大孔树脂联合hplc检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法
【专利摘要】本发明提供了一种大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，旨在提供一种操作简便，结果准确可靠，可作为清喉利咽颗粒的质量控制方法；该方法包括下述步骤：制备供试品溶液；制备阴性对照溶液；制备对照品；4)专属性试验，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各1μl注入液相色谱仪，检测；属于化学检测技术领域。
【专利说明】
大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法
技术领域
[0001]本发明提供一种橙皮苷的鉴别方法，具体地说，是一种大孔树脂联合HPLC检测清 喉利咽颗粒中橙皮苷的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002] 清喉利咽颗粒是由黄芩、西青果、桔梗、竹茹、枳壳、胖大海、橘红等13种中药组成。 功效清热利咽，宽胸润喉。用于外感风热所致的咽喉发干、声音嘶哑；急慢性咽炎、扁桃体炎 见上述证候者，常用有保护声带作用。其质量标准收载于:《中国药典》2005年版一部，只有 黄芩苷的含量测定指标，不利于控制该药品的质量。
【发明内容】
[0003] 针对上述不足，本发明的目的是提供一种清喉利咽颗粒中橙皮苷的鉴别方法，该 方法操作简便，结果准确可靠，可作为清喉利咽颗粒的质量控制方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0005] -种大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，其依次包括下述步 骤：
[0006] 1)制备供试品溶液
[0007] 取本品粉末2g，加5 %氢氧化钠10ml溶解，离心，取上清液;通过已处理好的大孔吸 附树脂柱，先用水洗，收集洗脱液，蒸干，再用二甲基甲酰胺5ml洗脱，收集洗脱液，蒸干；用 10ml甲醇溶解，作为供试品；
[0008] 2)制备阴性对照溶液
[0009] 取按处方制法制得同时缺枳壳清喉利咽颗粒阴性对照2g，研细，加甲醇10mL，超声 30min，用0.22mi微孔滤膜滤过，补足10ml，取续滤液作为阴性对照溶液；
[0010] 3)制备对照品
[0011] 取橙皮苷对照品4g，超声30min溶解，滤过，补足10ml制得作为对照品储备液;吸取 对照品储备液5ml置10ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
[0012] 4)专属性试验
[0013] 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各lyl注入液相色谱仪，检 测。
[0014] 进一步的，上述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，所述的 色谱条件如下：色谱柱:Phenomenex C18柱;流动相：甲醇一0.5%醋酸体积比30 : 70;流速 0 ? 8mL/min;波长：283nm，柱温：30 °C，进样量ly 1 〇
[0015] 进一步的，上述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，所述的 色谱柱为 l〇〇_X4.6mm，2.6iim。
[0016] 进一步的，上述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，所述的 大孔吸附树脂柱AB-8型大孔树脂。
[0017] 与现有技术相比，本发明提供的技术方案采用大孔树脂吸附法对清喉利咽颗粒进 行提取分离，在通过高效液相色谱进行含量检测，该方法简便、重现性好，结果准确可靠，可 以用于清喉利咽颗粒中橙皮苷的含量测定，为清喉利咽颗粒的质量控制提供一定的理论依 据。
【具体实施方式】
[0018] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的 权利要求保护范围之内。
[0019] 本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶 质为固定的均为质量浓度。
[0020] 实施例1
[0021] 本发明提供的一种大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，该方法 具体如下：
[0022] 1)制备供试品溶液
[0023] 取本品粉末2g，加5 %氢氧化钠10ml溶解，离心，取上清液;通过已处理好的AB-8型 大孔树脂柱，先用水洗，收集洗脱液，蒸干后用0.22wii微孔滤膜滤过，再用二甲基甲酰胺5ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干;用l〇ml甲醇溶解，作为供试品；
[0024] 2)制备阴性对照溶液
[0025] 取按处方制法制得同时缺枳壳清喉利咽颗粒阴性对照2g，研细，加甲醇10mL，超声 30min，用0.22wii微孔滤膜滤过，补足10ml，取续滤液用0.22wii微孔滤膜滤过，作为阴性对照 溶液；
[0026] 3)制备对照品
[0027] 取橙皮苷对照品4g，超声30min溶解，滤过，补足10ml，用0.22wii微孔滤膜滤过制得 作为对照品储备液;吸取对照品储备液5ml置10ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶 液；
[0028] 4)专属性试验
[0029] 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各lyl注入液相色谱仪，检 测。结果在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间的色谱峰，阴性对照试验无干扰。
[0030] 所述的色谱仪为安捷伦AgilentLC-1200高效液相色谱仪，所述的色谱条件如下： 色谱柱：Phenomenex C18柱（lOOmmX4? 6mm，2? 6ym);流动相：甲醇一0? 5%醋酸体积比30: 70;流速0 ? 8mL/min;波长：283nm，柱温：30 °C，进样量ly 1 〇
[0031] 为了检测该方法的精密度，取同一份对照品溶液，按色谱柱:Phenomenex C18柱 (100mm X 4 ? 6mm，2 ? 6mi);流动相：甲醇一0 ? 5 % 醋酸体积比30 : 70 ;流速0 ? 8mL/min;波长： 283nm，柱温:30°C，进样量ly 1的色谱条件，连续进样6次，测定峰面积积分值，橙皮苷RSD为 0.23% (n = 6)结果表明，仪器精密度良好。
[0032]线性关系考察
[0033] 按上述的色谱条件分别精密吸取上述对照品溶液0.2、l、2、3、5yl注入色谱仪，测 定，以峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线;橙皮苷的 回归方程为:Y = 23.4X+3.78(r = 0.9998);结果表明；橙皮苷在20~500ng范围内，进样量与 峰面积积分值呈良好的线性关系，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。
[0034] 稳定性试验
[0035]取同一份样品溶液，分别在0,2,4,8，12,2处，按上述色谱条件进样测定，分别测定 峰面积积分值，橙皮苷RSD为0.93 % (n = 6)结果表明，在24小时内待测物稳定。
[0036]样品含量测定
[0037]按上述含量测定方法，测定了本品3批样品中的橙皮苷含量，结果见表1。
[0038]表1、样品测定结果(n = 3)
[0040]与现有技术相比，本发明的优点在于方法简单准确，对提高产品质量和临床用药 的有效性与安全性均具有重要意义。
【主权项】
1. 一种大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，其特征在于，依次包括 下述步骤： 1) 制备供试品溶液 取本品粉末2g，加 5%氢氧化钠 IOml溶解，离心，取上清液;通过已处理好的大孔吸附树 脂柱，先用水洗，收集洗脱液，蒸干，再用二甲基甲酰胺5ml洗脱，收集洗脱液，蒸干;用IOml 甲醇溶解，作为供试品； 2) 制备阴性对照溶液 取按处方制法制得同时缺枳壳清喉利咽颗粒阴性对照2g，研细，加甲醇IOmU超声 30min，用0.22μπι微孔滤膜滤过，补足IOml，取续滤液作为阴性对照溶液； 3) 制备对照品 取橙皮苷对照品4g，超声30min溶解，滤过，补足IOml制得作为对照品储备液;吸取对照 品储备液5ml置IOml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液； 4) 专属性试验 分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各?μL注入液相色谱仪，检测。2. 根据权利要求1所述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，其特 征在于，所述的色谱条件如下:色谱柱:Phenomenex C18柱;流动相：甲醇一0.5%醋酸体积 比30:70;流速0.8mL/min;波长：283nm，柱温：30°C，进样量ΙμL。3. 根据权利要求1所述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，其特 征在于，所述的色谱柱为100mm X 4.6mm，2.6μηι。4. 根据权利要求1所述的大孔树脂联合HPLC检测清喉利咽颗粒中橙皮苷的方法，其特 征在于，所述的大孔吸附树脂柱AB-8型大孔树脂。
【文档编号】G01N30/02GK105929056SQ201610249816
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月21日
【发明人】陈学松, 林冬杰, 李亚, 梁慧敏, 李澄
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所