一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法
【专利摘要】一种应用于化合物物质检测领域中的采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，该检测方法包括如下步骤：色谱条件：色谱柱：Agilent ZORBAX?C18，4.6mm×250mm×5.0μm；检测波长：紫外检测器210nm；流动相:10mM磷酸二氢钾溶液：甲醇＝65:35添加0.1％的庚烷磺酸钠，磷酸调节pH 3.5；标准品溶液的配制；供试品溶液的制备；该发明检测苯乙胺重现性、灵敏度、准确度均能符合要求。
【专利说明】
一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法
技术领域
[0001]本发明属于化合物物质检测领域，具体说的是一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法。
【背景技术】
[0002]苯乙胺，又称β-苯乙胺，2-苯乙胺，是一种芳香胺，在室温时是无色液体。它可以溶于水，乙醇与乙醚之中。在人脑中，2-苯乙胺作为一种生物碱与单胺类神经递质具有神经调节物质、神经递质与示踪胺的作用。取代苯乙胺更是一类功能广泛，结构多样的化合物，包括神经递质、激素、兴奋剂、迷幻剂、放心药、降食欲药、支气管扩张药与抗抑郁药等。此外，苯乙胺在药物合成中应用非常广泛。因此，研制开发一种苯乙胺含量的检验方法是一个亟待解决的新课题。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，该方法采用高效液相色谱法测定，重现性好、灵敏度高、检测精确、专属性强、操作方便等特点。
[0004]为实现上述目的，本发明采用如下技术方案:一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，所述方法包括如下步骤:
[0005](I)色谱条件:Agilent Z0RBAX-C18色谱柱；
[0006]检测波长:紫外波长210nm;
[0007]流动相:磷酸二氢钾水溶液与甲醇的混合溶液，添加庚烷磺酸钠，磷酸调节pH;
[0008](2)对照品溶液的配制；
[0009](3)供试品溶液的配制；
[0010](4)测定方法:
[0011]取对照品溶液，平行进样，注入高效液相色谱仪，记录图谱，计算苯乙胺峰面积的相对标准偏差应小于或等于2.0 %，；取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录谱图，苯乙胺与杂质峰的分离度应大于等于1.5，计算供试品溶液中苯乙胺的含量；
[0012]所述AgilentZ0RBAX-C18色谱柱的规格为4.6mm X 250mmX 5.Ομπι;所述磷酸二氢钾水溶液的浓度为1mM ；所述磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为60-70:30-40，优选体积比为65: 35;所述添加庚烷磺酸钠的质量与流动相的体积比为1:1000，所述质量的单位为克，所述体积的单位为毫升;所述磷酸调节pH的范围为2.9-3.7，优选调节pH的范围为3.5 ；所述检测的流速为0.5-2mL/min，优选流速为1.0mL/min ；所述检测的柱温为25-35°C，优选柱温为30°C;所述检测的进样量为0.5-10yL，优选进样量为IyL;所述对照品溶液的配制方法为称取苯乙胺对照品50mg于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀;所述供试品溶液的配制方法为称取苯乙胺样品50mg于1mL容量瓶中，并用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0013]该发明的要点在于它的检测方法。该检测方法的基本原理是利用HPLC外标法计算其含量。
[0014]一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法与现有技术相比，具有重现性、灵敏度、精确度均能符合要求等优点，将广泛的应用于药物分析领域中。
【附图说明】
[0015]下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明。
[0016]图1是苯乙胺标准品HPLC图谱。
[0017]图2是苯乙胺样品HPLC图谱。
【具体实施方式】
[0018]下面结合实施例对本发明做进一步的说明，实施例有助于更好地理解本发明，但本发明并不仅仅局限于下述实施例。
[0019]实施例一
[0020]1、色谱条件:Agilent 201^4乂-(:18色谱柱，4.6111111\250111111\5.(^111;
[0021]检测波长:紫外波长210nm;
[0022]流动相:10mM磷酸二氢钾水溶液:甲醇= 65:35(体积比)添加0.1%的庚烷磺酸钠(g/ml)，磷酸调节pH 3.5；
[0023]流速:1.0mL/min;
[0024]柱温:30Γ ;
[0025]进样量:IyL;
[0026]2、相关溶液及流动相的配制:
[0027]2.1流动相的制备:称取2.728磷酸二氢钾、28庚烷磺酸钠于2000!^容量瓶中，加入1300mL水，用甲醇定容，用磷酸调节pH至3.5。
[0028]2.2对照品溶液的制备:
[0029]称取苯乙胺对照品50mg于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0030 ] 2.3供试品溶液的制备:
[0031]2.3.1称取供试品苯乙胺(批号:I，环氧母液中苯乙胺)50mg，于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0032]2.3.2称取供试品苯乙胺(批号:2，混旋苯乙胺)50mg，于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0033]2.3.3称取供试品苯乙胺(批号:3，回收苯乙胺)50mg，于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
[0034]3、测定方法:
[0035]取对照品溶液，平行进样，注入高效液相色谱仪，记录图谱，计算苯乙胺峰面积的相对标准偏差应小于或等于2.0%;取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录谱图，苯乙胺与杂质峰的分离度应大于等于1.5，计算供试品溶液中苯乙胺的含量；
[0036]检验结果:
[0037]供试品(批号I):
[0038]苯乙胺对照品面积15271，供试品面积498.1，标准品重量0.0580g，标准品纯度99.5%，样品重量0.0521g:
[0039]供试品含量:[(0.0580 X 99.5% X 498.I) + (15271 X 0.0521) ]X100%=3.61%
[0040]供试品(批号2):
[0041 ] 苯乙胺对照品面积15 2 71，供试品面积1510 4，标准品重量0.0 5 8 O g，标准品纯度99.5%，样品重量0.0595g:
[0042]供试品含量:[(0.0580X99.5%X 15104)+ (15271X0.0595)] X 100% =95.93%
[0043]供试品(批号3):
[0044]苯乙胺对照品面积15 271，供试品面积2 3.3，标准品重量0.0 58Og，标准品纯度99.5%，样品重量0.0535g:
[0045]供试品含量:[(0.0580X99.5%X23.3)+ (15271 X0.0535)] X 100% =0.16%。
【主权项】
1.一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤: (1)色谱条件:AgiI ent ZORBAX-C18色谱柱； 检测波长:紫外波长210nm; 流动相:磷酸二氢钾水溶液与甲醇的混合溶液，添加庚烷磺酸钠，磷酸调节pH; (2)对照品溶液的配制； (3)供试品溶液的配制； (4)测定方法: 取对照品溶液，平行进样，注入高效液相色谱仪，记录图谱，计算苯乙胺峰面积的相对标准偏差应小于或等于2.0%，；取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录谱图，苯乙胺与杂质峰的分离度应大于等于1.5，计算供试品溶液中苯乙胺的含量。2.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，其特征在于，所述Agi lent Z0RBAX-C18色谱柱的规格为4.6mm X 250mm Χδ.Ομπι；所述磷酸二氢钾水溶液的浓度为1mM;所述磷酸二氢钾水溶液与甲醇的体积比为60-70: 30-40，优选体积比为65:35;所述添加庚烷磺酸钠的质量与流动相的体积比为1:1000，所述质量的单位为克，所述体积的单位为毫升;所述磷酸调节pH的范围为2.9-3.7，优选调节pH的范围为3.5 ；所述检测的流速为0.5-2mL/min，优选流速为1.0mL/min;所述检测的柱温为25-35°C，优选柱温为30°C ；所述检测的进样量为0.5-10yL，优选进样量为lyL。3.根据权利要求1所述的一种采用高效液相色谱检测苯乙胺含量的方法，其特征在于，所述对照品溶液的配制方法为称取苯乙胺对照品50mg于1mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀;所述供试品溶液的配制方法为称取苯乙胺样品50mg于1mL容量瓶中，并用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。
【文档编号】G01N30/02GK106053656SQ201610511489
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年7月1日
【发明人】张海宏, 李晶晶, 李秀媛, 胡勇男, 周宏
【申请人】东北制药集团股份有限公司