本发明属于组培生产技术领域，具体涉及一种甜叶菊组培方法。
背景技术：
甜叶菊，是原产于南美洲巴拉圭的菊科甜叶菊属多年生草本植物，由于甜叶菊所含的甜菊糖苷有制血糖、降低血压、促进新陈代谢以及治疗糖尿病、肥胖症、调节胃酸、恢复神经疲劳的功效，并且物理、化学性质稳定，无发酵性特点，其制品有比较长的保质期，特别适合作为糖尿病、高血压等病患者食品的甜味剂、保健品添加剂等，具有广阔的市场前景和应用范围。
自我国于20世纪70年代年引种甜叶菊并成功扩大种植以来，已经有30余年的历史，但由于甜菊的繁育特性，传统的繁殖方式包括种子、扦插方式。但是用种子繁育的方法，成活率低；而扦插繁殖导致品质退化，并且这两种繁育方式时间长、需要大量以茎尖、带腋芽的茎段、种子等材料。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种甜叶菊组培方法，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、有利于工业化生产和自动化监控，大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。
本发明提供了如下的技术方案：
一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，
1）抑菌液的配制，将福美锌400-600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400-600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；
2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长15-20 mm，宽10-15 mm的叶片条；
3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水冲洗2-4次，每次3-5分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡10-20分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水洗净；
4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在28-30℃下，光暗培养15-20天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.1-0.3 mg/L+6-苄基嘌呤0.4-1.0 mg/L+琼脂8-10 g/L；
5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至3-5 cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在28-30℃下，光暗培养20-25天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.1-0.2 mg/L+萘乙酸0.1-0.2 mg/L+琼脂5-7 g/L+硫酸亚铁0.5-1.5 mg/L；
优选的，所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500 ml。
优选的，所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。
本发明提供的甜叶菊组织培养方法，取材容易，可以迅速扩繁出大量种源，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、有利于工业化生产和自动化监控，大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。
具体实施方式
实施例1
一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，
1）抑菌液的配制，将福美锌400倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；
2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长15 mm，宽10 mm的叶片条；
3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡20分钟，用无菌水冲洗2次，每次3分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡10-分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡20分钟，用无菌水洗净；
4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在28℃下，光暗培养15天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.1 mg/L+6-苄基嘌呤0.4 mg/L+琼脂8 g/L；
5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至3 cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在28℃下，光暗培养20天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.1 mg/L+萘乙酸0.1 mg/L+琼脂5 g/L+硫酸亚铁0.5 mg/L；
所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500 ml。
所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。
实施例2
一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，
1）抑菌液的配制，将福美锌500倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液500倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；
2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长18 mm，宽13 mm的叶片条；
3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡25分钟，用无菌水冲洗3次，每次4分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡15分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡25分钟，用无菌水洗净；
4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在29℃下，光暗培养18天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.2 mg/L+6-苄基嘌呤0.7 mg/L+琼脂9 g/L；
5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至4 cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在29℃下，光暗培养23天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.15 mg/L+萘乙酸0.15 mg/L+琼脂6 g/L+硫酸亚铁1.0 mg/L；
所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500 ml。
所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。
实施例3
一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，
1）抑菌液的配制，将福美锌600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；
2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长20 mm，宽15 mm的叶片条；
3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡30分钟，用无菌水冲洗4次，每次5分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡20分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡30分钟，用无菌水洗净；
4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在30℃下，光暗培养20天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.3 mg/L+6-苄基嘌呤1.0 mg/L+琼脂10 g/L；
5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至5 cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在30℃下，光暗培养25天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.2 mg/L+萘乙酸0.2 mg/L+琼脂7 g/L+硫酸亚铁1.5 mg/L；
所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500 ml。
所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。