阿加曲班中间体的检测方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及阿加曲班中间体的检测方法。
【背景技术】
[0002] 阿加曲班，英文名：argatroban，化学名：（2R，4R)-4-甲基-1_[N- ((R，S)-3-甲 基-1，2, 3,4-四氢-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸，分子量为508. 63,是由日 本三菱制药株式会社首先研发的一种新型竞争性凝血酶抑制剂，具有高度选择性，能够可 逆地与凝血酶活性位点结合。其抗凝血作用不依赖体内的抗凝血酶，而是直接与血液中游 离的凝血酶结合并使其灭活，另外由于阿加曲班的分子量比较小，可以直接进入血栓内部， 从而灭活已经与纤维蛋白结合的凝血酶，间接抑制凝血酶的产生，因此极低浓度的阿加曲 班即可抑制由凝血酶诱导的血小板聚集反应。阿加曲班能够大大降低血浆中凝血酶-抗凝 血酶复合物水平，有效改善患者的高凝状态，因此对慢性血栓栓塞性疾病有很好的疗效。阿 加曲班的化学结构如下：
[0003]
【主权项】
1. 阿加曲班中间体的检测方法，其特征在于：所述阿加曲班中间体为式A、B、C所示化 合物中的一种或两种以上的混合物；
它是采用HPLC进行测定的，其具体操作步骤如下： (1) 取待测样品，制备供试品溶液； (2) 将供试品溶液注入高效液相色谱仪中，检测即可，其色谱条件如下： 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱； 检测波长：250~300nm ; 流动相：A :有机溶剂-缓冲液=(5~15) : (85~95) v/v，B :有机溶剂，梯度洗脱； 其中，缓冲液PH为1~6,流动相中所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈中的任 意一种或两种以上的组合。
2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：流动相中所述有机溶剂选自甲醇或/ 和乙腈；梯度洗脱程序为：
〇
3. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：流动相中所述有机溶剂为乙腈，梯度 洗脱程序选自如下之一： 程序一 ： _
或者，流动相中所述有机溶剂为甲醇，梯度洗脱程序选自如下之一： 程序五：
ΓΕ? ΓΓΕ ο
4. 根据权利要求1~3任意一项所述的检测方法，其特征在于：所述缓冲液选自磷酸 盐或醋酸盐缓冲液。
5. 根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述缓冲液选自磷酸二氢钠、磷酸氢 二钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、醋酸铵或醋酸钠缓冲液。
6. 根据权利要求1~5任意一项所述的检测方法，其特征在于：缓冲液pH为2~5,优 选为pH3~5。
7. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述检测波长为260~280nm。
8. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：流动相流速为0. 5~2. Oml/min，优 选为 0· 8 ~L 5ml/min。
9. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：供试品溶液的溶剂或稀释液为流动 相中所述缓冲液和有机溶剂的混合溶液，缓冲液：有机溶剂=5: (1~4) v/v。
【专利摘要】本发明提供了阿加曲班中间体的检测方法，所述阿加曲班中间体为式A、B、C所示化合物中的一种或两种以上的混合物。本发明检测方法，可以同时将阿加曲班中间体A、B、C及其杂质有效分离，且基线平稳，色谱峰分离度、峰形等均良好，可有效用于阿加曲班合成过程中中间体质量的监测。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104730155
【申请号】CN201310718004
【发明人】傅霖, 蒋春霞, 廖丽萍, 陈刚
【申请人】四川科瑞德制药有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2013年12月23日