本发明涉及农业生物技术领域，尤其是涉及用于一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法。
背景技术：
当前，人们越来越重视环境保护和食品安全。绿色发展已经成为农药产业的大趋势，传统农药中的乳油、粉剂等剂型正被逐步淘汰，未来农药剂型省力化、经济化和精细化为发展目标，开始向水基制剂、颗粒剂和缓释剂方向发展。通常农药剂型的选择除了考虑生物活性成分本身的物理特性和作用方式外，还要综合考虑作物防治对象、当地环境气候、农药加工成本和市场竞争力等因素，因此以省力、经济、环保为代表的悬浮剂和水分散粒剂成为农药制剂研究的重点。水悬浮剂以水为基质，体系不含有机溶剂毒性相对较小、药害低，在贮存和运输方面有很大的优势，加工成本低，使用方便，对环境安全，近几年成为农药行业的新宠，正逐渐取代乳油、可湿性粉剂等传统剂型，成为国内第三大农药剂型。
悬浮剂是将不溶与水的农药固体活性成分、适当的润湿剂、分散剂和其它添加剂，通过砂磨机研磨，加工成平均粒径＜5μm微粒，农药活性成分在水中呈现分散悬浮状态，从而使整个体系呈稳定的悬浮液体制剂。高品质的悬浮剂，粒径一般控制在10μm以下、d90≤5μm，才能有高的悬浮率。悬浮剂一般使用方式是用水稀释后作物叶面喷雾，悬浮剂在防治祀标上能达到较大的均匀覆盖度、展着性和附着性，一般情况下，不同的农药剂型对作物的防治效果是不同的。目前国内生产的悬浮剂产品质量问题比较严重：物理稳定性不好，胆存中容易发生分层、沉淀、结块等现象，且由于表面活性剂选择的局限性，导致悬浮剂在水中不能均匀分散，其药效达不到预期要求，这些质量问题都严重阻碍了悬浮剂在农业中的推广和应用。因此，制备体系稳定的农药悬浮剂方具有较大的市场潜力。
现有技术如授权公告号为cn103348983b的中国发明专利，公开了一种含啶酰菌胺和醚菌酯的悬浮剂或悬乳剂，其包含杀菌有效量的平均粒径为0.8-1.3μm的啶酰菌胺和醚菌酯，以及其农业上可接受的分散剂，还包含杀菌有效量平均粒径为0.8-1.3μm的含啶酰菌胺和醚菌酯，和农业上可接受的分散剂的悬浮剂。通过制备平均粒径为0.8-1.3μm的包含啶酰菌胺和醚菌酯悬浮剂和悬乳剂的含水系统，相比含有平均粒径大于为1.3μm的类似配制的包含啶酰菌胺和醚菌酯悬浮剂和悬乳剂的含水系统来说，其显著改良了物理储存稳定性和药效。但是该悬乳剂用啶酰菌胺和醚菌酯属于化学农药，对环境和人类健康存在有一定的威胁。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法，该制备方法生产成本低，能耗低，能够提高复合菌剂的缓释性和悬浮稳定性，延长悬乳剂的贮藏期，得到的悬乳剂流动性好，静置不分层，在水中呈云雾状自动分散无可见颗粒下沉，降低悬乳剂的使用条件。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：
一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法，包括复合菌剂微球制备、植物源杀菌剂微球制备、悬乳剂的制备，其具体步骤为：
复合菌剂微球制备：将微孔淀粉灭菌后，按照微孔淀粉和复合菌剂孢子粉的重量比为1:4-5将微孔淀粉和复合菌剂孢子粉混合均匀，加入无菌水，在转速为90-130r/min、温度为25-30℃的无菌环境下振荡培养40-60min，再加入海藻酸钠和聚乙烯醇，在120-180r/min下磁力搅拌均匀得混合液，将混合液在30-40min内恒速滴加到体积比为1:0.67-0.82的无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中，在30-35℃的温度条件下交联固化15-25h得到凝胶球，再于-4至0℃下冻干至水分含量≤5％，即得复合菌剂微球，备用，上述海藻酸钠为复合菌剂孢子粉重量的0.4-0.5倍，聚乙烯醇为复合菌剂孢子粉重量的2-3倍，该步骤先用微孔淀粉吸附复合菌剂孢子粉，然后通过海藻酸钠和壳聚糖的交联固化，形成胶囊载体的基础多孔结构，不仅能够延长微生物复合菌剂的微生物存活时间长，产品稳定，而且使微生物复合菌剂即使在溶胀时也无法迅速的释放出来，从而达到了更好的缓释效果，且使得膜内包埋的复合菌剂及开放条件下外界的微生物能利用膜体释放的碳源进行一定的增殖及维持正常生理生化活性，使得胶囊中的微生物在释放环境中后进行了增殖；
植物源杀菌剂微球制备：将0.7-1.1重量份聚乳酸和10-15重量份二氯甲烷置于冰水浴中，使聚乳酸溶解，然后加入0.5-0.6重量份植物源杀菌剂，搅拌至完全溶解，再加入浓度为10-15%的明胶水溶液，在分散机中剪切乳化，最后在30-40℃的条件下避光进行搅拌，直至无二氯甲烷味，收集固形物干燥即得植物源杀菌剂微球，上述明胶水溶液和二氯甲烷的体积比为1:0.08-0.12，该制备方法使得植物源杀菌剂和聚乳酸通过化学键进行结合而被包裹于微球内部，得到的植物源微球为圆整、表面较为光滑的实心小球，其直径合适、载药量和包封率高，能够抵抗光对植物源杀菌剂的降解，大大提高植物源杀菌剂的稳定性，提高其杀菌性能，且能延长悬乳剂的体系稳定性和贮存期；
悬乳剂的制备：取5-10重量份复合菌剂微球、5-10重量份植物源杀菌剂微球、0.04-0.06重量份分散剂、0.02-0.04重量份硅酸镁铝、0.04-0.06重量份乙二醇、90-110重量份水，搅拌混合均匀，即得悬乳剂，上述分散剂为重量比为1:0.8-1.2:0.01-0.02的f2、f6和齐墩果酸混合物，该分散剂中各成分能够相互增益，不仅可使悬浮液微球粒子生成具有排斥作用的扩散双电层，还可以吸附于微球表面形成致密的吸附层，附加产生空间位阻作用，提高悬浮液的悬浮稳定性，且该分散剂分子中存在大量的醚氧基团，较易与水分子形成氢键，可在微球表面形成连续水合膜，进而减慢颗粒沉降的速度以及减少板结的形成，大大延长悬乳剂的贮藏期，该悬乳剂流动性好，静置不分层，在水中呈云雾状自动分散无可见颗粒下沉，热贮和冷贮稳定性好，大大延长悬乳剂的贮藏期，降低悬乳剂的使用条件。
优选的，复合菌剂微球制备步骤中复合菌剂孢子粉中含有解淀粉芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和寡雄腐霉，其重量比为1:0.7-1.1:0.3-0.6:0.8-1.8，该复合菌剂孢子粉中各微生物种类搭配合理，能够相互增益，不仅能防止鳞翅目虫害，减少害虫咬噬为病原菌入侵提供的“便利通道”，而且能预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、灰葡萄孢菌、黑根霉和柱孢霉等病原菌引起的植物病害，此外还能分泌耐高温抗菌物质、蛋白酶和生长素等，具有高效、广谱病虫害防治的作用，同时具有促根催芽作用，能促进作物生长、提高作物产量和品质。
作为优选，复合菌剂微球制备步骤中无菌水中含有0-0.05mm全氟辛酸和0-0.02mm1,12-十二烷二醇，该全氟辛酸和1,12-十二烷二醇的加入能够使淀粉链长变短而发生受到破坏、断裂、降解，改变微孔淀粉的链长，提高微孔淀粉的比表面积和孔容积，进而提高其吸附菌剂的性能，同时能够使得微孔淀粉和菌剂间存在一定的化学键作用力，进而加固微孔淀粉对菌剂的吸附力，提高微孔淀粉的缓释性能，最终提高微生物复合菌剂的使用期限。
作为优选，复合菌剂微球制备步骤中无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中无菌氯化钙溶液和无菌硼酸溶液的浓度均为3-5%，其体积比为1:0.67-0.82，海藻酸钠上的α-l-古罗糖醛酸和氯化钙的交联反应迅速，有利于成囊壁材成型，且易形成硬度较高的凝胶，聚乙烯醇与硼酸反应会形成牢固的化学键，在水环境中稳定性好，同时竹炭或微孔淀粉上的-oh参与了聚乙烯醇与硼酸间的配位聚合反应，使得聚乙烯醇链得以固定于竹炭或微孔淀粉颗粒表面从而获得支撑力，增加胶囊硬度。
作为优选，植物源微球制备步骤中植物源杀菌剂的成分及其重量份为：柠檬精油1-10份、茶皂素2-10份、皂荚甙2-10份、紫檀素1-3份。该杀菌剂中各原料的合理配伍，能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果，原料取自天然植物，不含化学添加物，产品安全，无副作用，产品及产品副产物不会对人体无毒、无害、无副作用、安全性高，且不会造成环境污染。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明悬乳剂的制备方法生产成本低，能耗低，易于操作，易于工业化生产，具有较大的发展潜力；2）该制备方法能够提高微孔淀粉的吸附量和吸附力，提高复合菌剂的缓释性能，最终提高悬乳剂的使用期限，且能使得悬乳剂中的微生物在释放环境中后进行了增殖；3）该制备方法用分散剂各成分能够相互增益，可提高悬浮液的悬浮稳定性，且可在微球表面形成连续水合膜，进而减慢颗粒沉降的速度以及减少板结的形成，大大延长悬乳剂的贮藏期；4）本发明制备方法得到的悬乳剂流动性好，静置不分层，在水中呈云雾状自动分散无可见颗粒下沉，热贮和冷贮稳定性好，大大延长悬乳剂的贮藏期，降低悬乳剂的使用条件。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明：
实施例1：
一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法，包括复合菌剂微球制备、植物源杀菌剂微球制备、悬乳剂的制备，其具体步骤为：
1）复合菌剂微球制备：将微孔淀粉灭菌后，按照微孔淀粉和复合菌剂孢子粉的重量比为1:5将微孔淀粉和复合菌剂孢子粉混合均匀，加入无菌水，在转速为90r/min、温度为30℃的无菌环境下振荡培养40min，再加入海藻酸钠和聚乙烯醇，在180r/min下磁力搅拌均匀得混合液，将混合液在30min内恒速滴加到体积比为1:0.82的无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中，在30℃的温度条件下交联固化25h得到凝胶球，再于-4℃下冻干至水分含量≤5％，即得复合菌剂微球，备用，上述海藻酸钠为复合菌剂孢子粉重量的0.5倍，聚乙烯醇为复合菌剂孢子粉重量的2倍，该步骤先用微孔淀粉吸附复合菌剂孢子粉，然后通过海藻酸钠和壳聚糖的交联固化，形成胶囊载体的基础多孔结构，不仅能够延长微生物复合菌剂的微生物存活时间长，产品稳定，而且使微生物复合菌剂即使在溶胀时也无法迅速的释放出来，从而达到了更好的缓释效果，且使得膜内包埋的复合菌剂及开放条件下外界的微生物能利用膜体释放的碳源进行一定的增殖及维持正常生理生化活性，使得胶囊中的微生物在释放环境中后进行了增殖；
2）植物源杀菌剂微球制备：将1.1重量份聚乳酸和10重量份二氯甲烷置于冰水浴中，使聚乳酸溶解，然后加入0.6重量份植物源杀菌剂，搅拌至完全溶解，再加入浓度为10%的明胶水溶液，在分散机中剪切乳化，最后在40℃的条件下避光进行搅拌，直至无二氯甲烷味，收集固形物干燥即得植物源杀菌剂微球，上述明胶水溶液和二氯甲烷的体积比为1:0.08，该制备方法使得植物源杀菌剂和聚乳酸通过化学键进行结合而被包裹于微球内部，得到的植物源微球为圆整、表面较为光滑的实心小球，其直径合适、载药量和包封率高，能够抵抗光对植物源杀菌剂的降解，大大提高植物源杀菌剂的稳定性，提高其杀菌性能，且能延长悬乳剂的体系稳定性和贮存期；
3）悬乳剂的制备：取10重量份复合菌剂微球、5重量份植物源杀菌剂微球、0.06重量份分散剂、0.02重量份硅酸镁铝、0.06重量份乙二醇、90重量份水，搅拌混合均匀，即得悬乳剂，上述分散剂为重量比为1:1.2:0.01的f2、f6和齐墩果酸混合物，该分散剂中各成分能够相互增益，不仅可使悬浮液微球粒子生成具有排斥作用的扩散双电层，还可以吸附于微球表面形成致密的吸附层，附加产生空间位阻作用，提高悬浮液的悬浮稳定性，且该分散剂分子中存在大量的醚氧基团，较易与水分子形成氢键，可在微球表面形成连续水合膜，进而减慢颗粒沉降的速度以及减少板结的形成，大大延长悬乳剂的贮藏期，该悬乳剂流动性好，静置不分层，在水中呈云雾状自动分散无可见颗粒下沉，热贮和冷贮稳定性好，大大延长悬乳剂的贮藏期，降低悬乳剂的使用条件。
上述复合菌剂微球制备步骤中复合菌剂孢子粉中含有解淀粉芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和寡雄腐霉，其重量比为1:1.1:0.3:1.8，该复合菌剂孢子粉中各微生物种类搭配合理，能够相互增益，不仅能防止鳞翅目虫害，减少害虫咬噬为病原菌入侵提供的“便利通道”，而且能预防由腐霉菌、立枯丝核菌、镰刀菌、灰葡萄孢菌、黑根霉和柱孢霉等病原菌引起的植物病害，此外还能分泌耐高温抗菌物质、蛋白酶和生长素等，具有高效、广谱病虫害防治的作用，同时具有促根催芽作用，能促进作物生长、提高作物产量和品质。
上述复合菌剂微球制备步骤中无菌水中含0-0.02mm1,12-十二烷二醇，该全氟辛酸和1,12-十二烷二醇的加入能够使淀粉链长变短而发生受到破坏、断裂、降解，改变微孔淀粉的链长，提高微孔淀粉的比表面积和孔容积，进而提高其吸附菌剂的性能，同时能够使得微孔淀粉和菌剂间存在一定的化学键作用力，进而加固微孔淀粉对菌剂的吸附力，提高微孔淀粉的缓释性能，最终提高微生物复合菌剂的使用期限。
上述复合菌剂微球制备步骤中无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中无菌氯化钙溶液和无菌硼酸溶液的浓度均为3%，其体积比为1:0.82，海藻酸钠上的α-l-古罗糖醛酸和氯化钙的交联反应迅速，有利于成囊壁材成型，且易形成硬度较高的凝胶，聚乙烯醇与硼酸反应会形成牢固的化学键，在水环境中稳定性好，同时竹炭或微孔淀粉上的-oh参与了聚乙烯醇与硼酸间的配位聚合反应，使得聚乙烯醇链得以固定于竹炭或微孔淀粉颗粒表面从而获得支撑力，增加胶囊硬度。
上述植物源微球制备步骤中植物源杀菌剂的成分及其重量份为：柠檬精油1份、茶皂素10份、皂荚甙2份、紫檀素3份。该杀菌剂中各原料的合理配伍，能达到更好的杀菌、抗菌、抑菌的协同效果，原料取自天然植物，不含化学添加物，产品安全，无副作用，产品及产品副产物不会对人体无毒、无害、无副作用、安全性高，且不会造成环境污染。
实施例2：
一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法，包括复合菌剂微球制备、植物源杀菌剂微球制备、悬乳剂的制备，其具体步骤为：
1）复合菌剂微球制备：将微孔淀粉灭菌后，按照微孔淀粉和复合菌剂孢子粉的重量比为1:4将微孔淀粉和复合菌剂孢子粉混合均匀，加入无菌水，在转速为130r/min、温度为25℃的无菌环境下振荡培养60min，再加入海藻酸钠和聚乙烯醇，在120r/min下磁力搅拌均匀得混合液，将混合液在40min内恒速滴加到体积比为1:0.67的无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中，在35℃的温度条件下交联固化15h得到凝胶球，再于0℃下冻干至水分含量≤5％，即得复合菌剂微球，备用，上述海藻酸钠为复合菌剂孢子粉重量的0.4倍，聚乙烯醇为复合菌剂孢子粉重量的3倍；
2）植物源杀菌剂微球制备：将0.7重量份聚乳酸和15重量份二氯甲烷置于冰水浴中，使聚乳酸溶解，然后加入0.5重量份植物源杀菌剂，搅拌至完全溶解，再加入浓度为15%的明胶水溶液，在分散机中剪切乳化，最后在30℃的条件下避光进行搅拌，直至无二氯甲烷味，收集固形物干燥即得植物源杀菌剂微球，上述明胶水溶液和二氯甲烷的体积比为1:0.12；
3）悬乳剂的制备：取5重量份复合菌剂微球、10重量份植物源杀菌剂微球、0.04重量份分散剂、0.04重量份硅酸镁铝、0.04重量份乙二醇、110重量份水，搅拌混合均匀，即得悬乳剂，上述分散剂为重量比为1:0.8:0.02的f2、f6和齐墩果酸混合物。
上述复合菌剂微球制备步骤中复合菌剂孢子粉中含有解淀粉芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和寡雄腐霉，其重量比为1:0.7:0.6:0.8；无菌水中含有0.05mm全氟辛酸；无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中无菌氯化钙溶液和无菌硼酸溶液的浓度均为5%，其体积比为1:0.67。
上述植物源微球制备步骤中植物源杀菌剂的成分及其重量份为：柠檬精油10份、茶皂素2份、皂荚甙10份、紫檀素1份。
实施例3：
一种植物杀菌用的悬乳剂的制备方法，包括复合菌剂微球制备、植物源杀菌剂微球制备、悬乳剂的制备，其具体步骤为：
1）复合菌剂微球制备：将微孔淀粉灭菌后，按照微孔淀粉和复合菌剂孢子粉的重量比为1:4.5将微孔淀粉和复合菌剂孢子粉混合均匀，加入无菌水，在转速为110r/min、温度为28℃的无菌环境下振荡培养50min，再加入海藻酸钠和聚乙烯醇，在150r/min下磁力搅拌均匀得混合液，将混合液在35min内恒速滴加到体积比为1:0.75的无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中，在32℃的温度条件下交联固化20h得到凝胶球，再于-2℃下冻干至水分含量≤5％，即得复合菌剂微球，备用，上述海藻酸钠为复合菌剂孢子粉重量的0.45倍，聚乙烯醇为复合菌剂孢子粉重量的2.5倍；
2）植物源杀菌剂微球制备：将0.9重量份聚乳酸和12重量份二氯甲烷置于冰水浴中，使聚乳酸溶解，然后加入0.55重量份植物源杀菌剂，搅拌至完全溶解，再加入浓度为12%的明胶水溶液，在分散机中剪切乳化，最后在35℃的条件下避光进行搅拌，直至无二氯甲烷味，收集固形物干燥即得植物源杀菌剂微球，上述明胶水溶液和二氯甲烷的体积比为1:0.1；
3）悬乳剂的制备：取8重量份复合菌剂微球、8重量份植物源杀菌剂微球、0.05重量份分散剂、0.03重量份硅酸镁铝、0.05重量份乙二醇、100重量份水，搅拌混合均匀，即得悬乳剂，上述分散剂为重量比为1:1:0.014的f2、f6和齐墩果酸混合物。
上述复合菌剂微球制备步骤中复合菌剂孢子粉中含有解淀粉芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和寡雄腐霉，其重量比为1:0.8:0.5:1.5；无菌水中含有0.02mm全氟辛酸和0.01mm1,12-十二烷二醇；无菌氯化钙和无菌硼酸混合溶液中无菌氯化钙溶液和无菌硼酸溶液的浓度均为4%，其体积比为1:0.75。
上述植物源微球制备步骤中植物源杀菌剂的成分及其重量份为：柠檬精油5份、茶皂素6份、皂荚甙6份、紫檀素2份。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。