专利名称：中草药提取物的制作方法
技术领域：
本发明涉及源于传统中草药的物质和含有该物质的药物组合物，该药物组合物可用于反应特异性疾病尤其是反应特异性湿疹的治疗和其他皮肤病如非反应特异性湿疹和牛皮癣的治疗。
我们应当把术语中草药理解为传统医师常用但不限定为中国人所使用的任何一种草。
传统中医的医师是采用完全不同于西医的解剖和诊断体系治疗疾病的。处方药物一般是多种中草药，采用煎剂的传统方法即用水煎煮这些草药把它们进行制备用于给药。去掉这些草药并把保留的水溶液给适当的患者进行口服、肠胃外或局部给药。
用于这类治疗的处方需要把十味或更多味草药组合使用并且传统中医教导所有这些草药都是为达到平衡的处方所必需的。一个被视为平衡的完整处方包括了在治疗疾病的不同表现和症状中起不同功效的草药体系。
对人类的任何特殊疾病具有可接受的临床活性同时毒性较低的草药的鉴别早已在许多年里通过观察和试验所完成并纠正。在一些时候，传统中草药的处方能够有效治疗采用西医单一疗法所不能治愈的疾病。
对使用多种中草药似乎有反应的疾病是那些起因模糊并复杂的疾病。一个特殊的例子是反应特异性湿疹，它是由仅有一些是已知的许多不同的传递质所引起并维持的皮肤慢性炎症。一些涉及到抗原抗体反应。人们还怀疑但没有确定许多其他因素。能够与特异性炎症传递质反应的单一治疗剂象非甾类抗炎药物只对几种反应特异性湿疹有效。另一方面，皮质甾类具有多种药效作用并对湿疹有效。所以好象是几种反应特异性湿疹的治疗需要连续攻击细胞和体液中的许多可能与免疫过程有关的病理损伤。尽管皮质甾类和一些免疫抑制剂具有这类进攻所需的广谱活性，但是由于它们的毒性，使其使用受到限制。已知治疗湿疹的传统中草药药物似乎具有皮质甾类和免疫抑制剂的必需活性但没有它们的副作用。
含有选自于下列用它们的药材名所命名的各种草药及其拼音等同物中的一种的中草药处方已经用于有效治疗反应特异性湿疹和牛皮癣防风、蒺藜、委陵菜、川木通、地黄、甘草、赤芍、白鲜皮、淡竹叶和荆芥穗。Sheehan等在British Journal of Dermatology(1992)126第179-184页中描述了这类处方对患有反应特异性湿疹的儿童的临床效果，Sheehan等在The Lancet(1992)7月第4期第13-17页还描述了这类处方对患有反应特异性湿疹的成人的临床效果。在GB-A-2254783中描述了用于治疗反应特异性湿疹和其他皮肤炎症疾病相同10味草药的提取物的特殊制备方法。
尽管已知上述10味草药煎剂是有效的，由于使用含有多种草药的复杂处方是昂贵的，所以理想的是简化处方又不妨碍该处方的活性和/或安全性。也优选的是把任何处方限定在可能在英国或欧洲生长的而不是从中国进口的草药。所以已作过许多尝试来鉴别活性组分或传统中药处方中的组分。尽管如此，因为至今为止没有用于确认从原草药中制得的馏分或纯物质对该疾病的临床活性的有效动物或体外模型，所以对湿疹来说证实这一点很困难的。
尽管如此，现在已经开发了一种体外试验法，该试验法似乎可以预测反应特异性湿疹和其他反应特异性疾病的临床效果并使本发明人测定出了上述所列的10味草药的冷冻干燥煎剂(本文以后称作PSE222)中的活性成分。
尽管传统中医要求多种草药是必需的，但是使用这种体外方法并用体内临床试验确认已经表明用这10味草药的子集和它们之中的单一组分能够再现理想的临床效果。而且，该方法也已经用于PSE222中成分的证实，即其中有的PSE222成分可以引发反应特异条件的恶化因而希望从任何药用提取物中除去这样的成份。
药效的体外试验主要是观察在反应特异性疾病并且尤其是反应特异性湿疹中人外周血液中的皮肤细胞和单核细胞表达细胞表面标记抗原CD23和一旦成功治疗湿疹抑制或减少CD23的表达。(参见Takigawa等，Clin.Exp.Immunol.(1991)84第275-282页)。通过把人单核细胞暴露给细胞因子白介素-4(IL4)也能诱发体内人单核细胞中的CD23的表达并用治疗反应特异性疾病的已知化合物抑制Takigawa上述介绍所述的体内状态作平行对照。所以这些观察提供了简单体内试验法的基础，在该试验中把人外周血液中制得的单核细胞与IL4和被试验的活性剂连续接触。使用标记的CD23单克隆抗体测量CD23的表达量并且把用CD23表达的抑制百分比表达的任何作用与对照组进行比较，其中对照组中盐水或草药的安慰剂替代了试验物质。已经在临床上成功用于反应特异性湿疹的由上述所列的10味草药制得的提取物PSE222在试验中对CD23的表达具有50-60％的抑制的事实证实了体内试验中CD23表达的显著性抑制是可预测的临床效果。
使用上述试验方法，本发明人已经鉴别出PSE222中适合于在反应特异性疾病一般临床使用和也适合于治疗特殊皮肤病如非反应特异性湿疹和牛皮癣的成分。
所以本发明的一方面是提供一种适合于治疗反应特异性疾病、非反应特异性湿疹或牛皮癣的物质，它能够从含有下列中草药的混合物的冷冻干燥煎剂中提取出来防 风蒺 藜委陵菜川木通地 黄甘 草赤 芍白鲜皮淡竹叶荆芥穗该物质含有存在于该冷冻干燥煎剂中的一种或多种成分，如果用水溶液稀释该冷冻干燥的煎剂并将其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纤维素试纸上使用比例为4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶剂进行色谱层析10小时，这些成分会具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范围内的Rf值。
该物质最好是含有存在于该冷冻干燥煎剂中的Rf值在0.00到0.100范围内的一种或多种成分。
当溶剂前沿已跑到30cm处后，把该纤维素试纸经过水提取，用水提取出的那些Rf值几乎都在上述给定的范围内的成分能够与IL4一起引起体内治疗的人单核细胞中的CD23抗原的显著性降低。如果接着用甲醇提取该纤维素试纸，甲醇提取物中Rf值几乎都在0.700到0.833或0.900到0.967范围内的那些成分也能够引起体内CD23表达的显著性下降.
而且惊奇地发现，在水提取和甲醇提取纤维素试纸之后，甲醇提取物中的具有Rf值0.067到0.333和0.533到0.700范围内的那些成分在CD23试验法试验时比对照组促进或增加了CD23抗原的表达。在治疗反应特异性或非反应特异性湿疹或其他反应特异性疾病的任何制剂中存在“促进剂”的活性都是明显不理想的，预计一旦将其除去就会改善临床活性.用一种非极性溶剂如己烷提取PSE222或上述所列10味草药的其他制剂可以除去显著量的“促进剂”活性。
所以本发明的第二方面提供了一种治疗反应特异性疾病、非反应特异性湿疹或牛皮癣的物质，它含有上述所列的10味草药混合物的煎剂或提取物，其中除去了可被己烷或其他非极性溶剂提取出来的那些成分。这样处理的煎剂或其他非极性溶剂在可暗示潜在临床效果的上述体外试验法中证实显著性地抑制了人单核细胞的CD23的表达。
现已证实上述所列的10味单一草药的煎剂具有体外抑制CD23表达的能力并且这样就能够鉴别预测具有好临床效果的草药子集。
本发明的第三方面提供了一种治疗反应特异性疾病、非反应特异性湿疹或牛皮癣的物质，它含有一种或多种下列中草药组的煎剂或提取物(a) 赤 芍甘 草地 黄(b) 白鲜皮赤 芍甘 草地 黄防 风蒺 藜或(c)赤 芍甘 草荆芥穗其中几乎不存在其他任何中草药。优选这样处理这类煎剂或提取物从而除去己烷或其他非极性溶剂可提取的那些成分。在上述(a)和(c)的特定草药组有这样的优点即所用的全部草药都能在欧洲生长。
本发明的第三方面提供了一种治疗反应特异性疾病、非反应特异性湿疹或牛皮癣的物质，它含有一种或多种中草药白鲜皮、赤芍、地黄、甘草或荆芥穗而几乎不含其他中草药的煎剂或提取物。这类提取物或煎剂最好用一种非极性溶剂如己烷提取处理的。
把一种冷冻干燥的煎剂与商业上可得到的适当级别的纤维性纤维素接触，接着与一种适当溶剂如上述的丁醇/乙醇/水的混合物或比例为4∶1∶1的丁醇/IMS/水的混合物混合来除去大量的非活性物质就可以实现PSE222活性成分的商业规模化生产。然后把该混合物离心分离得到一种沉淀物，在干燥之前用上述溶剂混合物再提取几次并与水混合提取作为药物制剂配方的活性成分。
无论是还是不是用上述商业方法生产的本发明第一方面、第二方面、第三方面和第四方面的物质都优选与任何本领域所熟知的许多适当的药物载体或稀释剂混合制成药物组合物。适合于治疗常规反应特异性疾病尤其是反应特异性湿疹或适合于治疗非反应特异性湿疹或牛皮癣的组合物可以配制成口服、局部或胃肠外给药的制剂。口服剂型可以制备成单位剂型如片剂、粉剂和颗粒剂或者也可以是一种饮用的液体制剂。
应当理解到上述体外试验法可用作任何不考虑地区或植物来源可能具有抗反应特异性湿疹和皮炎临床活性的化合物或制剂的鉴定方法。
所以，本发明的第五方面是提供一种指示化合物或制剂的抗反应特异性湿疹和皮炎临床活性的方法，它包括的步骤有(a)把白介素4(IL4)和试验活性的化合物或制剂同时或随后体外温育外周血的单核细胞，(b)测定该单核细胞上的细胞表面标记CD23的表达，和(c)通过比较该化合物或制剂存在或不存在时单核细胞Il4诱发的CD23表达的含量使用步骤(b)中获得的测定作为该化合物或制剂抗反应特异性湿疹和皮炎的潜在临床活性的指示。
抑制CD23表达大于25％是统计学上的显著性并表明是可以临床使用的化合物或制剂。
现在本发明对下列实施例和附图的注释进行描述，其中
图1a是使用反应特异性湿疹患者的单核细胞在PSE222(*)和安慰草药混合物(o)的试验中所用试验物质的浓度对CD14+23+单核细胞的百分比的曲线图。
图1b是表示图1a所示的相同数据的直方图，y轴上是抑制CD23表达的百分比。画有斜线阴影的柱表示PSE222数据，空柱表示安慰剂对照组。
图1c是如图1a一样显示PSE222对正常个体的单核细胞的CD23表达的作用的曲线图。
图1d是如图1b一样以直方图形式显示图1c的相同数据。
图2显示了用水从纤维素色谱层析试纸中提取的30个馏分分别对体外人单核细胞中CD23表达抑制的百分比。
图3显示了用甲醇从纤维素色谱层析试纸中提取的30个馏分分别对体外人单核细胞中CD23表达抑制的百分比，和图4显示了PSE222的己烷提取物对体外CD23表达的作用。
实施例1把总重量为38.8g的下列草药在300ml的水中慢慢煎煮一个半小时防 风蒺 藜委陵菜川木通地 黄甘 草赤 芍白鲜皮淡竹叶荆芥穗去掉草药，用煎煮法把煎剂浓缩到最终体积为50ml然后冷冻干燥。在冷冻干燥的提取物PSE222中，1克干燥的提取物包括可从大约5克草药中提取的水。
用上述相同方法制备不具有抗反应特异性湿疹的已知功效的“安慰”草药的煎剂。
在如下文所述进行CD23抑制试验法中检测PSE222和安慰煎剂的活性。
从自愿者收集血液放入肝素并在聚蔗糖梯度培养基上分散来分离外周血的单核细胞。然后在RPMI中把单核细胞与IL4和有或没有PSE222或安慰制剂培养一夜。之后，洗涤单核细胞并用荧光标记的抗单核细胞抗原CD14和CD23的单克隆抗体双重染色。CD14是一个有用的标识物，当它存在时证实了单核细胞的存在。用FACScan分析仪测定荧光的含量，该含量提供了单核细胞表达的CD23含量的指示。
在图1a到d显示了结果。正如图1a和1c所显示的，PSE222抑制来自反应特异性湿疹(1a)和正常个体(1c)的两种单核细胞中IL4诱发的CD23的表达。而且，该作用依赖于剂量并在PSE222和安慰剂治疗之间具有统计学意义的显著性差异(P＜0.001)。图1b和1d证实了在PSE222浓度低到0.125mg/ml时出现了对反应特异性湿疹患者的单核细胞的具有统计学意义的显著性抑制CD23大约25到30％。在来自正常患者的单核细胞情况下直到PSE222浓度大约0.25mg/ml也不出现具有统计学意义的显著性抑制。
在上述结果的基础上，把25和30％之间抑制CD23表达的百分比用作评价和预测其他试验制剂临床活性的标准。在几个反应特异性湿疹患者中进行的临床研究里，已表明PSE222制剂而不是安慰制剂在2/3到3/4的患者中湿疹的程度降低了60-80％。这结果具有统计学的显著性(p＝0.01)。实施例2采用实施例1中所述的方法制备下文表1所列的单个草药煎剂并从各个草药中制备干燥的提取物。也如实施例1所述，测试1mg量的各个提取物(相当于5mg的原草药并稀释到等同于PSE222制剂中的浓度)体外抑制CD23的表达。下列表1显示了结果，所给出的各个值表示5次试验的平均值。
表I浓度草药/组分CD23/CD14的抑制率mg/ml ％IL4(对照组，基准) 01(a)IL4+PSE222 55.82(b)IL4+安慰草药3.40.12 (c)白鲜皮 43.60.11 (d)赤芍48.00.05 (e)甘草47.00.30 (f)地黄20.50.07 (g)防风3.00.06 (h)蒺藜4.60.08 (i)委陵菜 6.60.03 (j)川木通 16.00.04 (k)荆芥穗 43.60.15 (l)淡竹叶 16.6测定上述表1中所列的草药(c)到(l)的特定子集的临床效果并在表2中显示结果。
表II草药子集临床效果统计学的显著性a (PSE222) ++++p＜0.01e ±d，e，f +++c，d，e，f，g，h++ p＜0.05d，e，k +++ p＜0.05注++++下降大于总湿疹范围的70％+++下降总湿疹范围的60-70％++下降小于总湿疹范围的60％+没有稳定的改善。
对草药(e)甘草来说，已知是局部使用时具有一些临床活性的一种成分，但由于它大剂量口服时有类甾体副作用如电解质紊乱而不能单独使用。
表I和表II所给出的结果证实对CD23的体外抑制大大预测了对反应特异性湿疹的临床效果。实施例3把75mg的PSE222加入RPMI1640温育培养基并使体积为10ml，在37℃不时搅拌下温育并离心分离除去细粉和其他残渣。把500ul所得到的溶液的1∶10的稀释液装到Whatman 3mm×2cm×55cm的纤维素试纸上。把试纸的装载端放入比例为4∶1∶1的丁醇/乙醇/水的混合物中并使溶剂通过毛细作用移动10小时，这段时间之后溶剂前沿已经移动到大约30cm处。使试纸干燥一夜，然后剪成2×1cm的碎片。把这些碎片分别用20ul/cm2的水洗脱并把洗脱液蒸干，再悬浮于500ul用于CD23试验法试验的RPMI1640温育培养基中。制备全部29种馏分，图2显示了这些馏分的每种以及全部的PSE222和安慰草药对CD23的抑制活性。把对应于溶剂前沿的试纸30用作CD23表达试验法的内部对照。
正如从图2中所看到的，特别在馏分A0(起点)，然后在馏分数对应于距起点的厘米数的馏分1，3，6，7，8，14，15，21，25和29发现抑制活性的峰。这些馏分分别对应的Rf值是0.00，0.033，0.100，0.200，0.233，0.267，0.467，0.500，0.900，0.833和0.967。
用水洗脱2×1cm的碎片并如上所述测定了洗脱液后，干燥该碎片，然后用20ul/cm2的甲醇洗脱。再把洗脱液蒸干并再悬浮于500ul用于CD23试验法试验的RPMI 1640温育培养基中。图3显示了甲醇提取的各馏分对CD23的抑制活性的程度。在对应的Rf值是0.833，0.900和0.967的馏分25，27和29中发现抑制活性的显著峰。
在图2和3中所示的活性馏分的成分适合用于治疗反应特异性湿疹和其他反应特异性疾病以及牛皮癣的药物组合物。
令人感兴趣的是，在CD23试验法的测试中如上所述的Rf值的范围分别对应于0.067到0.300和0.533到0.700的馏分2到9和16到21的先水后甲醇的提取物显著性地促进而不是抑制CD23的表达。实施例4用己烷提取如实施例1中所制备的PSE222的溶液。把己烷馏分蒸干如上再悬浮并在CD23试验法中测试。该己烷提取物比对照组显著性地增加了CD23的表达。但是，随后己烷提取过的PSE222的水提物显示出所预料的对CD23表达的抑制。图4显示了该结果。
该实施例证实了用一种非极性溶剂提取任何PSE222的10位草药来从任何潜在的药物组合物中除去不需要的成分的用途。实施例5把1g如实施例1中所述的提取物的冷冻干燥细粉与10g纤维状的纤维素完全混合。Sigma纤维素#6663是一种适当的级别。向该纤维素的混合物中加入70ml比例为4∶1∶1的丁醇∶甲基化的工业酒精∶水(BIW)的混合物并搅拌10分钟。把该混合物进行离心分离(在6,000rpm5分钟)。把沉淀物用30ml的BIW再悬浮并再离心分离。重复这种操作并在60-70℃的真空烘箱中干燥沉淀物。
然后用蒸馏水再悬浮该干燥的纤维素混合物，搅拌10分钟并离心分离。然后再用3倍量的水洗涤该沉淀物并离心分离，汇集上清液。把合在一起的上清液蒸干得到大约20mg的棕色固体。
当把该物质与赋型剂配制，填入胶囊，压成片或溶于一种药学可接受的载体中时，该物质可适用于治疗患有一些反应特异性湿疹的病人。上述实施例提供了商业规模化生产PSE222为活性成分的药物制剂的方法。
权利要求
1.一种适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性的湿疹或牛皮癣的物质，该物质能够从冷冻干燥的含有下列中草药的混合物的煎剂中提取出来防风蒺藜委陵菜川木通地黄甘草赤芍白鲜皮淡竹叶荆芥穗该物质含有存在于该冷冻干燥的煎剂中的一种或多种成分，如果用水溶液稀释该冷冻干燥的煎剂并将其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纤维素试纸上使用比例为4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶剂进行色谱层析10小时，这些成分会具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范围内的Rf值。
2.根据权利要求1的物质，它含有一种或多种存在于该冷冻干燥的煎剂中的Rf值在0.00到0.100范围内的成分。
3.根据权利要求1的物质，它含有一种或多种Rf值在0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范围内的成分，这些成分能够用水从该色谱层析试纸中提取出来。
4.根据权利要求1或权利要求3的物质，它含有一种或多种Rf值在0.700到0.833或0.900到0.967范围内的成分，这些成分能够用甲醇从该色谱层析试纸中提取出来。
5.根据上述任何一个权利要求中的物质，其中的冷冻干燥煎剂已除去了可用己烷或其他非极性溶剂提取的那些成分。
6.根据上述任何一个权利要求中的物质，其中在色谱层析试纸上的Rf值在0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范围内的成份能够抑制用白介素4激发的人单核细胞上CD23抗原的体外表达。
7.根据上述任何一个权利要求中的物质，其中该物质适合治疗反应特异性或非反应特异性的湿疹。
8.上述权利要求1到7中的任何一种物质在生产治疗反应特异性疾病、非反应特异性的湿疹或牛皮癣的药剂中的用途。
9.根据权利要求8的用途，其中的药剂是用来治疗反应特异性或非反应特异性的湿疹。
10.一种治疗反应特异性疾病、非反应特异性的湿疹或牛皮癣的药物组合物，它含有权利要求1到7中的任何一种物质和一种药学可接收的载体或稀释剂。
11.权利要求10的药物组合物可配制成用于口服、胃肠外或局部给药的制剂。
12.一种适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性的湿疹或牛皮癣的物质，它含有下列中草药混合物的一种煎剂或提取物防风蒺藜委陵菜川木通地黄甘草赤芍白鲜皮淡竹叶荆芥穗并且该煎剂或提取物已除去了可用己烷或其他非极性溶剂提取的那些成分。
13.一种适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性的湿疹或牛皮癣的物质，它含有下列一种或多种中草药而几乎没有其他中草药的一种煎剂或提取物白鲜皮赤芍地黄荆芥穗甘草。
14.一种适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性的湿疹或牛皮癣的物质，它含有一种或多种下列中草药组而几乎不含其他中草药的一种煎剂或提取物(a)赤 芍甘 草地 黄(b)白鲜皮赤 芍甘 草地 黄防 风蒺 藜或(c)赤 芍甘 草荆芥穗。
15.根据权利要求13或权利要求14的物质，它已除去了可用己烷或其他非极性溶剂提取的那些成分。
16.根据权利要求13到15的任何一种物质，它能够抑制用白介素4激发的人单核细胞上CD23抗原的体外表达。
17.权利要求12到16中的任何一种物质在生产治疗反应特异性疾病、非反应特异性的湿疹或牛皮癣的药剂中的用途。
18.一种治疗反应特异性疾病、非反应特异性的湿疹或牛皮癣的药物组合物，它含有权利要求12到16中所要求的任何一种物质和一种药学可接收的载体或稀释剂。
19.权利要求18的药物组合物可配制成用于口服、胃肠外或局部给药的制剂。
20.一种指示化合物或制剂的抗反应特异性湿疹和皮炎临床活性的方法，它包括的步骤有(a)把白介素4(IL4)和试验活性的化合物或制剂同时或随后体外温育外周血的单核细胞，(b)测定该单核细胞上的细胞表面标记CD23的表达，和(c)通过比较该化合物或制备物存在或不存在时单核细胞Il4诱发的CD23表达的含量使用步骤(b)中获得的测定作为该化合物或制剂抗反应特异性湿疹和皮炎的潜在临床活性的指示。
21.根据权利要求20的方法，其中在该单核细胞上的CD23表达的量可用CD23的标记单克隆抗体测得。
22.根据权利要求20或21的方法，其中细胞表面标记物CD14的表达也可以在该单核细胞上用CD23的标记单克隆抗体测得。
23.根据权利要求20到22的任何一种方法，其中所述的外周血的单核细胞是人的。
24.根据权利要求20到23的任何一种方法，其中把抑制25％或更大的CD23的表达作为抗反应特异性湿疹和皮炎的化合物或制剂的临床活性指标。
25.一种治疗反应特异性的湿疹或皮炎的药物组合物，它含有这样一种化合物或制剂和一种药学可接收的载体或稀释剂，其中的化合物或制剂已经按照权利要求20到24的任何一种方法测得具有临床活性。
26.一种制备如权利要求1所述的适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性的湿疹或牛皮癣的物质的方法，它包括的步骤有(a)把冷冻干燥的煎剂与纤维状的纤维素接触并用一种含有无机溶剂和至少25％的水的溶剂混合物提取该混合物，可任选提取一次以上，(b)用水提取冷冻干燥的煎剂/纤维状的纤维素和(c)把水提物蒸干用于配制成一种药物组合物。
27.根据权利要求26的方法，其中在步骤(b)前冷冻干燥的煎剂/纤维状的纤维素已被己烷提取过。
28.根据权利要求26或27的方法，其中的溶剂混合物包括以4∶1∶1比例的丁醇，IMS和水。
29.根据权利要求26到28的任何一种方法，其中在步骤(a)中加入提取溶剂后，离心分离该混合物并分离出沉淀物用于下一次提取。
全文摘要
本发明公开了一种适合治疗反应特异性疾病，非反应特异性湿疹或牛皮癣的物质，该物质能够从冷冻干燥的含有下列中草药混合物的煎剂中提取出来防风、蒺藜、委陵菜、川木通、地黄、甘草、赤芍、白鲜皮、淡竹叶和荆芥穗，该物质含有存在于该冷冻干燥的煎剂中的一种或多种成分，如果用水溶液稀释该冷冻干燥的煎剂并将其在Whatman 2cms×55cms×3mm的纤维素试纸上使用比例为4∶1∶1的丁醇、乙醇和水的混合溶剂进行色谱层析10小时，这些成分会具有0.00到0.100、0.167到0.300、0.400到0.533、0.700到0.833或0.900到0.967范围内的Rf值。
文档编号G01N33/58GK1153478SQ9519427
公开日1997年7月2日 申请日期1995年6月23日 优先权日1994年6月24日
发明者B·A·惠特尔, J·伯罗斯托夫, Y·拉切曼 申请人:植物技术有限公司