本发明涉及食用菌生产技术领域，尤其涉及富硒灵芝孢子粉的采收方法。
背景技术：
灵芝是我国传统的菌类珍品，享有“仙草”美誉。灵芝(学名：Ganoderma Lucidum Karst)，又称灵芝草、仙草，别称赤芝、红芝、木灵芝、菌灵芝、万年蕈、灵芝草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株，为多孔菌科真菌灵芝的子实体。外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形。《神农本草经》和《本草纲目》即详细记载了灵芝的药效及功能。灵芝已作为药物正式被国家药典收载，是国家批准的新资源食品，可药食两用。灵芝作为拥有数千年药用历史的中国传统珍贵药材，具有补气安神，止咳平喘的功效，用于眩晕不眠，心悸气短，虚劳咳喘。灵芝具备很高的药用价值，经过科研机构数十年的现代药理学研究证实，灵芝对于增强人体免疫力，调节血糖，控制血压，辅助肿瘤放化疗，保肝护肝，促进睡眠等方面均具有显著疗效。灵芝多糖是灵芝药用功能的主要有效成分之一，主要存在于灵芝细胞壁内壁，大部分为β-葡聚糖，其单糖组成除含有大量葡萄糖外，还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖，鼠李糖，半乳糖和甘露糖等，它们大多以(1-3)、(1-4)和(1-6)等糖苷键连接，具有广泛的生物活性，如增强免疫力、清除人体自由基、保护心血管、抗辐射、保护肝脏、抗肿瘤等作用。三萜类也是灵芝的有效成分之一，灵芝所含三萜类不下百余种，其中以四环三萜类为主，灵芝的苦味与所含三萜类有关，对人体肝癌细胞具有细胞毒作用，也能抑制组织胺的释放，具有保肝和抗过敏等作用。
硒是人体必需的微量元素。硒参与合成人体内多种含硒酶和含硒蛋白。其中谷胱甘肽过氧化物酶，在生物体内催化氢过氧化物或脂质过氧化物转变为水或各种醇类，消除自由基对生物膜的攻击，保护生物膜免受氧化损伤；硒参与构成碘化甲状腺胺酸脱碘酶。在体内硒和维生素E协同，能够保护细胞膜，防止不饱和脂肪酸的氧化。微量硒具有防癌作用及保护肝脏的作用。硒能提高人体免疫，促进淋巴细胞的增殖及抗体和免疫球蛋白的合成。硒对结肠癌、皮肤癌、肝癌、乳腺癌等多种癌症具有明显的抑制和防护的作用，其在机体内的中间代谢产物甲基烯醇具有较强的抗癌活性。硒与维生素E、大蒜素、亚油酸、锗、锌等营养素具有协同抗氧化的功效，增加抗氧化活性。同时，硒具有减轻和缓解重金属毒性的作用。
灵芝孢子粉是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来极其细小的孢子，为灵芝的生殖细胞。大量的实验证实孢子粉具有较强的抗肿瘤、免疫调节、调节血脂血糖的功效以及对神经系统、心血管和呼吸系统有调节改善作用而受到社会大众的追捧。由于灵芝孢子粉极其细小，会随着空气流动而漫天飞舞，因此收集孢子粉就显得尤为重要了。在长期的实践中，人们根据当地的栽培习惯和实际经验发明了几种主要灵芝孢子粉的收集方法，具体如下：1、地膜法：在灵芝栽培后每行灵芝中间排放双层条状地膜，接收降落的孢子粉。在采收灵芝子实体时，用软毛刷把菌盖表面孢子粉刷入桶内，然后采收孢子粉，采收时只采收地膜粉，下层孢子粉弃之不用。该方法的优点是灵芝整体生长环境操作方便，成本低；缺点是收集的孢子粉中会含有一些沙土，孢子的纯度不够高。2、套筒采粉法：在灵芝将要成熟时，在灵芝菌柄基部套上0.02mm的超薄乙烯袋，袋底扎紧，袋口朝上，按灵芝的大小在袋内套上硬纸筒，高15cm，直径3-15cm，筒口上盖上一纸板，防止孢子粉逃逸。套袋采粉要注意通风，防止霉变，采粉期薄膜两头始终散开。该方法的优点是收集的孢子粉纯度极高，缺点是成本高。3、风机吸附法：灵芝孢子的比重较轻，用风机收集，200-300平方米的出芝棚使用两台孢子收集器。当灵芝孢子开始释放时，将两台孢子收集器背对着放置在出芝棚中间，距地面1-1.5米高，一般在晴天早晨4-8时、下午5-8时以及阴天全天打开电源收集灵芝孢子粉。该方法的优点是操作便利，缺点是收集的孢子粉中会混有一些灰尘。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供富硒灵芝孢子粉的采收方法。
本发明所述的富硒灵芝孢子粉的采收方法，是通过如下技术方案来实现的：
1)出芝架的制作：出芝架长宽高为300cm×50cm×180cm，每个出芝架由4层组成，出芝架底层与地面相距20cm，其余层的间距为40cm；
每个出芝架的顶部安装一个可拆卸的300cm×100cm平面板，每个出芝架的底部用食品级的PVC板做成凹型的槽，在槽的中间预留一个直径10cm的圆孔，各出芝架间预留70cm通道，两侧各预留50cm通道；
2)将灵芝菌袋直接摆放在层架上，灵芝菌袋接种口朝两边，每层摆放4至5层灵芝菌袋；
3)菌袋出芝后，喷洒富硒营养液，以均匀覆盖灵芝表面为准，控制出芝房温度26℃，湿度85％-90％，保证充足的通风促进灵芝的生长发育，待灵芝开盖生长，即将喷射孢子粉时，将300cm×100cm的平面板固定在出芝架顶部，用厚度为0.006cm的农用薄膜将整个出芝架罩住，薄膜下部与PVC板凹面用透明胶连接，待灵芝喷射孢子粉后，控制灵芝出芝房温度25℃、湿度70％-75％，直至孢子粉采收完毕；
本发明所述的富硒营养液，通过以下制备方法得到：
①原料准备：准备纯净水100份、L-硒蛋氨酸1.0份、玉米粉5份；
②将步骤①的原料混合后，放入蒸汽爆破罐，压力4MPa，加热至150℃，保持2min，然后在1-3s内快速释放压力得到浆液，在25℃按体积百分比为10％接入培养成熟的枯草芽孢杆菌液体菌种，放入发酵罐中，发酵罐中通入无菌空气，进行搅拌发酵，搅拌转速250r/min，发酵时间为4h，温度保持35-37℃，发酵结束后，迅速将温度升至70℃保持1.0h灭活，得到。
所述枯草芽孢杆菌液体菌种的培养方法为：采用三角瓶液体菌种培养，以下为重量百分数，将处理过的蛋白粉浆30.0-35.0％，KH2P04 1.0％,MgS042.0％，NaCl0.5％放入三角瓶中，搅拌均匀，调节pH至5.6，125℃灭菌10min，冷却至25℃，接入经过斜面培养的枯草芽孢杆菌菌种，28℃摇床培养60-100h，用于发酵罐接种。
本发明步骤1)所述的在槽的中间预留一个直径10cm的圆孔，是为了方便孢子粉的收集；所述的两侧各预留50cm通道，是便于灵芝的采收。
步骤3)所述的孢子粉采收，为保证孢子的新鲜、不长霉，优选每15天收集一次孢子粉。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1、现有技术中的富硒营养液，一般是使用无机硒，特别是亚硒酸钠和硒酸钠、亚硒酸钾和硒酸钾等，从金属矿藏的副产品中获得，无机硒有较大的毒性，且不易被吸收，作为营养液，吸收效果不好。本发明使用的硒蛋氨酸，是一种有机硒源，与无机硒相比，硒蛋氨酸具有安全、高效的优点，它能够替代部分蛋氨酸结合到体蛋白上形成一个可逆的硒贮存库，而不存在中毒危险。
2、硒蛋氨酸是自然界中硒以有机形式存在于植物和饲料谷物中的一种硒代氨基酸，谷类及饲料作物等植物生长不一定需要硒蛋氨酸，但随着蛋氨酸的合成它们能利用环境中特别是土壤中的亚硒酸盐和硒酸盐合成硒蛋氨酸。土壤中的可利用硒越多，植物中的硒蛋氨酸含量越高。目前，硒蛋氨酸主要来源于天然硒酵母，是硒酵母中有机硒的主要存在形式，但是硒蛋氨酸具有浓厚的酵母味道，直接水溶后喷洒，吸收效率低且会影响到最终产品的口感和风味。枯草芽胞杆菌，是芽胞杆菌属的一种，枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，相当于复合酶，本发明通过硒蛋氨酸混合枯草芽胞杆菌后发酵，利用硒蛋氨酸产品带有的酵母成分发酵，一方面利于硒元素进入灵芝，另一方面随着蛋氨酸的合成它们能利用环境中特别是土壤中的亚硒酸盐和硒酸盐合成硒蛋氨酸，还可以有效改善、化解酵母风味。
3、蒸汽爆破是利用高温高压水蒸气处理生物质原料，并通过瞬间泄压过程实现对原料的表面结构改变、组分分离和半纤维素降解，一般用于玉米秸秆、麦秆和木质生物质等原料的预处理。本发明通过“放入蒸汽爆破罐，压力4MPa，加热至150℃，保持2min，然后在1-3s内快速释放压力”，通过瞬间将压力降为0，一方面可以通过压力的瞬间改变来灭菌，另一方面可以有效细化、分散硒蛋氨酸，更加有利于灵芝的吸收。
4、现有技术一般都是在自然条件下，等待成熟灵芝孢子的弹射，孢子弹射的高峰一般是晴天早晨4-8时、下午5-8时以及阴天全天。本发明通过引入热胁迫，控制培养室所在房间的温度、湿度，一方面通过温度刺激促进成熟灵芝孢子的弹射量，另一方面，温度提高，可以缩短成熟灵芝的孢子弹射的释放期，进而缩短孢子的弹射的收集时间。
5、本发明灵芝孢子粉的损失小，纯度高(几乎可达100％)，质地饱满，与套袋相比，工作效率明显提高，并能有效利用上层空间。
具体实施方式
下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1-3：
为了验证本发明的技术效果，2016年，使用本发明技术生产3个批次的产品，每个批次的方法如下:
1)出芝架的制作：出芝架长宽高为300cm×50cm×180cm，每个出芝架由4层组成，出芝架底层与地面相距20cm，其余层的间距为40cm；
每个出芝架的顶部安装一个可拆卸的300cm×100cm平面板，每个出芝架的底部用食品级的PVC板做成凹型的槽，在槽的中间预留一个直径10cm的圆孔，各出芝架间预留70cm通道，两侧各预留50cm通道；
2)将灵芝菌袋直接摆放在层架上，灵芝菌袋接种口朝两边，每层摆放4至5层灵芝菌袋；
3)菌袋出芝后，喷洒富硒营养液，以均匀覆盖灵芝表面为准，控制出芝房温度26℃，湿度85％-90％，保证充足的通风促进灵芝的生长发育，待灵芝开盖生长，即将喷射孢子粉时，将300cm×100cm的平面板固定在出芝架顶部，用厚度为0.006cm的农用薄膜将整个出芝架罩住，薄膜下部与PVC板凹面用透明胶连接，待灵芝喷射孢子粉后，控制灵芝出芝房温度25℃、湿度70％-75％，每15天收集一次孢子粉，直至孢子粉采收完毕；
所述的富硒营养液，通过以下制备方法得到：
①原料准备：准备纯净水100份、L-硒蛋氨酸1.0份、玉米粉5份；
②将步骤①的原料混合后，放入蒸汽爆破罐，压力4MPa，加热至150℃，保持2min，然后在1-3s内快速释放压力得到浆液，在25℃按体积百分比为10％接入培养成熟的枯草芽孢杆菌液体菌种，放入发酵罐中，发酵罐中通入无菌空气，进行搅拌发酵，搅拌转速250r/min，发酵时间为4h，温度保持35-37℃，发酵结束后，迅速将温度升至70℃保持1.0h灭活，得到。
所述枯草芽孢杆菌液体菌种的培养方法为：采用三角瓶液体菌种培养，以下为重量百分数，将处理过的蛋白粉浆30.0-35.0％，KH2P04 1.0％,MgS042.0％，NaCl0.5％放入三角瓶中，搅拌均匀，调节pH至5.6，125℃灭菌10min，冷却至25℃，接入经过斜面培养的枯草芽孢杆菌菌种，28℃摇床培养60-100h，用于发酵罐接种。
对比例1：
1)出芝架的制作：出芝架长宽高为300cm×50cm×180cm，每个出芝架由4层组成，出芝架底层与地面相距20cm，其余层的间距为40cm；
每个出芝架的顶部安装一个可拆卸的300cm×100cm平面板，每个出芝架的底部用食品级的PVC板做成凹型的槽，在槽的中间预留一个直径10cm的圆孔，各出芝架间预留70cm通道，两侧各预留50cm通道；
2)将灵芝菌袋直接摆放在层架上，灵芝菌袋接种口朝两边，每层摆放4至5层灵芝菌袋；
3)菌袋出芝后，保证充足的通风促进灵芝的生长发育，待灵芝开盖生长，即将喷射孢子粉时，将300cm×100cm的平面板固定在出芝架顶部，用厚度为0.006cm的农用薄膜将整个出芝架罩住，薄膜下部与PVC板凹面用透明胶连接，待灵芝喷射孢子粉后，每15天收集一次孢子粉，直至孢子粉采收完毕。
对比例2：
方法同实施例1-3，将富硒营养液中L-硒蛋氨酸换成亚硒酸钠。
对比例3：
套袋收集灵芝孢子粉。
结果对比：
结果表明，通过本发明的技术可以缩短收粉时间、增加收粉量。从具体实施例可以看出，收粉时间相比对照组，缩短20-23天左右，收粉量增加50％以上，得到孢子粉中硒含量相比对比例提高300-400％以上。