一种免疫组化抗体稀释液及其制备方法与流程

本发明属于免疫，具体涉及一种免疫组化抗体稀释液及其制备方法。

背景技术：

1、免疫组化是免疫组织化学的简称，应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，并对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化抗体稀释液是在进行免疫组化实验时用到的抗体稀释液，常用抗体试剂的效价很高，需要稀释到合适浓度后才可以用到检测抗原的反应中。抗体稀释液的组分对免疫组化检测的强度及抗体产品的稳定性起关键作用。

2、目前市场上抗体稀释液的配方多样：有通用型的磷酸缓冲盐溶液(pbs)或三乙醇胺缓冲盐水溶液(tbs)作为抗体稀释液，通过其缓冲作用降低因ph变化对实验结果的影响，但是该类抗体稀释液存在对抗体的储存稳定性差、储存时间短和对抗原的检测强度低等问题；有的抗体稀释液通过加入叠氮钠防腐剂，以增强抗体的存储稳定性，但是叠氮钠对辣根过氧化物酶(hrp)的酶活有影响，不能用于免疫组化二抗的稀释，而且具有剧毒，不利于实验安全管理。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种免疫组化抗体稀释液及其制备方法，以解决背景技术中的问题。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种免疫组化抗体稀释液，包括以下重量份的组分：

4、氯化钠7.8-8.1份、氯化钾0.15-0.25份、磷酸二氢钠3.5-3.6份、磷酸氢二钾0.25-0.3份、牛血清白蛋白(bsa)9.5-10.5份、山羊血清4.5-5.5份、proc l i n 300 0.9-1.1份和去离子水950-1050份。

5、进一步地，所述免疫组化抗体稀释液，包括以下重量份的组分：

6、氯化钠8份、氯化钾0.2份、磷酸二氢钠3.58份、磷酸氢二钾0.27份、bsa 10份、山羊血清5份、proc l i n 300 1份和去离子水1000份。

7、进一步地，所述免疫组化抗体稀释液的ph值为7.5。

8、一种免疫组化抗体稀释液的制备方法，包括以下步骤：

9、称量氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠和磷酸氢二钾加入去离子水中，室温搅拌充分溶解，然后加入bsa、山羊血清和proc l i n 300，调节ph至7.5，调节溶液颜色，0.22um滤膜过滤，得到免疫组化抗体稀释液。

10、有益效果：

11、本发明制得的抗体稀释液可用于免疫组化抗体的生产，能够提高免疫组化抗体的储存稳定性，在2-8℃下至少能够保存24个月，使用者无需任何配置操作便可直接使用，方便快捷；

12、本发明的抗体稀释液使用proc l i n 300作为防腐剂，具有广谱抑菌能力，对细菌、真菌和酵母均有效，且性能稳定、安全可靠，不仅可用于免疫组化抗体的稀释，而且由于不含有叠氮钠，还可以用于hrp二抗的稀释；

13、本发明的抗体稀释液可以提高免疫组化的特异性，其中含有的牛血清白蛋白和山羊血清可以直接作为免疫组化封闭剂使用以降低背景信号，显著提高对各种组织染色结果的信噪比。

技术特征：

1.一种免疫组化抗体稀释液，其特征在于，包括以下重量份的组分：

2.根据权利要求1所述的一种免疫组化抗体稀释液，其特征在于，包括以下重量份的组分：

3.根据权利要求1所述的一种免疫组化抗体稀释液，其特征在于，所述抗体稀释液的ph值为7.5。

4.根据权利要求1所述的一种免疫组化抗体稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

技术总结
本发明公开了一种免疫组化抗体稀释液及其制备方法，属于免疫技术领域，包括以下步骤制得：按重量份称量氯化钠7.8‑8.1份、氯化钾0.15‑0.25份、磷酸二氢钠3.5‑3.6份和磷酸氢二钾0.25‑0.3份加入去离子水950‑1050份中，室温搅拌充分溶解，然后加入牛血清白蛋白9.5‑10.5份、山羊血清4.5‑5.5份和ProClin 300 0.9‑1.1份，调节pH至7.5，调节溶液颜色，0.22um滤膜过滤后，得到免疫组化抗体稀释液；本发明制得的抗体稀释液能够提高免疫组化抗体的储存稳定性，性能稳定、安全可靠，可以降低背景信号，显著提高对各种组织染色结果的信噪比。

技术研发人员：吴恙,林雪飞,孙卓,李凯利,张豪,律文慧,孙千姿
受保护的技术使用者：河南艾方生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2025/3/13