气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法

本发明涉及食用植物油污染分析检测，具体涉及气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法。

背景技术：

1、多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons，pah)是一类高亲脂性环境和食品污染物。食用植物油中pah污染有较高食品安全风险，是人体摄入的主要来源。目前，我国食用植物油中，虽然仅规定了苯并(a)芘(benzo[a]pyrene，bap)的限量(10μg/kg)，但已将bap，苯并(a)蒽(benzo[a]anthracene,baa)、苯并(b)荧蒽(benzo[b]fluoranthene,bbf)和屈(chrysene，chr)4种欧盟限量的pah，即pah4，做重要食品安全危害物，列入食品安全风险监测目录。因而，研究简便有效的pah4检测方法，对提高食品安全监测效率很有实际意义。

2、目前，高效液相色谱-荧光检测、气相色谱-质谱法是食品中pah检测应用较多的方法；gc-ms/ms由于具有更高的选择性，则为进一步简化样品前处理提供有利条件。就食用植物油样品而言，脱除油脂的干扰是检测pah的关键，通常需要进行溶剂提取，再使用c18固相萃取柱、中性氧化铝柱、分子印迹柱、分散固相萃取法等进行净化，方法相对繁琐，成本也相对较高。现有技术大多是采用分散液液萃取的方法从水溶液中萃取多环芳烃，而食用油主体是油且多环芳烃是脂溶性的，因此从油中提取多环芳烃是非常困难的，方法过程长，成本较高。

技术实现思路

1、本发明提供了气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，有效解决了现有技术中从植物油很难提取脂溶性多环芳烃，以及现有食用植物油中pah4检测样品前处理复杂、耗时、成本高、有毒试剂用量大的技术问题。

2、本发明提供了气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，包括以下步骤：

3、称取植物油样品，加入bap-d12的二氯甲烷溶液和chr-d12的二氯甲烷溶液为内标物质，加入氢氧化钾的甲醇溶液为皂化试剂，涡旋，进行皂化处理，得到皂化液，加水稀释，加入碳酸氢钠，溶解，注入萃取剂，超声振荡，进行分散液液微萃取，离心分离，得到有机萃取相；

4、将有机萃取相通过装有脱水剂的过滤膜进行脱水和过滤，得到待检液；将所述待检液采用气相色谱-串联质谱进行检测。

5、作为一种优选的实施方式，所述bap-d12的二氯甲烷溶液和chr-d12的二氯甲烷溶液的浓度均为1mg/l，所述氢氧化钾的甲醇溶液的浓度为5mol/l，所述植物油、内标物质与皂化液用量比为0.5g:20～25μl:3～5ml。

6、作为一种优选的实施方式，所述皂化处理的温度为80～85℃，时间为0.5h。

7、作为一种优选的实施方式，所述水与皂化液的体积比为5～6:1，所述碳酸氢钠与水的质量比为1:8～10。

8、作为一种优选的实施方式，所述萃取剂为二氯甲烷，采用注射器猛力注入，所述萃取剂的加入体积为皂化液加水稀释后的总体积的1/25～1/20。

9、作为一种优选的实施方式，所述超声功率为500w，超声时间5min；所述离心转速为4000r/min，离心时间为5min。

10、作为一种优选的实施方式，所述脱水和过滤时是通过装有脱水剂的过滤膜进行的，所述脱水剂为无水硫酸钠，所述有机萃取相与脱水剂用量比为200μl:0.2～0.3g。

11、作为一种优选的实施方式，所述气相色谱的条件具体为：色谱柱为hp-5ms色谱柱，规格为30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度为280℃，不分流进样，进样量为1μl；载气为氦气，纯度≥99.999％，流速为1.0ml/min；升温程序：50℃保持1min，20℃/min升至220℃，再以5℃/min升至320℃保持2min。

12、作为一种优选的实施方式，所述串联质谱的条件具体为：离子化方式：ei；电离能70ev；离子源温度：230℃，四级杆温度：150℃；转接口温度：280℃；溶剂延迟：3min；多重反应监测模式进行检测。

13、作为一种优选的实施方式，从称取植物油样品至获得有机萃取相的过程是在一个50ml带螺口盖的塑料离心管中进行的。

14、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

15、本发明提供的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，样品前处理简单，以bap-d12的二氯甲烷溶液和chr-d12的二氯甲烷溶液为内标物质，以氢氧化钾的甲醇溶液为皂化试剂，涡旋，进行皂化处理，得到皂化液，加水稀释，加入碳酸氢钠，溶解，注入萃取剂，超声振荡，进行分散液液微萃取，离心分离，得到有机萃取相；对有机萃取相通过装有脱水剂的过滤膜进行脱水和过滤，得到待检液；将所述待检液采用气相色谱-串联质谱进行检测。本发明从称量样品至获得有机萃取相均在同一离心管中完成，成本低，有毒试剂用量小，相对更为绿色环保，有更低的检出限和定量限，准确度和精密度良好，定量可靠，能够显著提高pah4的检测效率。

技术特征：

1.气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述bap-d12的二氯甲烷溶液和chr-d12的二氯甲烷溶液的浓度均为1mg/l，所述氢氧化钾的甲醇溶液的浓度为5mol/l，所述植物油、内标物质与皂化液用量比为0.5g:20～25μl:3～5ml。

3.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述皂化处理的温度为80～85℃，时间为0.5h。

4.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述水与皂化液的体积比为5～6:1，所述碳酸氢钠与水的质量比为1:8～10。

5.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述萃取剂为二氯甲烷，所述萃取剂的加入体积为皂化液加水稀释后的总体积的1/25～1/20。

6.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述脱水和过滤时是通过装有脱水剂的过滤膜进行的，所述脱水剂为无水硫酸钠，所述有机萃取相与脱水剂用量比为200μl:0.2～0.3g。

7.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述气相色谱的条件具体为：色谱柱为hp-5ms色谱柱，规格为30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度为280℃，不分流进样，进样量为1μl；载气为氦气，纯度≥99.999％，流速为1.0ml/min；升温程序：50℃保持1min，20℃/min升至220℃，再以5℃/min升至320℃保持2min。

8.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述串联质谱的条件具体为：离子化方式：ei；电离能70ev；离子源温度：230℃，四级杆温度：150℃；转接口温度：280℃；溶剂延迟：3min；多重反应监测模式进行检测。

9.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，所述超声功率为500w，超声时间5min；所述离心转速为4000r/min，离心时间为5min。

10.根据权利要求1所述的气相色谱-串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法，其特征在于，从称取植物油样品至获得有机萃取相的过程是在带螺口盖的塑料离心管中进行的。

技术总结
本发明属于分析检测技术领域，公开了气相色谱‑串联质谱检测植物油中四种多环芳烃的方法。本发明通过将皂化脱脂方法与分散液液微萃取(DLLME)进行有机结合，有效简化样品前处理，再结合气相色谱‑串联质谱(GC‑MS/MS)的高选择性和稳定同位素内标定量的优势，建立了常见食用植物油中苯并(a)芘(BAP)、苯并(a)蒽(BAA)、苯并(b)荧蒽(BBF)和屈(CHR)4种重要多环芳烃(PAH4)的检测新方法。该方法样品前处理简单、快速，人员环境相对更为友好，检出限、准确度均能满足常见食用植物油中PAH4监测的需要。

技术研发人员：王宗义,潘晓玉,马小童,刘雨婷,门嘉倩
受保护的技术使用者：北京农学院
技术研发日：
技术公布日：2025/2/20