的质量分数和干膏率作为提取工艺的评价指标，采用多指标综合评分的方法对单因素试验和正交试验结果进行综合评分，优化了提取工艺。

技术特征：

1.一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，混合对照品溶液中5-hmf浓度为39.200μg·ml-1、绿原酸浓度为3.258μg·ml-1、芥子碱硫氰酸盐浓度为95.020μg·ml-1、菊苣酸浓度为14.500μg·ml-1、芸香柚皮苷浓度为13.950μg·ml-1、3,6’-二芥酰基蔗糖浓度为38.290μg·ml-1、橙皮苷浓度为36.040μg·ml-1、迷迭香酸浓度为11.830μg·ml-1。

3.如权利要求1所述一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，术后通气方汤剂的制备方法为：称取炒莱菔子30重量份、炒芥子10重量份、炒紫苏子10重量份、炒鸡内金9重量份、蒲公英30重量份、焦山楂10重量份、陈皮6重量份、甘草3重量份，放入陶炉中，煎煮两次，一煎加入12倍水浸泡30min，煎煮30min，二煎加入6倍水煎煮30min，滤过，合并滤液，滤液加水定容至1600重量份。

4.一种术后通气方汤剂指纹图谱，其特征在于，其由权利要求1构建方法检测构建而成。

5.根据权利要求4所述的术后通气方汤剂指纹图谱，其特征在于，所述指纹图谱中2号峰5-hmf、4号峰绿原酸、6号峰芥子碱硫氰酸盐、14号峰菊苣酸、15号峰芸香柚皮苷、17号峰3,6’-二芥酰基蔗糖、18号峰橙皮苷、19号峰迷迭香酸。

6.一种术后通气方汤剂质量检测方法，其特征在于，将术后通气方汤剂待检测样品按照权利要求1所述构建方法进行检测，得到术后通气方汤剂检测样品的高效液相色谱图谱，按照权利要求1所述构建方法构建术后通气方汤剂指纹图谱，将术后通气方汤剂待检测样品的高效液相色谱图谱与术后通气方汤剂指纹图谱进行比较。

技术总结
本发明属于药物分析领域，具体涉及一种术后通气方汤剂的中药指纹图谱的建立方法。该方法通过以下步骤实现：首先制备对照品溶液和供试品溶液，然后采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱。本发明提供的方法，通过合理选择对照品成分，并根据成分的最大吸收波长，采用定时波长的方法，能够有效的表示样品间成分量的变化，从而更加精确的评判样品的质量；本发明还提供了术后通气方汤剂的制备方法筛选和优化方法，制定的方法重复性及稳定性好，能够更加全面的对术后通气方汤剂进行质量监控，本方法为中药汤剂的质量评价和标准化提供有价值的参考。

技术研发人员：束雅春,陈列红,谢怡君
受保护的技术使用者：江苏省中医院
技术研发日：
技术公布日：2025/2/27