本发明涉及病原菌抗药性检测技术领域，尤其涉及一种水稻苗期耐盐性的快速鉴定方法。
背景技术：
随着全球水资源危机以及土壤盐化问题的加剧,盐胁迫已经成为影响植物生长、导致粮食和经济作物减产的主要限制因素。水稻作为全世界人民最重要的口粮之一，培育耐盐碱水稻新品种是发展盐碱地农业的关键。而耐盐水稻新品种的选育其中最重要的就是水稻耐盐原始亲本的筛选。
目前对于水稻耐盐品种的筛选与鉴定主要集中在地上部的形态指标和生理指标，如株高、分蘖数、黄叶数、叶绿素含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量，然而，生理指标易受生长环境变化及检测方法影响，因而存在着许多不确定因素。形态指标具有直观、易调查的优点，其中最为直观简便的就是叶片黄化程度。此外，根系是农作物吸收营养物质的主要器官，是植物地上部分赖以生存的基础，也是对盐害反应最敏感的部位，因此水稻根系的研究对于水稻耐盐性具有重要的意义，但是由于水稻根系生长在土壤中，我们很难获得完整的根系，所以对根系的研究有很大的限制。
如何采用简单快速的处理方法，可以同时对以上两个地上部和地下部的形态指标进行观察监测从而实现对水稻耐盐品种的快速鉴定筛选值得探讨。
技术实现要素：
发明目的：为了克服现有技术中存在的缺陷，本发明提出了一种省时省力、操作简单便捷、使用器材常见，成本低廉，效果显著的水稻苗期耐盐性的快速鉴定方法。
技术方案：为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种水稻苗期耐盐性的快速鉴定方法，包括以下步骤：
(1)鉴定工具的准备：准备带有多个均匀播种孔的播种板，所述播种孔下部设有渗水孔；准备与播种板尺寸相配合的发芽盒，所述发芽盒上口方足以悬放1至多个播种板；
(2)待鉴定水稻种子的播种：挑选健康饱满的待鉴定水稻种子，将种子胚向下竖放入播种孔中进行播种，一孔一粒，每个待鉴定水稻品种播种30粒以上，三个重复，并分设对照组和处理组；
(3)待鉴定水稻种子的培养：将播种板置于发芽盒上，在发芽盒中注满蒸馏水，水渗入播种孔中淹没种子，置于30℃光照培养箱中浸泡催芽，采用模拟水稻正常生长的12h光照处理、12h黑暗处理再循环的间歇光照处理模式，其中光照处理的光照强度为2000lx；
(4)统计发芽苗数，苗长一叶一心后，处理组在发芽盒中注满3‰-6‰质量浓度的氯化钠溶液，对照组不添加氯化钠溶液，同时处理组和对照组从一叶一心期起都每三天加入总体积的千分之一体积的无土水培营养液至处理结束；
(5)步骤(4)处理开始后将光照培养箱内温度调节至25℃，继续采用模拟水稻正常生长的12h光照处理、12h黑暗处理再循环的间歇光照处理模式，其中光照处理的光照强度为2000lx；
(6)在上述条件中处理10天，10天后停止胁迫处理试验，每个重复挑选10株长势相近的单株，调查统计待鉴定水稻品种的黄叶数占总叶片数的百分比和待鉴定水稻品种的处理根数/对照根数，以黄叶数占总叶片数的百分比和处理根数/对照根数为指标评价待试品种苗期的耐盐性，其中黄叶数占总叶片数的百分比为0-30％为强耐盐型、31％-60％为中度耐盐型、61％-100％为盐敏感型；处理根数/对照根数为0.8-1为强耐盐型、0.51-0.79为中度耐盐型、0-0.5为盐敏感型。
在一些实施方式中，步骤(1)中所述播种板选用废旧PCR96孔板，底部削掉一截保证种子不掉出且能渗水。
更进一步的，发芽盒选用与废旧PCR96孔板相配合的尺寸为11.6cmx11.6cmx5cm。
在一些实施方式中，步骤(2)中每个待鉴定水稻品种播种48粒。
有益效果：本发明提供的一种水稻苗期耐盐性的快速鉴定方法，利用实验室常见器材，全过程在光照培养箱中进行，模拟水稻的最适宜生长条件，采用对水稻种子的水培以及盐胁迫处理，同时观察地上部分和地下部分的形态指标，通过黄叶数占总叶片数的百分比和处理根数/对照根数为指标评价待试品种苗期的耐盐性，从而实现对水稻苗期耐盐性能的快速鉴定，省时省力，操作简单便捷，使用器材常见且可废物利用，成本低廉，鉴定结果准确性高，可靠性强，实用价值显著，且培养体系有利于根系生长，便于根系的调查。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明：
实施例1：
A)试验材料：采用耐盐品种P1(宁资12bt3)和盐敏感品种P2(武运粳27号)为例进行说明。
B)实施方法：
(1)鉴定工具的准备：废旧96孔PCR板6块，吸水纸6张，尺寸为11.6cmx11.6cmx5cm的发芽盒6个，其中PCR板底部削掉一截保证种子不掉出且能渗水；
(2)待鉴定水稻种子的播种：挑选健康饱满的待鉴定水稻种子，将种子胚向下竖放入PCR板孔中进行播种，一孔一粒，每个待鉴定水稻品种播种48粒，种子按6*8排列，三个重复，并分设对照组和处理组；
(3)待鉴定水稻种子的培养：将播种过的PCR板置于发芽盒上，在发芽盒中注满蒸馏水，水渗入PCR孔内淹没种子，置于30℃光照培养箱中浸泡催芽，采用模拟水稻正常生长的12h光照处理、12h黑暗处理再循环的间歇光照处理模式，其中光照处理的光照强度为2000lx；
(4)统计发芽苗数，苗长一叶一心后，处理组在发芽盒中注满5‰质量浓度的氯化钠溶液，对照组不添加氯化钠溶液，处理组和对照组都每三天加入1mL无土水培营养液，购买自上海微谱化工技术服务有限公司；
(5)将光照培养箱内温度调节至25℃，继续采用模拟水稻正常生长的12h光照处理、12h黑暗处理再循环的间歇光照处理模式，其中光照处理的光照强度为2000lx；
(6)在上述条件中处理10天，10天后停止胁迫处理试验，每个重复挑选10株长势相近的单株，调查统计待鉴定水稻品种的黄叶数占总叶片数的百分比和待鉴定水稻品种的处理根数/对照根数。
C)评价方法：以黄叶数占总叶片数的百分比和处理根数/对照根数为指标评价待试品种苗期的耐盐性，其中黄叶数占总叶片数的百分比为0-30％为强耐盐型、31％-60％为中度耐盐型、61％-100％为盐敏感型；处理根数/对照根数为0.8-1为强耐盐型、0.51-0.79为中度耐盐型、0-0.5为盐敏感型。
D)试验结果：
从表1的数据结合评价方法可以看出，处理组中P1为耐盐性较强的材料，其黄叶数占植株总叶片数的20.25％，处理根数/对照根数为0.73。而P2材料为盐敏感型，其黄叶数占植株总叶片数的79.08％，处理根数/对照根数为0.47。此结果说明，水稻植株在受到盐胁迫后，黄叶数会增多，根系数目有所下降，耐盐性强的水稻品种所表现的盐害程度较轻。
表1 P1和P2材料处理间表型差异
应当指出，以上具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。