一种托法替布血浆药物浓度的检测方法及其应用

本发明涉及托法替布药物应用领域，具体涉及一种托法替布血浆药物浓度的检测方法及其应用。

背景技术：

1、托法替布(tofacitinib)作为一种janus激酶(jak)抑制剂，其化学结构特点使其能够特异性地抑制jak信号通路，从而阻断免疫应答中的关键信号传导，达到治疗自身免疫性疾病的目的。托法替布的化学成分主要包括活性成分枸橼酸托法替布和多种辅料成分。这些成分共同构成了枸橼酸托法替布片的药物基础，使其在治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎和银屑病关节炎等自身免疫性疾病方面具有显著疗效。尽管如此，长期使用枸橼酸托法替布片可能导致免疫系统功能被抑制，增加感染的风险，如呼吸系统感染、泌尿系统感染等。此外，还可能引起血液系统异常、精神和神经系统异常、皮肤及肌肉骨骼异常等副作用。所以，在使用托法替布期间，患者需要遵医嘱定期复查，以便及时发现并处理可能出现的不良反应或并发症。

2、皮肌炎是一种主要累及皮肤和肌肉的自身免疫性疾病，其治疗方法包括一般治疗、药物治疗、物理治疗、血浆置换和手术治疗等。其中，药物治疗是皮肌炎的主要治疗手段之一。对于皮肌炎患者，托法替布可以作为辅助治疗药物，减轻皮肤表面的损害，并可能有助于改善肌肉功能。但使用托法替布治疗的皮肌炎患者，可能会出现一些副作用，如血压升高、感染、出血等。此外，还可能引起贫血、蛋白尿、心肌损伤等情况。对于托法替布而言，其治疗窗可能较窄，半衰期短，服药剂量和次数个体差异化大，因此药物浓度监测尤为重要。药物浓度监测有助于评估患者的药物暴露水平，确保药物在有效浓度范围内，从而提高治疗效果并减少副作用。除此之外，药物浓度可以密切监测患者的身体状况，并及时处理任何不适症状。依据药物浓度，患者可以在医生的指导下进行个体化治疗。目前，测定血浆中药物浓度的方法主要为高效液相色谱-串联质谱法(lc-ms/ms)。这种方法具有高灵敏度、高特异性和高准确度的特点，适用于临床大批量样品的分析。

3、目前国内市场上还未出现市场化的托法替布药物浓度的液相色谱-串联质谱检测试剂盒，因此，鉴于检测托法替布药物浓度的重要性，开发一种可以广泛应用，高效灵敏及操作简单的托法替布药物浓度检测试剂盒以及相应的检测方法对于预测药物疗效及不良反应，指导临床应用就显得尤为紧要。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种托法替布血浆药物浓度的检测方法及其应用。以克服现有的托法替布药物浓度检测和应用的市场化空白。

2、为了实现本发明的目的，所采用的技术方案是：

3、一种托法替布血浆药物浓度的检测方法，包括如下步骤：

4、第一步，提取足量的样品制备母液后采用内标法配置方法来进行液相色谱-串联质谱检测；

5、所述内标法中的母液采用甲醇梯度配置，其中的托法替布血浆浓度范围为100ng/ml-1000ng/ml；

6、所述内标法中的内标液采用甲醇配置，其中的托法替布血浆浓度为1000ng/ml；

7、第二步，设置液相色谱的检测条件和质谱的检测条件，

8、所述液相色谱的检测条件为以phenomenexc18柱作为色谱柱使用，在流动相a为体积比为0.1-0.2％的甲酸水，流动相b为甲醇的条件下梯度洗脱后获得的洗脱液联合质谱进行分析获得相应的托法替布血浆药物浓度数据；

9、所述质谱的检测条件为sciex triple quad 4500质谱；

10、离子源电压为5000-5500v，离子源温度为500℃，采用电喷雾电离-正离子模式；

11、检测方式为多反应监测；辅助气50-60psi、碰撞气8-10psi、雾化气50psi，辅助气、碰撞气和雾化气均为氮气。

12、在本发明的一个优选实施例中，所述内标法中的标准曲线溶液配置曲线如下：

13、50ng/ml：母液3*50ul+内标液*20ul+430ul甲醇+500ul超纯水；

14、20ng/ml：母液3*20ul+内标液*20ul+460ul甲醇+500ul超纯水；

15、10ng/ml：母液3*10ul+内标液*20ul+470ul甲醇+500ul超纯水；

16、5ng/ml：母液2*10ul+内标液*20ul+470ul甲醇+500ul超纯水；

17、2ng/ml：母液1*20ul+内标液*20ul+460ul甲醇+500ul超纯水；

18、1ng/ml：母液1*10ul+内标液*20ul+470ul甲醇+500ul超纯水。

19、一种托法替布血浆药物浓度的检测方法的应用，所述应用为通过检测获得的结果来积分判断药物谷浓度。

20、在本发明的一个优选实施例中，所述积分判断药物谷浓度为一共纳入6个指标，分别为谷草转氨酶指标、谷丙转氨酶指标、谷氨酰转肽酶指标、血肌酐指标、血尿酸指标和尿素氮指标，单个指标为10分，积分的算法为一定的药物浓度范围内，6个指标出现异常的例数之和/总例数乘10分，积分大于1提示有用药风险。

21、本发明的有益效果在于：

22、本发明提供了一种托法替布血浆药物浓度的检测方法及其应用。以克服现有的托法替布药物浓度检测和应用的市场化空白。

技术特征：

1.一种托法替布血浆药物浓度的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的一种托法替布血浆药物浓度的检测方法，其特征在于，所述内标法中的标准曲线溶液配置曲线如下：

3.一种如权利要求1或2当中任一项所述的托法替布血浆药物浓度的检测方法的应用，其特征在于，所述应用为通过检测获得的结果来积分判断药物谷浓度。

4.如权利要求3所述的托法替布血浆药物浓度的检测方法的应用，其特征在于，所述积分判断药物谷浓度为一共纳入6个指标，分别为谷草转氨酶指标、谷丙转氨酶指标、谷氨酰转肽酶指标、血肌酐指标、血尿酸指标和尿素氮指标，单个指标为10分，积分的算法为一定的药物浓度范围内，6个指标出现异常的例数之和/总例数乘10分，积分大于1提示有用药风险。

技术总结
本发明公开了一种托法替布血浆药物浓度的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，提取足量的样品制备母液后采用内标法配置方法来进行液相色谱‑串联质谱检测；所述内标法中的母液采用甲醇梯度配置，其中的托法替布血浆浓度范围为100ng/ml‑1000ng/ml；所述内标法中的内标液采用甲醇配置，其中的托法替布血浆浓度为1000ng/ml；第二步，设置液相色谱的检测条件和质谱的检测条件，在色谱梯度洗脱后获得的洗脱液联合质谱进行分析后获得相应的托法替布血浆药物浓度数据。本发还公开了其应用。本发明提供了一种托法替布血浆药物浓度的检测方法及其应用。以克服现有的托法替布药物浓度检测和应用的市场化空白。

技术研发人员：王楷文,赵江峰,张洁,郭丽,付亚凯,陈志威,杨海婷,曹励欧,叶霜
受保护的技术使用者：上海交通大学医学院附属仁济医院
技术研发日：
技术公布日：2025/4/14