专利名称：口液收集器和配套装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及获取口液以便进行试验的设备和方法。
参考文献Parry，J.V.，etal.，Lancet272-75(1987).
Thieme，T.，etal.，J.Clin.Microbiol.201076-1079(1992a).
Thieme，T.，etal.，"OralFluidSamplingforDeterminationofHIV-IAntibodySerostatus，"AbstractfromⅧInt′1.Conf.onAIDs，pg.C328(1992b).
一般用来检验体液以获取有诊断价值的物质存在的分析方法和设备有许多种。血液和尿都是精选出来的体液。血液用作试验液体的一个优点是分析物的浓度通常相当高，测定这些浓度通常可给出有关患者健康状况的信息。当感当趣的血液成分(如低分子量的药物或激素)在尿形成期间被浓缩时，尿对于诊断试验就是很有用的了。但分析物在尿中的浓度经常反映不出血液中分析物的生理活动量。
尽管唾液在医疗诊断中通常不当作体液使用，但许多研究(Parry，etal.，Thieme，etal.，1992a，b)已经证实唾液和其它类型的口液能为诊断试验提供可靠的试样，其中包括对人或动物的各种病原特异的抗原或抗体。在测量天然激素的体内水平以及治疗药物和其它药物的体内水平时，口液也被证实是有用的。
口液取样优于血液和尿取样的一个方面在于获取试样很方便。口液取样不需要像血液那样的训练有素的抽血人员，也不像尿取样那样需要专用于样品收集和保管的特殊器具。再有，收集口液试样还可避免处理被血污染的针头和针管之类的麻烦。
收集口液的设备已被描述过。美国专利4，418，702和4，580，577公开了一种吸收口液的吸垫，以及从吸垫提取口液的针筒-柱塞机构。
美国专利4，774，962描述了一种吸收唾液的吸垫，以及一个离心管和管插入物，用于通过离心作用从吸垫上取出口液。
美国专利5，056，521描述了一种用于监测口液中葡萄糖的设备。该设备包括一个针筒-柱塞机构，该机构有一个固定到柱塞上的非反应性吸收拭子。用针筒和柱塞将液体试样从拭子挤入葡萄糖监测仪器中。
本发明一方面包括一种收集口液以便进行诊断的器械。该器械包括一个吸垫，用于从口液中提取试验物质，还包括一个结构(装置)，用于从吸垫上提取已吸收到吸垫上的口液。
具体地说，从吸垫提取已吸收的口液的结构包括具有一个针筒的注射器和一个附有吸垫的柱塞。
吸垫可包含各种添加剂，例如防腐剂、盐、香料、以及保护剂，用于防止口液组分对吸垫的非特异的结合。在一个优选实施例中，用盐的高渗溶液浸透吸垫，下面将对此作进一步描述。
在另一个优选实施例中，该注射器进一步还包括位于针筒出口端的一个液体通路，并且检测试剂(一种或多种)包含在该通路中，当口液自针筒排出时，该试剂能有效地排入口液中。该通路可由一个试剂管确定，该试剂管按可拆卸的方式安装在针筒上。
按本发明的一个相关方面，本发明包括一个测定装置，用于测定口液中的试验物质。该装置包括上述的吸垫-注射器结构和一个用于接纳从该结构排出的口液的检测单元。该检测单元包括一个固相载体和附着在该载体上的结合剂，当口液自针筒排入到该检测单元时，该结合剂能有效地专门结合到口液中的试验物质上。该检测单元可连接到注射器的出口端，或可用作一个独立的接纳液体的结构。
该装置进一步包括一个与检测单元成液体连通的、和针筒相连的通路。该通路可包含检测试剂(一种或多种)，当口液从针筒排出时，该试剂能有效地排入口液中。检测试剂(一种或多种)最好能与口液中的实验物质有效地进行反应，以便在载体上产生一个可检测到的信号，该信号取决于口液中试验物质的浓度。
在该装置的一个优选的实施例中，固相载体是一个可渗透的膜，并且该检测单元进一步包括一个吸收部件，该吸收部件可与膜接触，从而可抽取穿过该膜载体的口液。
按一种结构，该试验物质是一种抗体，该抗体是被已知病原感染的诊断。结合剂可以是一种抗原，该抗原可与该试验抗体发生免疫反应，在这种情况下该装置进一步还包括一个报告信息物标记的试剂，当该试剂结合到固相载体上时，该试剂能有效地结合到该试验物质抗体上。
另外，该结合剂可以有选择地结合人的抗体，在这种情况下该装置可以进一步包括一种报告信息物标记的抗原，该抗原可与试验物质抗体发生免疫反应。一种结合试验物质抗体的典型结合剂是蛋白A。
按另一种结构，该试验物质是一种抗原，该抗原是被已知病原感染的诊断。结合剂可以是一种抗体，该抗体可与试验抗原发生免疫反应，在这种情况下该装置可进一步包括一种报告信息物标记的试剂，该试剂当被结合到固相载体时，该试剂能有效地结合到该试验物质抗原上。
按本发明的另一方面，包括一个固相载体表面，用于对一个口液试样中的试验物质和标记物质这两者同时进行鉴定，标记物质即是能对被检验的口液给出可靠指示的物质。分别结合试验物质和标记物质的第一和第二结合剂可以定位在该表面至少部分的不重叠区域。两个结合区最好形成符号“+”的两个长条。
当结合附图阅读本发明的下述详细描述时，本发明的这些和其它目的及特征将更加清楚。
图1A和1B是按本发明一个实施例的口液收集器的剖面侧视图，表示在该器械中柱塞与针筒接合之前(图1A)和之后(图1B)的情况图2是图1器械的柱塞和吸垫的组装图;
图3A和3B表示另一个试剂管和针筒实施例;
图4表示按本发明的试验装置的剖面侧视图;
图5表示按本发明的试验装置的另一个实施例的剖面侧视图;
图6A-6C表示用于按本发明检测口液中试验物质的典型的固相形式;
图7表示一个固相载体表面的布局，用于对口液中的试验物质和标记物质同时进行测定。
A.口液收集器图1A和1B表示按本发明构造的一个口液收集器8。该收集器一般来说包括一个起收集口液作用的吸垫10、连附到吸垫10上的一个柱塞11、一个针筒12、以及一个在所示实施例中的可拆卸的试剂管13。柱塞11包括柱塞杆14、密封垫15(位于柱塞内端)、推板16(位于柱塞外端)。
图2表示柱塞和吸垫的组装图。如图2所示，柱塞杆按常规作法包括靠近柱塞杆内端的一对径向扩展件18、20，其末端为指状突出物22。按常规方式，最好通过注模适当的聚合物来形成柱塞杆和推板。
密封垫15是一种软橡胶或柔性的聚合物材料，将它设计成能接纳在柱塞上并能借助于扩展件18、20固定就位，显然，突出物22要穿过密封垫的端部伸出去。垫的直径要能和针筒12的内壁形成一个紧贴在一起的不漏液体的密封。
垫10通过常规的粘合剂(例如适于人类口腔使用的硅橡胶粘合剂之类的粘合剂)固定到柱塞11的内端。吸垫和柱塞杆的固定接触表面包括垫15的内表面、以及容纳在吸垫中的突出物22的那部分，如图2所示。
吸垫可由一系列适于口腔使用的吸收材料中的任何一种材料制成。垫最好是一种厚的吸收性棉团或纸，例如牙科操作通常使用的那种。这种吸垫的一个实例是PattersonDentalCo.(Minneapolis，MN)发售的1.5英2中等棉团。也可以使用诸如纤维素、聚氨酯、聚酯、以及人造纤维之类的材料。
在本发明的一个实施例中，用盐的高渗溶液浸透吸垫，溶液的量要对在口液中回收高浓度的试验物质(例如免疫球蛋白)有效。如在美国专利5，103，836中详细描述的那样(在这里参考引入了该专利)，使用高渗溶液的结果是能从口腔中的其它来源恒定地产生免疫球蛋白，这些来源眼下尚不定全清楚。和使用蒸馏水相比，使用高渗溶液获得的免疫球蛋白可能提高8-16倍之多。
高渗溶液是一种离子浓度超过血中的离子浓度的盐溶液。一般而言，在制备本发明的高渗溶液中所用的盐的数量从约1.5%到约5%(按重量计)，最好为3.5%(按重量计)。
在制备高渗溶液中可以使用的盐包括碱金属化合物，以及碱土金属化合物。优选的盐包括氯化钠、氯化钾、硫酸镁、氯化镁、以及氯化钙。已发现，氯化钠的毒性最小，价格最便宜，并且口感最好。
高渗溶液还可包括一种刺激唾液分泌的化合物或成分。我们发现，能够刺激唾液分泌的化合物具有酸味。这些化合物包括弱有机酸。在弱有机酸当中优选的是柠檬酸、抗坏血酸、醋酸。使用柠檬酸和抗坏血酸的最佳浓度在约0.05%和0.5%(按重量计)之间。醋酸的最佳范围在约0.5%和3.0%(按重量计)之间。
为了将收集到的试样变质的可能性降至最小，高渗溶液中可以包括防腐剂。这样一种防腐剂的作用是抑制蛋白分解酶的活动，这种酶的活动可能导致抗体分子破坏。期望用作防腐剂的化合物包括抗细菌剂、抗真菌剂、制菌剂、制真菌剂、以及酶抑制剂。在优选实施例中，用苯甲酸、山梨酸或它们的盐作抗真菌剂。作为制菌剂，期望使用高浓度的盐和在低pH值下能维持高渗溶液的化合物。这样的盐包括乙基汞硫代水杨酸钠(或硫柳汞)、乙酸苯汞、硝酸苯汞、以及叠氮化钠。其它的优选防腐剂包括在药品中和漱口药品中通常使用的那些防腐剂。例如乙醇和洗必太葡萄糖酸盐。另一种类型的优选抗微生物和抗病毒剂是可以用作局部杀菌剂使用的或在漱口药品中使用的去污剂，例如氯化苄烷铵。使用这些防腐剂的范围最好为约0.01%到约0.2%(按重量计)。
通过现有的方法用高渗溶液将吸垫浸透。将本发明的高渗溶液加到吸垫上的方法可以是把吸垫浸渍入盐的高渗溶液中，从而把溶液中的盐吸收在吸垫中和吸垫上，将吸垫从溶液中取出并使其干燥。一般来说，如果将吸垫浸入高渗溶液中，能吸收大约1ml(毫升)该溶液。另外，可以将高渗溶液喷洒到吸垫上，直到吸垫吸收到足够数量(最好1ml左右)的溶液时为止。将吸垫上的多余液体摇晃掉，然后将吸垫放入50℃的强制空气对流烘箱中两个小时，或者在没有强制空气存在的情况下，放入80℃的烘箱6-12小时。烘干后，即形成了一个包含盐的高渗溶液的、经过特殊处理的吸垫。在垫的制备过程中最好使用下述的盐作为防腐剂氯化苄烷铵、氯化乙酰吡啶、或洗必太葡萄糖酸盐。
可以制作吸垫的大多数材料都可能以非特定的方式结合束缚住蛋白质。因此，免疫球蛋白就可能结合到吸垫上，这是不期望的;期望通过使用保护剂阻止蛋白质向吸垫的结合。由于血液包含它自己的保护剂(即，人血清白蛋白)，因此在血样收集中的非特定结合一般不成问题。
为了在口液样品收集中减少非特定的结合，可在高渗溶液中加入保护剂，从而即将保护剂加到吸垫内。保护剂一般是一种可溶性蛋白，用它来防止另一种蛋白对固体表面的非特定结合。可作为保护剂加入的化合物包括白蛋白和明胶，但任何一种可溶于水的无毒蛋白都可用作保护剂，条件是这种蛋白对要采用的测定没有不利的影响。最好使用牛明胶。一般来说，加到本发明的高渗溶液的保护剂的浓度在约0.01%和0.2%(按重量)之间。然后按以上所述将高渗溶液中所含的组分加到吸垫上。
在制备吸垫时使用的优选溶液的组成如下组分浓度(%,按重量)氯化钠3.5%柠檬酸0.3%苯甲酸钠0.1%山梨酸钾0.1%牛明胶0.1%蒸馏水加入0.1N氢氧化钠将pH值增加到6.5左右现在再次参照图1A和1B。针筒12确定了一个内壁24;内壁24在长度方向上能接纳吸垫和柱塞垫(如图2A所示)，并且在直径方向上能紧凑地容纳垫15，从而在它们之间形成一个不漏流体的密封。针筒12有一个凸出的或径向加大的开口26，便于在收集口液后将吸垫放入针筒内。在针筒的相对的内端设置一个烧结板28，它的作用是一个可透过液体的过滤器，当迫使柱塞进入针筒时，允许吸垫中吸收的口液通过，从针筒排出。位于针筒端部的出口30提供接纳试剂管13的插口。在不包括试剂管13的设备的实施例中，针筒的出口端像标准的注射器结构那样，可以逐渐变细，形成一个窄细的出口。注射器在这里也指的是提取已吸收进吸垫中的口液的装置。
按本发明的柱塞-吸垫机构以及针筒的典型尺寸是柱塞11的长度，包括密封垫15的长度在内，约为3英寸，直径约为0.12英寸;吸垫10的长度约为1.5英寸，直径约为0.375英寸。如果使用软像胶密封垫，那么0.5英寸直径和约0.25英寸长度的密封垫适于在内径约为0.4375英寸的针筒内形成不漏液体的密封。
试剂管13包括一个环形接头32，接头32紧配合卡入针筒的插口内，从而把试剂管13牢固地固定在针筒上。为穿过该室的内部通道33提供一个试剂盘34，盘34用检测试剂(一种或多种)浸透，当通过试剂管排出口液时，这些检测试剂最好作为溶解物组分排入口液中。如下面将要讨论的，试剂(一种或多种)用于检测口液中选定的分析物(一种或多种)。此外，试剂(一种或多种)可以包括适用于某些类型的固相测定中的保护剂，例如明胶、奶酪蛋白、或牛血清白蛋白，对此，下面还要讨论。在一个实施例中，报告信息标记物的抗体或抗原在含有0.5%明胶和30%蔗糖(当口液通过试剂管时，为了便利于溶解蛋白)的水溶液中溶解浓度为几个mgs/ml。试剂管中的试剂盘夹在位于试剂管小室内的两个可透过液体的烧结板35和36之间。
在图3A和3B中表示出试剂管和针筒的另一些实施例。例如如图3A所示，针孔出口38可以是一个插入(LuerTM)连接件39，用于连接试剂管42中的相应的承接连接件40。试剂管包括一个浸透检测试剂(一种或多种)的刚性烧结板44。图3B中表示出一个类似的装置，只是针筒出口48的插入连接件46(LuerTM)直接凹入针筒的主体中。图3B还表示出一个针筒结构，其中的针筒的内壁朝向它的出口端逐渐变细，以便在压挤吸垫时减少针筒中剩余的口液数量。
试剂管中的条带50是一个可以弄湿的试剂条，当它被通过针筒的口液弄湿时，在口液中存在分析物的情况下，条带50产生可检测出来的颜色变化。使用已知的酶可以检测出分析物(例如葡萄糖)，这些酶例如是和过氧化物酶系统耦合在一起的葡萄糖氧化酶，它能在H2O2存在的情况下有效地产生可检测到的颜色变化。在图1-3所示的每一个试剂管实施例中，一个内部室确定一个通路，例如试剂室13中的内部通路33，该通路可以包含检测试剂(一种或多种)或试剂装置，当口液自针筒排出时检测试剂被排入口液中(图1和2)，或者与通过该通路的口液有效地进行混合(图3)。
另一方面，可以把包含检测试测的通路包含在针筒的出口端内，例如沿针筒出口的侧壁，因此就不需要单独的试剂管了。
为了用收集器(例如图1A和1B所示的设备)收集口腔中的物质，将柱塞-吸垫机构放入患者口中，以便让吸垫整体都处在口中。在下颊和牙龈之间放置吸垫便于吸附来源于龈淋巴组织的分泌物、以及来自粘膜下层淋巴组织和唾液腺淋巴组织的分泌物。在收集样品时，最好在牙龈之间来回擦抹吸垫10秒钟左右，然后吸垫定位不动约30秒到2分钟。在吸垫浸透口液后，将吸垫从口中抽出，然后将柱塞-吸垫机构放入针筒内，先放吸垫端部，以便可以自吸垫提取口液。
可将口液贮存起来，晚些时间再来分析，口液最好贮存在适当的防腐液中。另外，口液可与检测试剂(一种或多种)混合起来，或者直接排出(没有经过试剂检测)，或者在一个固相检测设备上与检测试剂混合后再排出，这将在下面的B段中进行描述。
另外，可以通过溶液均相测定法测定口液分析物来设计引入口液中的试剂。例如在检测口液中存在的抗原-特异抗体中使用的测定可以依据各种均相测定格式，例如依据耦合的酶、荧光的猝灭、或EMIT结构(Gosling，J.，ClinChem，36(8)1408(1990))。另外，该测定可能涉及到口液中分析物的免疫沉淀作用，从而产生一种可检测到的凝集产物，例如包有免疫沉淀素的彩色小球。
如前所述可以理解到本发明的各个目的和特征是如何满足的。该器械对于医院、诊所、甚至家用都是很方便的，口液样品的收集很容易，并且可立即测定。由于柱塞-吸垫机构在样品收集后可插入针筒中，可以放在和包裹在针筒里。因此该设备可减少样品接触使用者的危险。
B.口液测定装置按本发明另一方面，包括一个检测口液中试验物质的装置。该装置一般包括一个上述类型的吸垫针筒机构和一个适于接纳吸垫排出的口液的检测单元。该检测单元有一个包含在检测单元中的固相载体和一种附着到该载体上的结合剂，当口液自针筒排入该单元时，该结合剂能有效地专门结合到口液中的实验物质上。然后通过结合到载体上的分析物的数量确定口液中的分析物如抗原、或免疫球蛋白浓度。在一个实施例中，该装置如在上述A段中所述，包括一个通路，该通路包含检测试剂(一种或多种)，(a)当口液自针筒排出时该试剂能有效地被排放，并且(b)该试剂包括一种或多种试剂组分，这些组分是产生可检测到的固相结合反应所必须的，其中包括结合到固相表面的分析物。
测定形式的选择取决于测定的试验物质。这种试验物质包括各种免疫反应分析物，例如药和药的代谢产物，如可卡因或尼古丁或它们的代谢产物，以及病毒和细菌抗原如乙型肝炎表面抗原、免疫球蛋白、特别是IgG和IgM、还有激素，如β-HCG。吸收或共价地结合选定的结合剂到固相载体上的方法是众所周知的，该方法包括将生物微型(biotinylated)蛋白(例如卵白蛋白)吸附到膜上，随后以抗生蛋白链菌素衍化形式附着结合剂，通过特定的例如抵抗将要结合的抗体的Fc部分的抗体将抗体附着到载体上，以及例如使用各种可得到的双功能耦合试剂共价结合到膜上的表面可衍化基团上。
图4和5表示按本发明的测定装置的两个实施例。在这两个图中都表示出注射器收集设备52的下部，其中包括注射器54和试剂管56。该收集设备的结构和上述A段中描述的结构相同。在图4的实施例中，检测单元(用60表示)可以连接到试剂管上，用于接纳自试剂管排出的口液。试剂管可以包含检测试剂(一种或多种)，例如报告信息物标记的分子，它们能和结合到固相载体上的分析物分子进行有效地竞争。
单元60一般包括具有入口63的外壳62，此入口可连接到试剂管的出口侧并与该出口侧液体连通，如图所示。一个固相载体或膜64固定在该外壳内，其位置适于容纳自注射器设备排出的口液。在手风琴状的结构68中并在膜64的下方悬置一个吸垫66，以便在吸垫与膜的下侧接触时抽吸穿过膜的口液。
图5表示具有膜72的检测单元70，通过窗口74可以观察到膜72，膜72和窗口74都固定在外套75中。位于膜72下方的吸垫76通过使外套底部变形可与膜的下侧接触以便抽取穿过膜72的口液。
虽然图4和5所示的组合实施例中的检测单元可以固定到注射器设备上直接接纳来自注射器的口液，但本发明还期望有一种装置，其中的检测单元是一个独立的结构，例如通过在该单元中的膜上涂上口液和其它检测试剂的方式来接纳口液。
在图6A、6B和6C中表示出可以在该装置中使用的各种测定结构。在图6A中，一种试验物质80(一种抗体)是通过免疫特异结合到载体结合的抗原84上而被俘获在固相载体82上。然后俘获的分析物又可通过报告信息物标记的非人体抗体86进行检测。
图6B表示检测试验抗体90的固相载体88。通过在固相载体上携带的结合剂92(如蛋白A和非人体免疫球蛋白)将分析物抗体结合到固相膜上。通过与试验抗体发生免疫反应的标记报告信息的抗原94，可以对结合的分析物抗体进行检测。
图6C表示用于检测口液中抗原分析物98的固相载体96。在该单元中的结合剂是一种抗原特异的抗体100。用一种包含报告信息物标记的抗体(它与分析物上的第二表位发生免疫反应)的检测试剂可检测结合到该载体上的抗原-分析物。另一方面，该检测试剂可以是一种报告信息物标记的抗原，该抗原可与分析物抗原竞争，以便结合到固相载体的结合剂上。
按常规，上述检验试剂中的报告信息物是一种加入适当物质可检测到的酶，或者是一种荧光报告信息物。
对口液中的试验物质的测定可包括对一种标记物质的同时鉴定，下面对此将作进一步的描述。在使用本发明的固相载体表面对口液样品进行的典型鉴定中，试验物质是一种与HIV-1肽起免疫反应的抗体，标记物质是转铁蛋白。固相载体表面包括有附着到膜表面第一区的蛋白A，用于结合人的抗体，还包括有附着到膜表面第二区的抗转铁蛋白抗体，它对俘获转铁蛋白是有效的。为了检测HIV-1抗体和转铁蛋白，该测定包括HIV-1肽的辣根过氧化物共轭物，对它来说，试验HIV-1抗体是特异的，以及抗转铁蛋白抗体的辣根过氧化物共轭物，它可结合转铁蛋白，而不管第一抗转铁蛋白抗体是否也已结合到同一个转铁蛋白分子上)。第二抗转铁蛋白抗体最好来自于鸡，因为鸡抗体不结合蛋白A。可将报告信息物标记的试剂以干燥形式浸入试剂盘里，然后将试剂盘放入试剂管里。之后，将试剂管固定到本发明的口液收集器上。使用该设备从病人口里收集口液样品，从针筒并通过与其相接的试剂管挤出口液。当口液通过试剂管时，报告信息物标记的试剂被口液吸收，并被溶解在口液中，从而产生试剂与相应的试验物质和标记物质的反应。试剂管出口的方向应使试剂/口液混合物供给到固相载体表面上。几滴(约300μl)这种混合物就应该是足够的了。让该混合物在固相载体表面上停留一段时间(约5分钟)，就足以让试验物质和标记物质结合到相应的检测试剂上，并结合到固相载体表面上的对应的结合区。然后，从该表面上除去该混合物。
在另一个实施例中，试验物质是一种“Helicobacterpylori”抗体，报告信息物标记的试剂是一种报告信息物标记的“Helicobacterpylori”抗原。
如果固相载体表面是上述本发明的测定装置的检测单元的一部分，那么去除该混合物的方法是让一个吸垫与抽取口液的固相载体的下侧接触。最后，将包含过氧化氢和辣根过氧化物酶的色原物质(在本例中是N-四甲联苯胺)的溶液送到该膜上。任何通过试验物质或标记物质结合到固相载体上的辣根过氧化物酶都能在过氧化物酶已经结合的区域产生带色的沉淀物。然后，从固相载体表面上产生的图案来确定标记物质和/或试验物质的存在。
按本发明的一个特殊方面，为了核实对试验物质的测定结果，要对总是存在于口液样品中的标记物质同时进行鉴定。检测样品中的这种标记物质能提供一种可靠的指示该样品包含口液。适宜的标记物质例如包括转铁蛋白、白蛋白、血浆铜蓝蛋白、和淀粉酶(参见“HumanSaliva”ClinicalChemstryandMicrobiology，vols.ⅠandⅡ，Tenovuo，J.O.，Ed.，CRCPress，BocaRaton，Florida(1989)]。当试验物质也是由血液衍生时(例如IgG)，由血液衍生的标记物质(例如白蛋白和转铁蛋白)是非常有用的。
最好使用一个测定装置来测定试验物质和标记物质这两者，在该装置中固相载体包括一个平直表面。固相载体最好是一种微孔膜，制造该膜的材料例如可以是硝化纤维或聚碘乙烯二氟化物。将分别对应于试验物质和标记物质的第一和第二结合剂定位在至少部分不同的(不重叠的)表面区域，从而即可区分结合到固相载体表面上的试验物质和标记物质。通过共价的方式和非共价的方式结合这样一些结合剂的方法在本领域中都是众所周知的。最好形成这些区域时可产生出可识别的图案，一看就能轻易取得测定结果。
尽管前述的实例描述了使用辣根过氧化物酶作为报告信息物的情况，但应认识到，还可以使用其它的酶以及非酶的报告信息物。虽然使用相同的报告信息物是方便的，但用来检测试验物质的报告信息物不必与用来检测标记物质的报告信息物相同。此外，还可采用其它的结合方式。例如，在对口液中乙型肝炎表面抗原的鉴定中，在固相载体上的结合剂可以是与该抗原进行免疫反应的第一抗体，检测试剂可以是报告信息物标记的第二抗体。
图7表示出传达测定结果的一个典型的固相载体的表面图案。图中的条形区104和106是固相载体108中由结合剂衍化或处理过的区域，这些结合剂与所选的口液标记物(例如转铁蛋白)和所选的口液分析物(例如抗原特异的分析物)分别是免疫特异性的或是说起反应的。如图所示，两个区域被排列成一个“+”形的符号。可以认识到，若在标记物区104中显色但在分析物区106不显色，则产生一个图案“-”，这表明样品液体中含有口液标记物但不含要试验的分析物。当这样的分析物存在时，可观察到符号“+”。
虽然针对特殊实施例描述了本发明，但应该认识到，在不脱离本发明的情况下还可以进行各种变化和改进。
权利要求
1.一种用于获得包含试验物质在内的口液的器械，其特征是包括一个吸垫，用于从口液回收一种试验物质；用于从吸垫提取已吸收到吸垫内的口液的机构，其中所说的机构包括一个由针筒和一个具有内端的柱塞组成的注射器，吸垫固定到该内端上。
2.如权利要求1所述的器械，其特征是所说的吸垫用盐的高渗溶液浸透。
3.如权利要求2所述的器械，其特征是该试验物质是一种抗体，该高渗溶液包括约3.5%氯化钠、约0.3柠檬酸、约0.1%山梨酸钾、约0.1%苯甲酸钠、以及约0.1%牛明胶。
4.如权利要求1所述的器械，其特征是其中针筒有一个容纳柱塞的径向加大的开口。
5.如权利要求1所述的器械，其特征是进一步还包括位于针筒出口端的一个液体通路，并且进一步还包括包含在所说通路中的一个检测试剂装置，当口液自针筒排出时，该检测试剂能有效地排放到口液内。
6.如权利要求5所述的器械，其特征是其中的液体通路由一个试剂管确定，该试剂管按可拆卸的方式安装在针筒上。
7.如权利要求5所述的器械，其特征是其中的试剂装置包含试剂，该试剂能与口液中的试验物质进行有效的反应，产生可检测到的颜色变化。
8.如权利要求5所述的器械，其特征是其中的检测试剂装置包含试剂，该试剂能与口液中的试验物质进行有效反应，并能有效地凝集该试验物质，产生可检测到的沉淀物。
9.如权利要求5所述的器械，其特征是进一步包括与液体通路成液体连通的吸收条带，所说条带包含有检测试剂，当口液中存在试验物质并且该条带被口液弄湿时，该条带能有效地产生可检测到的颜色变化。
10.一种检测口液中试验物质的装置，其特征是包括一个吸垫，用于从口液中回收试验物质，一个注射器，由针筒和柱塞组成，柱塞有一个内端，吸垫固定到该内端上，以便从吸垫上提取已经吸收在吸垫内的口液;以及一个检测单元，适于接纳从吸垫排出的口液，所说单元有一个固相载体，该固相载体包含在该检测单元中，所说单元还有一种结合剂，结合剂附着到固相载体上，当口液自针筒排入该单元时，该结合剂能有效地专门结合到口液中的试验物质上。
11.如权利要求10所述的装置，其特征是所说吸垫用盐的高渗溶液浸透，在吸垫中存在的所说盐的数量应能从口液中回收高浓度的试验物质。
12.如权利要求10所述的装置，其特征是其中试验物质是一种抗体，该抗体是一种被已知病原感染的诊断，该结合剂是一种能与这样一种抗体发生免疫反应的抗原，该装置进一步包括一种报告信息物标记的试剂，当试验物质抗体结合到该固相载体上时，该试剂能有效地结合到该试验物质抗体上。
13.如权利要求10所述的装置，其特征是其中试验物质是一种抗体，该抗体是一种被已知病原感染的诊断，结合剂对有选择地结合人的抗体是有效的，并且该装置进一步包括一个报告信息物标记的抗原，该抗原能与试验物质抗体发生免疫反应。
14.如权利要求12所述的装置，其特征是其中的结合剂是蛋白A。
15.如权利要求13所述的装置，其特征是试验物质是HIV-1抗体，报告信息物标记的试剂是报告信息物标记的HIV-1肽。
16.如权利要求13所述的装置，其特征是试验物质是Helicobactor抗体，报告信息物标记的试剂是报告信息物标记的Helicobacterpylori抗原。
17.如权利要求10所述的装置，其特征是它包括一个通路连接着与检测单元成液体连通的针筒，并且所说通路包含有检测试剂装置，当口液自针筒排出时，该检测试剂能有效地排入口液中。
18.如权利要求17所述的装置，其特征是所说的通路由一个试剂管确定，该试剂管按可拆卸方式连接到所说针筒和检测单元上。
19.如权利要求17所述的装置，其特征是检测试剂装置包含一种试剂，该试剂能有效地与口液中的试验物质发生反应，从而产生一定水平的试验物质与固相载体的结合，结合的水平取决于口液中试验物质的浓度。
20.如权利要求10所述的装置，其特征是其中的固相载体是一个可透过的膜，并且检测单元进一步包括可与膜接触的吸附材料。
21.如权利要求10所述的装置，其特征是对口液样品中的试验物质和标记物质进行同时测定，其中的固相载体是一个膜，该膜包括一个第一膜区，一种第一结合剂附着到该第一膜区，第一结合剂能有效地专门结合到口液中的试验物质上;一个第二膜区，一种第二结合剂附着到该第二膜区，第二结合剂能有效地专门地结合到口液中的标记物质上，该第二膜区与第一膜区至少部分地不重叠;用于观察结合到所说第一膜区的试验物质的装置;以及用于观察结合到所说第二膜区的标记物质的装置;因此，包含标记物质但不包含试验物质的口液将在固相载体表面上产生一种图案，这种图案和由包含标记物质并包含试验物质的口液产生的图案有所区别。
22.一种固相载体表面，用于对口液中的试验物质和标记物质进行同时测定，其特征是它包括一个第一区，一种第一结合剂附着到该第一区，第一结合剂能有效地专门结合到口液中的试验物质上;一个第二区，一种第二结合剂附着到该第二区，第二结合剂能有效地专门结合到口液中的标记物质上，该第二区与第一区至少部分地不重叠;用于观察结合到所说第一区的试验物质的装置;以及用于观察结合到所说第二区的标记物质的装置;因此，包含标记物质但不包含试验物质的口液将在固相载体表面上产生一种图案，这种图案和由包含标记物质并包含试验物质的口液产生的图案有所不同。
23.如权利要求22所述的固相载体表面，其特征是所说的第一和第二区是条形的，并且重叠起来形成符号“+”。
全文摘要
一种用于获得包含试验物质在内的口液的器械。在一个实施例中，该器械包括带有柱塞的一个注射器，在柱塞的端部固定一个吸垫。还公开了一种包含该器械的试验装置。
文档编号G01N33/50GK1084045SQ9310974
公开日1994年3月23日 申请日期1993年8月24日 优先权日1992年8月25日
发明者T·R·蒂米, A·S·戈斯坦恩, S·C·皮亚仙蒂尼 申请人:艾皮托普有限公司