液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，旨在提供一种灵敏度高，定性定量准确的液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法；其该方法是：1)制备供试品溶液；2)制备阴性对照溶液；3)制备对照品溶液；4)分别称取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液，上Agilent1295?6550C三重四级杆液相质谱联用仪检测；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法
技术领域
[0001] 本发明提供一种测定盐酸水苏碱含量的方法，具体地说，是液质串联检测妇康宁 片中盐酸水苏碱含量的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 妇康宁片处方由白芍、益母草、香附等八味中药组成，具有养血理气，活血调经的 功效，主治血虚气滞所致的月经不调。方中益母草为中医妇科良药，属唇形科植物益母草 (Leonurus iaponicus Houtt.)的新鲜或干燥地上部分，其性微寒，味苦、辛，具有活血调 经，利水消肿，清热解毒之功效，用于月经不调，痛经经闭，恶露不尽，水肿尿少，疮肿毒。
[0003] 妇康宁片收载于《中国药典》2010年版一部，其质量标准收载了方中君药白芍的含 量测定方法，而其臣药益母草只有盐酸水苏碱的薄层鉴别方法。经查阅文献，未见报道测定 妇康宁片中盐酸水苏碱的含量方法。
【发明内容】
[0004] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种灵敏度高，定性定量准确的液质串联检 测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0006] -种液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，依次包括下述步骤：
[0007] 1)取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加 入80 %乙醇20ml，密塞，称定重量，超声提取30min，放冷，再称定重量，用80 %乙醇补足减失 的重量，摇匀，以lml/min流速通过分别以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml 水淋洗，弃去，再用5ml乙醇洗脱收集洗脱液，洗脱液于40°C下氮吹至近干，精密加入lml乙 醇溶解，用〇. 22mi有机滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
[0008] 2)取按处方比例及工艺制备的缺益母草阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备 阴性对照溶液；
[0009] 3)精密称定盐酸水苏碱对照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀释至每lml含盐 酸水苏碱〇.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀释至25ml，得每lml含盐酸水苏碱 0.1388mg的对照品溶液；
[0010] 4)分别称取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重 四级杆液相质谱联用仪检测。
[0011] 进一步的，上述的一种液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，所述的 液相色谱与质谱条件如下：
[0012] 色谱柱：Agilent ZORBAX Eel ipse Plus柱2 ? 1 X 50mm，1 ? 8m;流动相A为0 ? 1 % 甲 酸，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱程序如下：0-2. Omin，A、2-98%，B、98-2% ; 2.0-9.5min， 八、5%，8、95%;9.5.-151^114、70%，8、30%;流速0.81111/111111;柱温35°(： ;进样量如1;电喷雾 源ESI，正离子方式，选择多反应监测MRM，载气温度：150 °C，载气流量：15L/min，雾化器压力 40psi，鞘气温度350°C，鞘气流量：lOL/min，毛细管电压3500V，定性定量离子:母离子m/z = 247.2，子离子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分别为5V和20V，Frag均为380V。
[0013] 与现有技术相比，本发明提供的采用液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的 方法，检测快速，检测结果与采用药典检测的结果基本一致，为完善妇康宁片质量标准，控 制其内在质量提供了一定的理论依据。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0015] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固体的均为质量浓度。
[0016] 实施例1
[0017] 1)取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加 入80 %乙醇20ml，密塞，称定重量，超声提取30min，放冷，再称定重量，用80 %乙醇补足减失 的重量，摇匀，以lml/min流速通过分别以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml 水淋洗，弃去，再用5ml乙醇洗脱收集洗脱液，洗脱液于40°C下氮吹至近干，精密加入lml乙 醇溶解，用〇. 22mi有机滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；
[0018] 2)取按处方比例及工艺制备的缺益母草阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备 阴性对照溶液；
[0019] 3)精密称定盐酸水苏碱对照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀释至每lml含盐 酸水苏碱〇.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀释至25ml，得每lml含盐酸水苏碱 0.1388mg的对照品溶液；
[0020] 4)分别称取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重 四级杆液相质谱联用仪检测。
[0021 ]所述的液相色谱与质谱条件如下：
[0022] 色谱柱：Agilent ZORBAX Eel ipse Plus柱2 ? 1 X 50mm，1 ? 8m;流动相A为0 ? 1 % 甲 酸，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱程序如下：0-2. Omin，A、2-98%，B、98-2% ; 2.0-9.5min， 八、5%，8、95%;9.5.-151^114、70%，8、30%;流速0.81111/111111 ;柱温35°(：;进样量如1;电喷雾 源ESI，正离子方式，选择多反应监测MRM，载气温度：150 °C，载气流量：15L/min，雾化器压力 40psi，鞘气温度350°C，鞘气流量：10L/min，毛细管电压3500V，定性定量离子:母离子m/z = 247.2，子离子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分别为5V和20V，Frag均为380V。
[0023] 阴性干扰试验:取对照品溶液、供试品溶液，阴性对照品溶液，按上述色谱条件测 定。结果阴性对照品溶液色谱图中，在盐酸水苏碱色谱峰相应位置无干扰，表明本品中其他 成分对盐酸水苏碱的测定无干扰
[0024]精密称取已知含量的同一批号样品6份，分别精密加入0.6940mg/ml的盐酸水苏碱 对照品溶液0.7、1.0、1.3ml各2份，其余操作按下供试品溶液的制备方法，测定，计算，结果 平均加样回收率为100.36%，RSD = 0.95%(n = 6)，表明本方法准确度较好 [0025]取四批样品，分别按上述含量测定方法测定，其检测结果基本一致，具体如下表所 示：
【主权项】
1. 一种液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，其特征在于，依次包括下述 步骤： 1) 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入 80%乙醇20ml，密塞，称定重量，超声提取30min，放冷，再称定重量，用80%乙醇补足减失的 重量，摇匀，以lml/min流速通过分别以3ml乙醇和3ml水活化的C18固相萃取小柱，用5ml水 淋洗，弃去，再用5ml乙醇洗脱收集洗脱液，洗脱液于40°C下氮吹至近干，精密加入1ml乙醇 溶解，用0.22μπι有机滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液； 2) 取按处方比例及工艺制备的缺益母草阴性样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性 对照溶液； 3) 精密称定盐酸水苏碱对照品17.42mg，至25ml量瓶中，加甲醇稀释至每1ml含盐酸水 苏碱0.6940mg的溶液，精密吸取5ml，加甲醇稀释至25ml，得每1ml含盐酸水苏碱0.1388mg的 对照品溶液； 4) 分别称取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照溶液，上Agi lent 1295-6550C三重四级 杆液相质谱联用仪检测。2. 根据权利要求1所述的一种液质串联检测妇康宁片中盐酸水苏碱含量的方法，其特 征在于，所述的液相色谱与质谱条件如下： 色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus柱2.1X50mm，1.8m;流动相A为0.1% 甲酸，流 动相B为乙腈，采用梯度洗脱程序如下:0-2.0min，A、2-98%，B、98-2%;2.0-9.5min，A、5%， B、95%;9·5·-15min，A、70%，B、30%;流速0·8ml/min;柱温35°C ;进样量2μl;电喷雾源ESI， 正离子方式，选择多反应监测MRM，载气温度：150°C，载气流量：15L/min，雾化器压力40psi， 鞘气温度350 °C，鞘气流量：10L/min，毛细管电压3500V，定性定量离子:母离子m/z = 247.2， 子离子m/z233.8和m/z205.2，碰撞能量分别为5V和20V，Frag均为380V。
【文档编号】G01N30/02GK105911187SQ201610259400
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈学松, 陈江涛, 梁慧敏, 李亚, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所