一种鳞翅目昆虫卵计数的方法及应用

本发明涉及一种鳞翅目昆虫卵计数的方法及应用，属于昆虫生物。

背景技术：

1、昆虫卵的数量是昆虫科学研究中的一个非常重要的指标，因为它可以提供有关昆虫生物学和生态学的重要信息。在生物学中，昆虫卵数量可以反映昆虫种群数量和生长动态，从而帮助研究人员了解昆虫生物学，如繁殖策略、生育周期、繁殖能力等，也能很好反映有害昆虫绿色防控技术的效果，例如昆虫不育技术(sit)；在生态学上，昆虫卵数量可以反映昆虫对其生境的适应性和对其他生物的影响，这对于研究昆虫与其他生物、生态系统以及环境之间的关系非常重要；总的来说，昆虫卵数量是昆虫科学研究中的重要指标，可以提供有关昆虫生物学和生态学的宝贵信息。但是部分昆虫产卵数量难以统计，尤其是鳞翅目昆虫不仅单雌产卵数量多、卵粒小，而且喜好产卵在植物枝干缝隙、土面落叶或枝叶间，还会堆积成卵块。传统计卵数会对卵造成一定的损伤，并且费时费力。所以，想要统计具体的卵数难度还是相当大的。

2、因此现有技术需要一种快速得取卵数的方法，来判别相应的昆虫生态指标，更方便的进行科学研究。

3、此外，在鳞翅目昆虫种类中，灰茶尺蠖其体内含有一种共生菌叫做wolbachia(沃尔巴克氏体)，这种菌对昆虫宿主的繁殖力、生长周期、行为、抗病毒能力、寿命以及营养代谢都有所影响。所以在昆虫的一些研究当中，有研究人员就会使用抗生素定向的把昆虫体内的wolbachia给清除掉，用这样一种体内去除wolbachia的昆虫做一些科学研究，例如wolbachia清除掉后昆虫产卵量的变化、发育时间的变化、行为的变化等。比如，在前期的研究过程中，发明人所在团队研究了wolbachia对其灰茶尺蠖繁殖力的影响(zhangy,lius,jiangr,zhangc,gaot,wangy,liuc,longy,zhangy,yangy.wolbachiastrainwgrifrom theteageometridmothectropisgrisescenscontributestoitshost'sfecundity.frontmicrobiol.2021jul19；12:694466.doi:10.3389/fmicb.2021.694466.pmid:34349742；pmcid:pmc8326765.)，把从黄山采集的未经过处理的正常的灰茶尺蠖命名为黄山品系灰茶尺蠖(又称为野外品系，或w+灰茶尺蠖)，在此基础上清除了wolbachia的灰茶尺蠖命名为清除wolbachia品系灰茶尺蠖(又称为实验室品系，或w—灰茶尺蠖)。研究者将在野外获得的一些灰茶尺蠖虫卵带回实验室研究，可能需要在实验过程中培养多种不同品系的灰茶尺蠖，但是一旦品系标签弄混了，难以进一步确认具体品系，对后续实验影响较大。为此，也有必要开发一些能快速区别灰茶尺蠖虫卵品系的方法。

技术实现思路

1、为了解决鳞翅目昆虫产卵结痂、卵小、卵数多而难以统计的问题，或者是不同品系灰茶尺蠖的快速区分问题，本发明提供了一种鳞翅目昆虫卵计数的方法及应用。

2、本发明的第一个目的提出了一种快速得出鳞翅目昆虫卵数的方法，包括如下步骤：

3、(1)取不同数量的鳞翅目昆虫卵，制作卵数与卵重的线性回归方程；

4、(2)对待测的目标卵进行称重，得到卵重，再将卵重代入线性回归方程，得出卵数。

5、在一种实施方式中，步骤(1)所述不同数量鳞翅目昆虫卵为50、100、200、300、400、500、600粒；

6、在一种实施方式中，步骤(2)所述称重是指用毛刷将需要计数的对应的鳞翅目昆虫产下的卵刷到称量纸上，用尖嘴镊子清除杂质，然后在分析天平上称重，事先需要将称量纸重量在分析天平清零；此步骤重复三次。

7、在一种实施方式中，所述鳞翅目昆虫包括灰茶尺蠖、斜纹夜蛾等。

8、本发明的第二个目的是提供一种快速分析灰茶尺蠖w+和/或灰茶尺蠖w-的昆虫卵数的方法，所述方法是对待测的目标卵进行称重，得到卵重，再将卵重代入线性回归方程，得出卵数；其中，灰茶尺蠖w+的回归方程为y＝0.0776*x-0.264，灰茶尺蠖w-的回归方程为y＝0.0865*x-0.0877，其中y代表卵重、单位mg。

9、在一种实施方式中，所述称重，具体是：用毛刷将需要计数的对应的鳞翅目昆虫产下的卵刷到称量纸上，用尖嘴镊子清除杂质，然后在分析天平上称重，事先需要将称量纸重量在分析天平清零；此步骤重复三次，取三次的平均值作为卵重。

10、在一种实施方式中，目标卵的粒数范围为100粒-600粒。

11、本发明中，灰茶尺蠖w+是指体内含有共生菌wolbachia的未经过处理的正常的灰茶尺蠖，比如从黄山采集的未经过处理的正常的灰茶尺蠖(又名灰茶尺蠖黄山品系，或野外品系)，通常野外采集地点对未经处理的灰茶尺蠖没影响。灰茶尺蠖w-是指清除了正常灰茶尺蠖体内的wolbachia的灰茶尺蠖(又名灰茶尺蠖清除wolbachia品系，或者实验室品系)。

12、本发明的第三个目的是提供一个区分灰茶尺蠖w+和灰茶尺蠖w-的方法，包括如下步骤：

13、(1)选取同一品系的灰茶尺蠖虫卵，取粒数x的昆虫卵、称重，得到昆虫卵的称量重量m；

14、(2)将昆虫卵的称量重量m，分别代入到回归方程y＝0.0776*x-0.264、y＝0.0865*x-0.0877，获得对应的预测卵数x1、x2(x单位：粒)；将预测的卵数x1、x2与实际的卵数进行相对误差分析，相对误差≤5％可判为预测卵数(x1与x2)相对应品系；其中y＝0.0776*x-0.264对应灰茶尺蠖w+、y＝0.0865*x-0.0877对应灰茶尺蠖w-。

15、在一种实施方式中，所述x的范围为100粒-600粒。

16、本发明的优点和效果：

17、(1)本发明的一种快速得出卵数的方法，该方法可以有效的解决鳞翅目昆虫产卵结痂、卵小、卵数多而难以统计的问题，简单、快捷，为后续昆虫的科学研究提供了一种可靠的手段。

18、(2)本发明构建了的快速分析灰茶尺蠖w+和灰茶尺蠖w-的昆虫卵数的方法，该方法快速、准确可行，可以用于区分不同的灰茶尺蠖品系，能够解决实验室研究过程中可能产生的灰茶尺蠖w+和灰茶尺蠖w-混淆的问题。

技术特征：

1.一种快速得出鳞翅目昆虫卵数的方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，步骤(1)所述不同数量鳞翅目昆虫卵为50、100、200、300、400、500、600粒。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的鳞翅目昆虫为灰茶尺蠖和/或斜纹夜蛾。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述称重是指用毛刷将需要计数的对应的鳞翅目昆虫产下的卵刷到称量纸上，用尖嘴镊子清除杂质，然后在分析天平上称重，事先需要将称量纸重量在分析天平清零；此步骤重复三次。

5.一种快速分析灰茶尺蠖w+和/或灰茶尺蠖w-的昆虫卵数的方法，其特征在于，所述方法是对待测的目标卵进行称重，得到卵重，再将卵重代入线性回归方程，得出卵数；其中，灰茶尺蠖w+的回归方程为y＝0.0776*x-0.264，灰茶尺蠖w-的回归方程为y＝0.0865*x-0.0877，其中y代表卵重、单位mg。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，目标卵的粒数范围为100粒-600粒。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，灰茶尺蠖w+是指体内含有共生菌wolbachia的未经过处理的正常的灰茶尺蠖；灰茶尺蠖w-是指清除了正常灰茶尺蠖体内的wolbachia的灰茶尺蠖。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述称重，具体是：用毛刷将需要计数的对应的鳞翅目昆虫产下的卵刷到称量纸上，用尖嘴镊子清除杂质，然后在分析天平上称重，事先需要将称量纸重量在分析天平清零；此步骤重复三次，取三次的平均值作为卵重。

9.一个区分灰茶尺蠖品系的方法，其特征在于，包括如下步骤：

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述x的范围为100粒-600粒。

技术总结
本发明公开了一种鳞翅目昆虫卵计数的方法及应用，属于昆虫生物技术领域。本发明的一种鳞翅目昆虫卵计数的方法，是通过线性拟合一个模型，将卵重代入模型后得到卵数。该方法可以有效的解决鳞翅目昆虫产卵结痂、卵小、卵数多而难以统计的问题，为后续昆虫的科学研究提供了一种可靠的手段，并能使用本发明的线性模型应用到区分昆虫种类的方面。

技术研发人员：杨云秋,訾化彬,冀睿婕,桂昊,黄雪妤,支点
受保护的技术使用者：安徽农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14