本发明涉及花卉组培繁育领域，具体涉及一种康乃馨组培快繁方法。
背景技术：
康乃馨具有美容养颜，安神止渴，清心明目，消炎除烦，生津润喉，健胃消积。对治疗头痛牙痛有明显疗效。含人体所需的各种微量元素，能加速血液循环，促进新陈代谢，具有清心除燥，排毒养颜，调节内分泌，同时具有固肾益精，治虚劳，咳嗽、消渴之功效。清肝凉血，美白皮肤，祛斑除皱。能改善血液循环、增强肌体的新陈代谢，具有清心除燥、排毒养颜、延缓衰老、调节女性内分泌系统、补肾担神、健胃开胃、调节血脂减肥等功效。在这个大家越来越关注健康的时代，食用康乃馨的需求也越来越大。人们也越来越关心其中的营养价值。
人工繁殖康乃馨既可以用种子繁殖也可用根茎繁殖，但是种子繁殖其繁殖系数太低，主要是因为康乃馨对生长环境条件较为苛刻，萌芽率不高，种子的生命力差，成活率低，培养时间长，不稳定，用根茎繁殖则需要大量根茎材料，繁殖成本高，而且品质易发生退化，满足不了市场对其产量和品质的需求。
技术实现要素：
针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种康乃馨组培快繁方法，该种组培繁育方法简单易行，不受季节限制，能有效提高康乃馨种子萌发率，缩短培养时间，提高种子生命力、生根率及移栽成活率，解决了现有技术中康乃馨供不应求以及品质退化的问题。
为了达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现的：
一种康乃馨组培快繁方法，按照以下步骤进行：
(1)种子消毒灭菌处理：选取新鲜健康的康乃馨种子，清洗后进行消毒灭菌处理；
(2)初代培养：将经步骤(1)处理后的康乃馨种子接种至发芽培养基中进行初代培养，促使其发芽，直至长出幼苗，该发芽培养基的所含成分为1/2ms+dkw+0.4-0.6mg/l的2，4-二氯苯氧乙酸+0.3-0.7mg/l的萘乙酸+0.3-0.7mg/l的6苄基嘌呤+8-12g/l的乳糖；
(3)愈伤组织分化芽：切取步骤(2)得到的幼苗茎段接种到诱导培养基中进行继代培养，直至愈伤组织上分化出丛生芽，待丛生芽长至5cm以上形成丛生苗后再接种至生根培养基中；
(4)生根培养：将丛生苗接种至生根培养基中进行生根培养，促使其生根长出叶片，该生根培养是以ms作为基本培养基，另外添加4-8g/l的杜仲叶片提取液；
(5)移栽炼苗：选取步骤(4)中苗高大于6cm，叶片数大于6片，不定根数多于10条的壮苗连同培养基置于常温下6-8天，保持空气湿度在60-80％之间，待其长出新叶再移栽至基质土壤中即可。
进一步地，所述消毒灭菌处理方法是先将清洗后的种子使用体积浓度为20-40％乐果乳剂稀释400-600倍液浸泡15-25min，浸泡结束后，用流动水冲洗10-20s，然后再用质量浓度为3％的次氯酸溶液浸泡20-30min，最后用无菌水冲洗3-5遍，并结合用无菌滤纸吸干水分备用。
进一步地，上述初代培养的培养环境条件为：培养温度20±2℃，光照强度1600-2000lux，光照时间11±1h/d，培养基ph值5.8-7.0。
进一步地，上述的诱导培养基是以1/2b5+dkw为基本培养基，另外加入0.4-0.8mg/l的吲哚丁酸+0.2-0.6mg/l的萘乙酸+10-20g/l的乳糖+6-8g/l琼脂。
进一步地，上述愈伤组织分化芽的培养环境条件为：培养温度21±2℃，光照强度1800-2200lux，光照时间12±1h/d，培养基ph值5.6-6.4。
进一步地，上述的生根培养基中还添加0.4-0.8mg/l的吲哚丁酸+0.4-0.8mg/l的萘乙酸+20-30g/l的甘露醇+10-20g/l的乳糖+6-10g/l蛋白胨。
进一步地，上述生根培养的培养环境条件为：培养温度22±2℃，光照强度2000-3000lux，光照时间12±1h/d，培养基ph值5.6-6.4。
进一步地，上述的杜仲叶片提取液通过以下步骤制得：取适量杜仲叶片加入相对于杜仲叶片质量2～4倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1～2h，过滤得滤渣，将滤渣再次加入相对于滤渣质量2～4倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1～2h，过滤除杂，合并过滤液，除去乙醇，浓缩至原体积的1/3-1/2后即得。
优选地，所述基质土壤按重量百分比计包括：腐叶土50％、松木屑15％、蘑菇泥25％和蛭石10％。
本发明具有如下的有益效果：
(1)本发明的康乃馨组培快繁方法通过组织培养技术以及对培养基成分和植物生长调节剂的合理调配，有效地提高种子生命力、生根率及移栽成活率，解决了现有技术中康乃馨供不应求以及品质退化的问题，适宜推广应用；
(2)本发明采用离体快速繁殖技术对康乃馨进行试管内开花诱导，不仅可以满足人们求变、求新、求异的精神需求，而且还可以为试管康乃馨花卉产业向专业化、规模化、产业化发展提供有益的理论参考，以满足市场需求；
(3)本发明的康乃馨组培快繁方法简单易行，不受季节限制，生产育苗成本降低，能大大提高了康乃馨的种子萌发率，缩短了花卉培养时间，使其萌发率达到98％以上，相比传统的人工繁殖花卉培养时间缩短了一半。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步描述，以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
实施例1
一种康乃馨组培快繁方法，按照以下步骤进行：
(1)种子消毒灭菌处理：选取新鲜健康的康乃馨种子，清洗后进行消毒灭菌处理，具体是先将清洗后的种子使用体积浓度为20％乐果乳剂稀释400倍液浸泡15min，浸泡结束后，用流动水冲洗10s，然后再用质量浓度为3％的次氯酸溶液浸泡20min，最后用无菌水冲洗3遍，并结合用无菌滤纸吸干水分备用；
(2)初代培养：将经步骤(1)处理后的康乃馨种子接种至发芽培养基中进行初代培养，促使其发芽，直至长出幼苗，该发芽培养基的所含成分为1/2ms+dkw+0.4mg/l的2，4-二氯苯氧乙酸+0.3mg/l的萘乙酸+0.3mg/l的6苄基嘌呤+8g/l的乳糖；
初代培养的培养环境条件为：培养温度18℃，光照强度1600lux，光照时间10h/d，培养基ph值5.8；
(3)愈伤组织分化芽：切取步骤(2)得到的幼苗茎段接种到诱导培养基中进行继代培养，直至愈伤组织上分化出丛生芽，待丛生芽长至5cm以上形成丛生苗后再接种至生根培养基中；
上述的诱导培养基是以1/2b5+dkw为基本培养基，另外加入0.4mg/l的吲哚丁酸+0.2mg/l的萘乙酸+10g/l的乳糖+6g/l琼脂；
培养环境条件为：培养温度19℃，光照强度1800lux，光照时间11h/d，培养基ph值5.6；
(4)生根培养：将丛生苗接种至生根培养基中进行生根培养，促使其生根长出叶片，该生根培养是以ms作为基本培养基，另外添加4g/l的杜仲叶片提取液+0.4mg/l的吲哚丁酸+0.4mg/l的萘乙酸+20g/l的甘露醇+10g/l的乳糖+6g/l蛋白胨；
上述生根培养的培养环境条件为：培养温度20℃，光照强度2000lux，光照时间11h/d，培养基ph值5.6；
上述的杜仲叶片提取液通过以下步骤制得：取500g杜仲叶片加入相对于杜仲叶片质量2倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1h，过滤得滤渣，将滤渣再次加入相对于滤渣质量2倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1h，过滤除杂，合并过滤液，除去乙醇，浓缩至原体积的1/3后即得；
(5)移栽炼苗：选取步骤(4)中苗高7cm，叶片数7片，不定根数12条的壮苗连同培养基置于常温下6天，保持空气湿度在60％之间，待其长出新叶再移栽至基质土壤中；
其中，上述基质土壤按重量百分比计包括：腐叶土50％、松木屑15％、蘑菇泥25％和蛭石10％。
实施例2
一种康乃馨组培快繁方法，按照以下步骤进行：
(1)种子消毒灭菌处理：选取新鲜健康的康乃馨种子，清洗后进行消毒灭菌处理，具体是先将清洗后的种子使用体积浓度为30％乐果乳剂稀释500倍液浸泡20min，浸泡结束后，用流动水冲洗15s，然后再用质量浓度为3％的次氯酸溶液浸泡25min，最后用无菌水冲洗4遍，并结合用无菌滤纸吸干水分备用；
(2)初代培养：将经步骤(1)处理后的康乃馨种子接种至发芽培养基中进行初代培养，促使其发芽，直至长出幼苗，该发芽培养基的所含成分为1/2ms+dkw+0.5mg/l的2，4-二氯苯氧乙酸+0.5mg/l的萘乙酸+0.5mg/l的6苄基嘌呤+10g/l的乳糖；
初代培养的培养环境条件为：培养温度20℃，光照强度1800lux，光照时间11h/d，培养基ph值6.4；
(3)愈伤组织分化芽：切取步骤(2)得到的幼苗茎段接种到诱导培养基中进行继代培养，直至愈伤组织上分化出丛生芽，待丛生芽长至5cm以上形成丛生苗后再接种至生根培养基中；
上述的诱导培养基是以1/2b5+dkw为基本培养基，另外加入0.6mg/l的吲哚丁酸+0.4mg/l的萘乙酸+15g/l的乳糖+7g/l琼脂；
培养环境条件为：培养温度21℃，光照强度2000lux，光照时间12h/d，培养基ph值6.0；
(4)生根培养：将丛生苗接种至生根培养基中进行生根培养，促使其生根长出叶片，该生根培养是以ms作为基本培养基，另外添加6g/l的杜仲叶片提取液+0.6mg/l的吲哚丁酸+0.6mg/l的萘乙酸+25g/l的甘露醇+15g/l的乳糖+8g/l蛋白胨；
上述生根培养的培养环境条件为：培养温度22℃，光照强度2000lux，光照时间12h/d，培养基ph值6.0；
上述的杜仲叶片提取液通过以下步骤制得：取800kg杜仲叶片加入相对于杜仲叶片质量3倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1.5h，过滤得滤渣，将滤渣再次加入相对于滤渣质量3倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流1.5h，过滤除杂，合并过滤液，除去乙醇，浓缩至原体积的1/3后即得；
(5)移栽炼苗：选取步骤(4)中苗高8cm，叶片数8片，不定根数11条的壮苗连同培养基置于常温下7天，保持空气湿度在70％之间，待其长出新叶再移栽至基质土壤中；
其中，上述基质土壤按重量百分比计包括：腐叶土50％、松木屑15％、蘑菇泥25％和蛭石10％。
实施例3
一种康乃馨组培快繁方法，按照以下步骤进行：
(1)种子消毒灭菌处理：选取新鲜健康的康乃馨种子，清洗后进行消毒灭菌处理，具体是先将清洗后的种子使用体积浓度为40％乐果乳剂稀释600倍液浸泡25min，浸泡结束后，用流动水冲洗20s，然后再用质量浓度为3％的次氯酸溶液浸泡30min，最后用无菌水冲洗5遍，并结合用无菌滤纸吸干水分备用；
(2)初代培养：将经步骤(1)处理后的康乃馨种子接种至发芽培养基中进行初代培养，促使其发芽，直至长出幼苗，该发芽培养基的所含成分为1/2ms+dkw+0.6mg/l的2，4-二氯苯氧乙酸+0.7mg/l的萘乙酸+0.7mg/l的6苄基嘌呤+12g/l的乳糖；
初代培养的培养环境条件为：培养温度22℃，光照强度2000lux，光照时间12h/d，培养基ph值7.0；
(3)愈伤组织分化芽：切取步骤(2)得到的幼苗茎段接种到诱导培养基中进行继代培养，直至愈伤组织上分化出丛生芽，待丛生芽长至5cm以上形成丛生苗后再接种至生根培养基中；
上述的诱导培养基是以1/2b5+dkw为基本培养基，另外加入0.8mg/l的吲哚丁酸+0.6mg/l的萘乙酸+20g/l的乳糖+8g/l琼脂；
培养环境条件为：培养温度23℃，光照强度2200lux，光照时间13h/d，培养基ph值6.4；
(4)生根培养：将丛生苗接种至生根培养基中进行生根培养，促使其生根长出叶片，该生根培养是以ms作为基本培养基，另外添加8g/l的杜仲叶片提取液+0.8mg/l的吲哚丁酸+0.8mg/l的萘乙酸+30g/l的甘露醇+20g/l的乳糖+10g/l蛋白胨；
上述生根培养的培养环境条件为：培养温度24℃，光照强度3000lux，光照时间13h/d，培养基ph值6.4；
上述的杜仲叶片提取液通过以下步骤制得：取1kg杜仲叶片加入相对于杜仲叶片质量4倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流2h，过滤得滤渣，将滤渣再次加入相对于滤渣质量4倍的醇浓度为95％的乙醇，加热回流2h，过滤除杂，合并过滤液，除去乙醇，浓缩至原体积的1/2后即得；
(5)移栽炼苗：选取步骤(4)中苗高8cm，叶片数7片，不定根数12条的壮苗连同培养基置于常温下8天，保持空气湿度在80％之间，待其长出新叶再移栽至基质土壤中；
其中，上述基质土壤按重量百分比计包括：腐叶土50％、松木屑15％、蘑菇泥25％和蛭石10％。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。